NT-ProBNP与脂蛋白a测定在2型糖尿病肾损伤中的应用研究

袁玉玶，王 丽，魏学文，余汉忠，权翠侠

(徐州医科大学附属市立医院检验科，江苏徐州 221002)



·论 著·

NT-ProBNP与脂蛋白a测定在2型糖尿病肾损伤中的应用研究

袁玉玶，王 丽，魏学文，余汉忠，权翠侠

(徐州医科大学附属市立医院检验科，江苏徐州 221002)

目的 探讨氨基末端B型利钠肽前体(NT-ProBNP)与脂蛋白a在2型糖尿病患者中的变化。方法 健康对照组62例，2型糖尿病患者129例，其中不伴糖尿病肾病64例(DM组)、伴糖尿病肾病65 例(DN组)。干式免疫荧光定量法测定NT-ProBNP，免疫比浊法测定血清脂蛋白a与胱抑素C(Cys-C)。结果 健康对照组血清NT-ProBNP与脂蛋白a水平为(58.62±24.31)pg/mL、(102.35±43.50)mg/L；DM组为(368.70±356.50)pg/mL、(192.19±184.40)mg/L；DN组为(820.66±730.85)pg/mL、(328.17±285.71)mg/L。健康对照组血清Cys-C水平为(0.52±24.31)mg/L；DM组为(0.84±0.12)mg/L；DN组为(1.97±1.15)mg/L。结论 NT-ProBNP、脂蛋白a和糖尿病及其微血管病变密切相关，可作为诊断糖尿病肾病和评估肾脏损伤程度的指标。

糖尿病； 肾脏损伤； 氨基末端B型利钠肽前体； 脂蛋白a

糖尿病是由多种病因引起的内分泌代谢性疾病，最常见慢性并发症为糖尿病慢性肾脏疾病，此为终末性肾衰的主要原因，早期积极干预是改变患者预后的关键[1]。研究表明，氨基末端B型利钠肽前体(NT-ProBNP)可能是预测慢性肾脏疾病的新标志物[2]。糖尿病引起动脉粥样硬化可导致微血管病变，糖尿病肾病为糖尿病微血管病变的并发症。脂蛋白a水平升高与冠状动脉粥样样硬化的发生密切相关，是当前心脑血管疾病极有价值的危险性预测指标。研究表明，脂蛋白a与糖尿病微血管病变密切相关，是2型糖尿病肾病患者肾损伤进展的独立危险因素[3]；胱抑素C(Cys-C)反映广泛内皮功能紊乱和血管损伤，是与肾小球滤过率相关的重要指标，也是评价糖尿病肾损伤可靠、敏感的内源性指标[4]。笔者通过检测血清NT-ProBNP与脂蛋白a水平在2型糖尿病患者中的变化，将其与Cys-C进行相关性分析，探讨血清NT-ProBNP与脂蛋白a联合检测对2型糖尿病患者肾损伤的意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料 根据2010年中国糖尿病学会研究制订的中国人2型糖尿病的诊断治疗标准[5]，选择2011～2015年在本院确诊的2型糖尿病患者129例[其中不伴糖尿病肾病64 例(DM组)、伴糖尿病肾病65 例(DN组)]，年龄25～82岁。所有入选患者均排除急慢性心力衰竭、急性脑血管意外、冠心病等。健康体检者62例(健康对照组)，年龄20～66岁，排除肝脏、肾脏、内分泌和心脑血管疾病。

1.2 方法

1.2.1 样品收集 禁食12 h，早上空腹抽血5 mL，其中2 mL血用乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)抗凝混匀；3 mL血待血清析出，3 000 r/min离心10 min，分离血浆和血清。

1.2.2 测量仪器 NT-ProBNP测定采用干式免疫荧光定量法，试剂和标准品由基蛋生物科技公司提供；仪器为基蛋生物科公司Getein110型分析仪。脂蛋白a与Cys-C测定采用胶乳增强免疫比浊法和免疫比浊法，试剂和标准品由万泰德瑞诊断技术有限公司提供；仪器为贝克曼公司AU5800型生化分析仪。

2 结 果

血清NT-ProBNP、脂蛋白a与Cys-C检测结果 2型糖尿病患者NT-ProBNP水平显著高于健康对照组(P<0.05),脂蛋白a水平显著高于健康对照组(P<0.05)。DN组NT-ProBNP与脂蛋白a水平显著高于DM组(P<0.05)和健康对照组(P<0.05)。见表1。

表1 血清NT-ProBNP、脂蛋白a与Cys-C检测结果比较

3 讨 论

B型利钠肽(BNP)由心肌细胞受刺激后产生，初始产物为前BNP前体(Pro-ProBNP)，该肽的1个26氨基信号肽被立即去除，形成含108个氨基酸的BNP前体(ProBNP)，后者在内切酶的作用下裂解为含76个氨基酸、无生物活性的NT-ProBNP和含32个氨基酸、有活性的BNP。因为NT-ProBNP半衰期长，稳定性好，故临床通过检测血浆NT-ProBNP来了解BNP水平。BNP通过受体介导与利钠肽受体C(NPR-C)结合被清除，也可通过血流的中性肽链内切酶而降解。BNP主要通过与利钠肽受体A(NPR-A)作用，发挥生物学效应，在调节血压、血容量、水盐平衡等方面发挥着重要作用。

2型糖尿病引起慢性组织器官损伤是1个漫长过程，在慢性组织器官损伤过程中会产生多种不良化学物质，导致血管紧张度与水盐平衡紊乱，发生细胞过度肥大、纤维化等病理改变，而肾脏发生上述变化时不仅激活BAAS系统使致密斑球旁细胞产生肾索，同时也激活心脏利钠肽系统，可致BNP分泌增加。NPR-A、NPR-C主要存在于肾脏及血管，肾损伤引起肾脏NPR-A、NPR-C受损。NPR-A减少将引起BNP反应性增加[6]。BNP的清除主要由NPR-C介导，通过细胞内吞作用，最终由细胞内的溶酶体降解，而NPR-C减少可引起BNP升高。此外，BNP可通过非特异中性肽链内切酶打开利钠肽环状结构而降解，此酶在肺脏及肾脏中水平较高。肾脏中BNP具有扩张肾小球入球动脉、收缩出球动脉等功能，有助于提高肾小球滤过率。肾损伤患者肾小球滤过率下降可能导致BNP升高，促使肾小球滤过率增加；2型糖尿病肾损伤患者常伴有钠、水潴留，可致心脏负荷加重，使BNP分泌增加。糖尿病肾损伤是2型糖尿病的1种慢性并发症，BNP可直接作用于出球小动脉，加重肾小球高滤过、高灌注状态，引起肾脏损伤。本研究结果显示，DN组患者NT-ProBNP水平高于DM组患者(P<0.05)，因此2型糖尿病患者除考虑常见急慢性心力衰竭、冠心病等因素引起的NT-ProBNP水平升高，还应考虑糖尿病肾脏损伤引起的NT-ProBNP水平升高。

脂蛋白a是1种由肝脏合成的特异脂蛋白，和低密度脂蛋白(LDL)结构相似，除含有载脂蛋白B(ApoB)外，还含有与纤维蛋白溶酶原(PLG)结构相似的载脂蛋白A(ApoA)，其主要生理功能尚未完全阐明，猜测其可能参与血清脂质到组织细胞的转运。由于ApoA与PLG在结构上有同源性，ApoA可能与PLG竞争细胞表面的PMC受体或者直接阻碍PLG的激活，从而抑制纤维蛋白的溶解，促进动脉粥样硬化的形成。血清脂蛋白a水平升高反映了广泛内皮功能紊乱和血管损伤，是与动脉硬化病变进展过程中疾病演进的相关标志。由各种原因导致水平增高的脂蛋白a也可直接促进粥样血栓的形成。2型糖尿病引起的血管并发症，以大血管病变引起的冠心病和微血管病变引起的糖尿病肾病最为常见[7-9]。在肾脏中，血清脂蛋白a可渗透到达内膜下与血管壁胶原蛋白、糖蛋白形成动脉粥样斑块，破坏内膜的完整性，还可和血管内膜基质成分(葡聚糖胺、蛋白聚糖和6-硫酸软骨素)结合，引起肾小球基底膜增厚及毛细血管阻塞，进一步导致肾脏微血管内皮损伤和功能减退。2型糖尿病患者脂蛋白a水平升高，会造成肾小球毛细血管阻塞及微循环障碍，并通过某些生长因子的生成，促进肾动脉血管的硬化，导致肾病综合征形成。提示脂蛋白a水平与肾病综合征的发展过程紧密相关，其水平高低一定程度上反映糖尿病肾损伤的严重程度。

Cys-C作为1种小分子蛋白(相对分子质量为13×103)，是胱氨酸蛋白酶的1种抑制剂，机体所有有核细胞均可表达。循环血液中Cys-C能自由透过肾小球，在近曲小管几乎全部被上皮细胞摄取并分解。Cys-C水平不受饮食、身高、体质量、年龄、恶性肿瘤等影响，是反映肾小球滤过率的1个敏感、特异指标[10]。2型糖尿病患者肾小球通透性改变，包括肾小球滤过膜电荷的丢失及基底膜孔径的改变，在糖尿病肾病的早期均表现为Cys-C水平升高。

笔者研究发现2型糖尿病患者NT-ProBNP与脂蛋白a水平显著高于健康对照组,而DN组患者NT-ProBNP与脂蛋白a水平显著高于DM组患者。糖尿病患者NT-ProBNP与脂蛋白a检测结果与Cys-C相关性分析发现其呈正相关，表明NT-ProBNP、脂蛋白a水平与糖尿病肾病的肾脏损伤程度平行。NT-ProBNP、脂蛋白a和Cys-C联合检测可作为诊断糖尿病肾病和评估肾脏损伤程度的指标，对研究2型糖尿病患者肾损伤具有重要价值。

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Clinical value of detection of N-terminal pro-brain natriuretic peptide and lipoprotein(a) in patients with type 2 diabetic nephropathy

YUANYuping,WANGLi,WEIXuewen,YUHanzhong,QUANCuixia

(DepartmentofClinicalLaboratory,theMunicipalHospitalAffiliatedofXuzhouMedicalUniversity,Xuzhou,Jiangsu221002,China)

Objective To observe the changes of N-terminal pro-brain natriuretic peptide(NT-ProBNP) and lipoprotein(a)[LP(a)] level in patients with type 2 diabetes and to investigate their clinical significance in patients with diabetic nephropathy.Methods A total of 62 healthy individuals were selected as control group,and 64 patients with type 2 diabetes without diabetic nephropathy were selected as DM group and 65 patients type 2 diabetes combined with diabetic nephropathy were chosen as DN group.The levels of NT-ProBNP and LP(a) was detected by the methods of dry type immune fluorescence quantitative and latex enhanced immune turbidity respectively.Results The level of serum NT-ProBNP in DM group[(368.70±356.50)pg/L] was significantly higher than that in the control group[(58.62±24.31)pg/L],P<0.05.The level of LP(a) in DM group[(192.19±184.40)mg/L] was significantly higher than that in control group[(102.35±43.50)mg/L],P<0.05.And the level of NT-ProBNP[(820.66±730.85)pg/mL] and LP(a)[(328.17±285.71)mg/L] in DN group were significantly higher than that in DM group(P<0.05).Conclusion NT-ProBNP and LP(a) in type 2 diabetic patients may correlate with type 2 diabetes and diabetic microangiopathy,which can be used as the reliable clinical markers for assessing the severity and diagnosis of diabetic nephropathy.

diabetes; diabetic nephropathy; N-terminal pro-brain natriuretic peptide; lipoprotein(a)

袁玉玶，女，副主任技师，主要从事免疫方面的研究。

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.21.021

A

1673-4130(2016)21-3007-03

2016-03-28

2016-06-18)