尿液对羟基苯丙氨酸水平在癌症筛选中的应用研究*

徐卫益，许 青，陈保德

(浙江大学医学院附属第一医院检验科/浙江省临床体外诊断技术研究重点实验室，杭州 310003)



·论 著·

尿液对羟基苯丙氨酸水平在癌症筛选中的应用研究*

徐卫益，许 青，陈保德

(浙江大学医学院附属第一医院检验科/浙江省临床体外诊断技术研究重点实验室，杭州 310003)

目的 探讨尿液中对羟基苯丙氨酸(酪氨酸)尿液检测(TUT)在癌症筛选中的应用。方法 取癌症组、非癌症组、健康受试组晨尿，用对水平TUT试剂盒检测，统计分析各组及同组各种疾病间检测结果的差异性。结果 癌症组、非癌症组、健康受试组阳性检出率分别为81.3%、30.8%、33.8%，癌症组显著高于非癌症组和健康受试组，差异有统计学意义(P<0.05)；非癌症组和健康受试组阳性检出率差异无统计学意义(P=0.653)。癌症组中胃、食管癌、肠癌阳性检出率显著高于其他类型癌症，差异有统计学意义(P<0.05)；其他类型癌症检出率差异无统计学意义(P=0.449)。非癌症组中糖尿病患者阳性检出率高于其他各种疾病，差异有统计学意义(P<0.05)；其他各种疾病患者阳性检出率差异无统计学意义(P=0.327)。结论 尿液TUT能很好地用于癌症患者的筛选，尤其是胃肠道癌症患者。

癌； 对羟基苯丙氨酸； 筛选

肿瘤是严重威胁人类健康的高发病率和高病死率疾病，大量研究和资料证实，早期诊断和治疗是防治肿瘤和降低病死率的最有效办法[1]。目前，常规肿瘤标志物检测方法存在单项检出率低、不能早期发现等缺点[2-3]，常常延误疾病的诊断和治疗。寻找一种能早期发现、检测准确且操作简便的标志物及试验方法，是医学研究者不断努力的方向。对羟基苯丙氨酸(酪氨酸)尿液检测(TUT)试剂用于早期发现癌症，科技技术较高，主要原理为：癌症患者尿液中异常升高的酪氨酸代谢产物与检测试剂发生特异性反应，生成具有特征颜色的沉淀物，根据沉淀物颜色目测判断测试结果。笔者通过其在癌症患者、非癌症疾病患者、健康对照者中的检测，了解其在癌症筛选中的作用。现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 TUT试剂由吉林生物研究有限公司生产并提供(产品商标名称“六早”)。收集2015年1～10月浙江大学医学院附属第一医院及浙江省肿瘤医院癌症患者209例，男性124例，女性85例。其中胃、食管癌患者46例，中位年龄59.5岁；肠癌患者38例，中位年龄63.0岁；肝癌患者42例，中位年龄56.0岁；胆囊、胰腺癌患者14例，中位年龄62.0岁；乳腺癌患者30例，中位年龄53.0岁。所有患者均病理组织学诊断明确，并在治疗前留取尿样送检。收集2015年1～10月浙江大学医学院附属第一医院非癌症患者908例，男性382例，女性526例。其中糖尿病患者114例，中位年龄56.0岁；结核患者57例，中位年龄52.0岁；胃炎患者151例，中位年龄49.0岁；肠炎患者44例，中位年龄32.5岁；肝炎患者119例，中位年龄43.0岁；肾病患者104例，中位年龄46.0岁；胆结石患者110例，中位年龄59.0岁；反流性食管炎患者7例，中位年龄50.0岁；子宫肌瘤患者102例，中位年龄46.0岁；卵巢囊肿患者100例，中位年龄34.5岁。所有患者均通过相应的影像学、试验指标、内镜检查诊断明确病情。收集浙江大学医学院附属第一医院健康体检者标本80例，其中男性46例，女性34例，中位年龄51.0岁，影像学及试验指标均正常。

1.2 方法

1.2.1 标本采集 用一次性留尿容器留取患者和健康体检者晨尿标本备检，所有检测在标本留取后2 h内完成。排除黄疸及红、绿色等异常颜色尿液。

1.2.2 检测操作 打开测试瓶，用一次性定量吸管将5 mL尿液加入测试瓶并混匀，静置5 min后观察沉淀物(或混合液)颜色并与标准比色卡对照判断结果。

1.3 统计学处理 检测结果以阴性、弱阳性、阳性和强阳性表示，分别计算各自比例，其中将弱阳性、阳性和强阳性均归为阳性统计。用SPSS16.0软件进行四格表分析，计算敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值等指标，组间阳性检出率比较采用χ2检验，以P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 各组相关检测数据 癌症组、非癌症组、健康受试组临床信息，见表1、2。癌症组、非癌症组、健康受试组检测阳性检出率分别为81.3%、30.8%和33.8%。癌症组阳性检出率显著高于非癌症组和健康受试组，差异有统计学意义(P<0.05)；非癌症组和健康受试组阳性检出率差异无统计学意义(P=0.653)，见表3。该检测试剂敏感性为81.3%，特异性为68.9%，阳性预测值为35.6%，阴性预测值为94.6%，见表4。

表1 癌症组患者临床信息一览表

表2 非癌症组及健康受试组临床信息一览表

2.2 不同癌症患者阳性检出率及比较 癌症组患者中，胃、食管癌、结肠癌患者阳性检出率显著高于其他癌症患者，差异有统计学意义(P<0.05)；其他类型癌症检出率差异无统计学意义(P=0.449)，见表5。

2.3 非癌症组和健康受试组阳性检出率及比较 非癌症组、健康受试组阳性检出率为14.3%～47.4%；其中糖尿病患者阳性检出率显著高于其他疾病和健康受试组，差异有统计学意义(P<0.05)；其他各种疾病患者和健康受试组阳性检出率差异无统计学意义(P=0.327)，见表6。

表3 3组阳性检出率及组间比较

表4 尿对羟基苯丙氨酸检测法诊断癌症的结果(n)

表5 不同癌症患者阳性检出率及比较

表6 非癌症组和健康受试组阳性检出率及比较

3 讨 论

世界卫生组织发表《全球癌症报告2014》指出，新增癌症患者有一半出现在亚洲，大部分来自中国，中国新增癌症患者数量位居世界第一。全国肿瘤登记中心发布《2012中国肿瘤登记年报》显示，我国每天新增肿瘤患者8 550例，患者数最多的癌症类型依次为肺癌、胃癌、结直肠癌、肝癌和食管癌，每分钟有6人被诊断为癌症、5人死于癌症。癌症高病死率主要由于我国癌症患者发现时较多处于中晚期，对肿瘤缺乏快速、特异的早期诊断手段，目前癌症的诊断主要通过实验室免疫学酶学检测、影像学检查等，某些检查费用昂贵，在一般健康体检过程中无法普及。

早在20世纪80年代，有学者采用核磁共振(NMR)技术检测癌症患者尿液成分，证实癌症患者尿液单羟酚类物质显著增加。近年来，通过体液代谢组学研究，发现癌症患者尿液中存在肿瘤标志物[4-7]。目前采用的尿液检测试剂原理为：当检查者体内有癌细胞活动时，肿瘤细胞异常增殖引发机体应激反应，体内特异氨基酸代谢异常增高，导致尿液中色氨酸、酪氨酸及代谢衍生物-5-羟吲哚乙酸、对羟基苯丙酮酸水平增高[8]，此类物质能与尿检试剂呈特异性显色反应，帮助其用于临床对癌症的早期普查筛选，有利于癌症早发现、早诊断、早治疗。

本次试验结果显示，癌症组阳性检出率显著高于非癌症组和健康受试组，3组分别为81.3%、30.8%和33.8%。癌症组中阳性检出率从高到低依次为结直肠癌、胃及食管癌、肺癌、肝癌、乳腺癌、胆囊和胰腺癌。胃肠癌患者阳性检出率显著高于其他种类癌症，与罗阳等[9]的报道部分一致，分析原因可能与胃肠癌病变能加速体内氨基酸代谢，导致尿中氨基酸代谢产物增多；但肝癌患者的阳性检出率(73.8%)比报道(100.0%)显著偏低，可能与研究人群不同有关，还需进一步分析。TUT试剂敏感性为81.3%，特异性为68.9%，阳性预测值为35.6%，阴性预测值为94.6%，说明检测阴性者排除癌症可靠性高，但检出阳性者还需进一步检查，以排除某些干扰导致的假阳性。

针对非癌症组中出现假阳性，服用能产生大量分解氨基酸的药物、食物可能为主要干扰因素[10]。因此患者需停药3 d、空腹8 h再取新鲜晨尿检测，以提高正确性。在非癌症组中糖尿病患者阳性检出率最高，可能与糖尿病患者机体糖代谢异常生成类似于对羟基苯丙氨酸类物质有关，有待于在以后的试验中加以证明。由此提示，糖尿病患者采用该试剂筛选癌症时若出现阳性，需排除干扰。此外，该试验不适合检测黄疸及红、绿色尿样，以免错判。

综上所述，尿液检测试剂能早期筛选癌症，尤其对胃肠癌患者。检测阳性时需排除药物、食物等干扰因素，并进一步安排相关检查以明确诊断结果。

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Application of urine p-hydroxyphenyl alanine in screening cancer*

XUWeiyi,XUQing,CHENBaode

(DepartmentofClinicalLaboratory,FirstAffiliatedHospitalofCollegeofMedicine,ZhejiangUniversity/KeyLaboratoryofClinicalinVitroDiagnoisticTechnologyofZhejiangProvince,Hangzhou,Zhejiang310003,China)

Objective To evaluate the effect of urine p-hydroxyphenyl alanine test(TUT) in screening cancer.Methods Study subjects were consisted of three groups including cancer patients,non-cancer patients and healthy individuals.Morning urine from the subjects were collected and detected for urine p-hydroxyphenyl alanine(tyrosine) with TUT kit.Chi-square test was used for analysis of differences between the three groups.Results The positive rates of p-hydroxyphenyl alanine in cancer patients(81.3%) was significantly higher than that of non-cancer patients(30.8%) and healthy individuals(33.8%,P<0.05).The difference of the positive rate between the non-cancer patients and healthy individuals didn′t have statistical significance(P=0.653).In cancer patients,positive rates of gastric,esophageal and colon cancer positive rate were significantly higher than other types of cancer(P<0.05).And the positive rate of diabetes in non-cancer group was significantly higher than that of other diseases(P<0.05).Conclusion TUT could be used in screening cancer effectively,especially in screening the gastrointestinal cancer.

cancer; p-hydroxyphenyl alanine; screening

浙江省卫生和计划生育委员会基金项目(2014KYB097)；浙江大学横向科技项目(15-491010-026)。

徐卫益，男，主管技师，主要从事临床基础检验方面的研究。

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.21.007

A

1673-4130(2016)21-2967-03

2016-02-04

2016-04-24)