急性脑梗死及脑出血患者应激状态下肠黏膜屏障功能变化

陈巍巍刘芷含张侠黄文娟谢志远孙慧勤

急性脑梗死及脑出血患者应激状态下肠黏膜屏障功能变化

陈巍巍1刘芷含2张侠1黄文娟1谢志远3孙慧勤1

目的 研究急性脑梗死、脑出血患者发病早期肠道屏障功能随病程进展的变化。方法 选取2013年9月～2015年12月徐州市中心医院神经内科，并确诊为急性脑梗死、脑出血的患者67例,分别于不同时间点取静脉血（12 h内、24 h、72 h、1周、3个月）。同时选取同期门诊健康体检者54例作为对照组，检测其血浆D-乳酸（D-LAC）、二胺氧化酶（DAO）水平。结果 （1）与正常对照组相比，急性脑梗死、脑出血患者在发病后均出现肠黏膜屏障功能改变，且脑梗死、脑出血组患者在发病24h后较发病初期（12 h内） D-LAC、DAO水平逐渐升高，72 h达到高峰,随后1周血清D-LAC及DAO持续高水平（P＜0.05）；（2）在发病12 h内、24 h、72 h、1周、3个月5个时间段内脑梗死、脑出血患者两组间的D-LAC、DAO水平对比，差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 脑梗死及脑出血患者急性期应激状态下均会出现肠黏膜屏障功能的改变，且两者在相同发病时间段内无显著差异。

脑梗死；脑出血；肠黏膜屏障；DAO；D-LAC

急性脑血管疾病是一种常见的神经系统疾病，可引起全身应激反应，其中肠道被认为是机体应激的中心器官[1-2]。深入研究脑-肠关系，有利于更好地理解应激相关性胃肠疾病的发病机制，本实验通过检测急性脑血管病后患者血浆二胺氧化酶（Diamine Oxidase，DAO）活性、血浆D-乳酸（D-1actic acid，D-LAC）水平，观察患者肠道功能变化，指导相关药物临床治疗。

1 资料与方法

1.1 一般资料

依据全国第四次脑血管病学术会议提出的诊断标准，选取2013年9月～2015年12月就诊于徐州市中心医院神经内科并确诊为发病12 h内的急性脑血管病的患者67例，男35例，女32例。筛选发病12 h内入院患者，经头CT或头MRI检查证实为脑梗死38例（男20例，女18例），脑出血29例（男15例，女14例）；入组患者年龄48～75岁，平均（59.6±5.8）岁。并选择同期我院体检中心的健康体检者54例作为正常对照组，在体检当日抽取静脉血，排除标准同病例组，男29例，女25例，年龄49～73岁，平均年龄（60.7±6.5）岁。

1.2 实验方法

选取急性脑梗死、脑出血患者，分别于12 h内、24 h、72 h、1周、3个月5个时间段内采集静脉血5 ml促凝管，室温放置20 min，2 500 r/min 离心20 min，收集上清，于-80℃冰箱储存。应用ELISA法检测DAO（ELISA试剂盒，购自武汉优尔生公司）、D-LAC（ELISA试剂盒购自南京建成）水平。

1.3 观察指标

急性脑血管病患者发病12 h内、24 h、72 h、1周、3个月及正常体检患者血清DAO、D-LAC水平。

1.4 统计学方法

采用SPSS 16.0软件对数据进行分析处理，计量资料以（均数±标准差）表示，两组样本比较采用t检验，多组样本均数比较采用单因素方差分析（One-way ANOVA），以P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 比较发病后不同时间段脑梗死和脑出血患者D-LAC水平变化

脑梗死和脑出血两组患者发病12 h，24 h，静脉血标本D-LAC水平较正常对照组相比，差异无统计学意义（P＞0.05）；D-LAC在发病72 h出现高峰期，3个月D-LAC基本降至正常范围（P＜0.05）。而两组在相同取样时间段内D-LAC水平对比，差异无统计学意义（P＞0.05）（见表1）。

表1 脑梗死及脑出血发病后不同时间段D-LAC水平的比较（±s）

表1 脑梗死及脑出血发病后不同时间段D-LAC水平的比较（±s）

注：与正常对照组比较，*P＜0.05；与发病后3个月检测值比较，#P＜0.05

组别 例数D-LAC（nmol/ml）12 h 24 h 72 h 1周 3个月脑梗死组 38 7.85±1.72 7.68±1.74 21.84±5.21*# 21.21±4.49*# 7.23±1.78脑出血组 29 7.17±1.83 8.82±1.48 22.73±4.69*# 23.78±4.01*# 8.67±3.66正常对照组 52 7.66±1.61 - - - -

表2 脑梗死及脑出血发病后不同时间段DAO水平的比较（±s）

表2 脑梗死及脑出血发病后不同时间段DAO水平的比较（±s）

注：与正常对照组比较，*P＜0.05；与发病后3个月检测值比较，#P＜0.05

组别 例数DAO（ng /ml）12 h 24 h 72 h 1周 3个月脑梗死组 38 208.86±51.87 689.46±129.06 1 059.95±198.29*# 966.81±238.20*# 304.55±65.55脑出血组 29 250.15±91.62 762.44±154.85 1 105.79±208.58*# 920.88±204.56*# 392.72±138.14正常对照组 52 173.30±55.06 - - - -

2.2 比较脑梗死和脑出血患者发病后DAO水平变化

脑梗死、脑出血两组患者均在发病72 h DAO出现高峰期（P＜0.05），且高峰持续1周左右，72 h较1周 DAO水平，差异无统计学意义 （P＞0.05）。两组间数值在相同时间段内DAO水平对比，差异无统计学意义（P＞0.05）（见表2）。

3 讨论

Hans Selye于1936年首先在医学领域提出了应激概念，并把它定义为“对任何刺激引起的共同生物反应”[3]，随后的相关研究表明，神经系统可以受到应激状态的干扰，通过脑-肠轴的相互作用引起免疫紊乱[4-5]，胃肠道系统受损[6]。

DAO被认为是肠黏膜功能的标志酶，是存在于成熟的小肠黏膜绒毛上皮细胞内的高活性细胞内酶，在外周血中有稳定的活性，能准确反映肠黏膜的成熟度、完整性和损伤程度[7]。D-LAC是肠道固有细菌的代谢终产物，哺乳动物既不产生也不能代谢D-LAC。急性应激状态下，肠黏膜通透性增加，细菌在受损的局部大量繁殖，使血液中的D-LAC水平升高[8]。该项研究发现，黏膜屏障功能障碍发生在急性脑血管病发病后72 h，并且损害可以持续1周以上。且脑梗死及脑出血患者肠黏膜屏障功能在相对应的时间点无显著差异。

肠道的免疫调节、应激调节作用近年逐渐被关注。脑-肠轴通过神经系统、肽类物质及一些细胞因子将神经系统与消化系统紧密联系在一起，正确及时的处理方式可以预防应激状态下引起的肠源性感染，改善急性脑血管病患者的预后。

[1] Singh V，Roth S，Llovera G，et al. Microbiota Dysbiosis Controls the Neuroinflammatory Response after Stroke[J]. J Neurosci，2016，36（28）：7428-7440.

[2] Biancheri P，Di Sabatino A，Corazza GR，et al. Proteases and the gut barrier[J]. Cell Tissue Res，2013，351（2）：269-280.

[3] Zhang Y，Gu F，Wang F，et al. Effects of early enteral nutrition on the gastrointestinal motility and intestinal mucosal barrier of patients with burn-induced invasive fungal infection[J]. Pak J Med Sci，2016，32（3）：599-603.

[4] Bhattacharyya A，Chattopadhyay R，Mitra S，et al. Oxidative stress: an essential factor in the pathogenesis of gastrointestinal mucosal diseases[J]. Physiol Rev，2014，94（2）：329-354.

[5] Filpa V，Moro E，Protasoni M，et al. Role of glutamatergic neurotransmission in the enteric nervous system and brain-gut axis in health and disease[J]. Neuropharmacology，2016（111）：14-33.

[6] Cakmaz R，Büyükaşık O，Kahramansoy N，et al. A combination of plasma DAO andcitrulline levels as a potential marker for acute mesenteric ischemia[J]. Libyan J Med，2013，26（8）：1-6.

[7] Ye-cheng Liu，Zhi-wei Qi，Shi-gong Guo，et al. Role of corticotrophin releasing hormone in cerebral infarction-related gastrointestinal barrier dysfunction[J]. World J Emerg Me，2011，2（1）：59-65.

[8] Zhou K，Jiang M，Liu Y，et al. Effect of bile pigments on the compromised gut barrier function in a rat model of bile duct ligation[J]. PLoS One，2014，9（6）：e98905.

Early Changes of Intestinal Mucosal Barrier Function in Patients With Acute Cerebral Infarction and Cerebral Hemorrhage

CHEN Weiwei1LIU Zhihan2ZHANG Xia1HUANG Wenjuan1XIE Zhiyuan3SUN Huiqin11 Department of Neurology Internal Medicine, The Central Hospital of Xuzhou, Xuzhou Jiangsu 221000, China, 2 Department of Neurology Internal Medicine, The Affiliated Hospital of Xuzhou Medical University, Xuzhou Jiangsu 221000, China, 3 Department of Gastrointestinal Surgery, The Central Hospital of Xuzhou, Xuzhou Jiangsu 221000, China

Objective To explore the changes of intestinal barrier function in patients with acute cerebral infarction and cerebral hemorrhage in the early stage. Methods 67 cases of patients with acute cerebral infarction and cerebral hemorrhage were enrolled in department of neurology from September 2013 to December 2015. Blood samples were taken from these patients at different time points(within 12 h, 24 h, 72 h, 1 week, 3 months). At the same time, D-LAC and DAO levels were measured in 54 cases of patients with outpatient physical examination during the same period as control to compare the changes of intestinal function in the patients. Results Compared with the normal control group, acute cerebral infarction, cerebral hemorrhage occurred after the change in the incidence ofintestinal mucosal barrier function, and cerebral infarction, cerebral hemorrhage group after the onset of 24 h compared with the onset of the early (12 h) D-LAC, DAO levels gradually increased, then increased gradually, reached the peak at 72 h, followed by 1 weeks of sustained high level of serum D-LAC and DAO (P ＜0.05). (2) D-LAC, DAO levels of patients with cerebral infarction and cerebral hemorrhage in different Onset time (within 12 h, 24 h, 72 h, 1 week, 3 months) had no significant difference (P ＞ 0.05). Conclusion Both of patients with cerebral infarction and cerebral hemorrhage at acute phase of stress state appear the changes of intestinal mucosal barrier function, and there was no significant difference between two groups in the same period of time.

Cerebral Infarction, Cerebral Hemorrhage, Intestinal mucosal barrier, DAO, D-LAC

R642

A

1674-9308（2016）32-0099-02

10.3969/j.issn.1674-9308.2016.32.055

1 徐州市中心医院神经内科，江苏 徐州 221000；2 徐州医学院附属医院神经内科，江苏 徐州 221000；3 徐州市中心医院胃肠外科，江苏 徐州 221000

孙慧勤，E-mail：353001083@qq.com