车轮虫丰度与水环境因子相关性研究

张立强+李媛+周伟东+邓平+丁桂珍+李勤+艾桃山

摘要：为了解车轮虫（Trichodina spp.）丰度与水环境因子之间的相关性，对养殖水体黄颡鱼腮部寄生的车轮虫丰度进行了统计，同时对水体的温度、总磷、活性磷、总氮、亚硝酸盐、氨氮进行了测定。相关性分析表明，黄颡鱼腮部寄生车轮虫丰度与总磷浓度、活性磷浓度、总氮浓度显著负相关；与亚硝酸盐浓度显著正相关；与温度（24.0～30.5 ℃）、氨氮浓度无显著相关性。

关键词：车轮虫（Trichodina spp.）；感染丰度；总磷；总氮；亚硝酸盐；氨氮

中图分类号：Q959.11 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2017）06-1103-04

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2017.06.028

Abstrat： In order to reveal the trichodinid（Ciliophora：Peritrichida） abundance and its relationship to water quality parameters，the abundance of Trichodina spp. on the gill of yellow catfish was investigated in aquaculture water. Meanwhile，the temperature，total phosphorus，available phosphorus，total nitrogen，nitrite，and ammonia nitrogen data were got. Results indicated that Trichodina spp. abundance was negatively correlated with the concertration of total phosphorus，available phosphorus and total nitrogen. Positively correlated with the concertration of nitrite. No significant correlation with temperature（between 24.0～30.5 ℃） and ammonia nitrogen.

Key words：Trichodina spp.；abundance；total phosphorus；total nitrogen；nitrite；ammonia nitrogen

車轮虫（Trichodina spp.）是一大类对水产动物危害极大、可自由运动的原生动物，隶属于寡膜纲（Oligohymeno）缘毛目（Peritrichia）游泳亚目（Mobilina）车轮虫科（Trichodinidae）车轮虫属（Trichidina），该虫具有附着盘结构（图1）。车轮虫广泛寄生于淡水鱼类、海水鱼类、贝类、甲壳类、两栖类的鳃、皮肤、鳍条、膀胱、输尿管、生殖系统等部位，可导致严重的组织病变[1-8]，且车轮虫的感染一年四季都存在，只是感染程度及造成的危害不同而已。随着中国水产养殖业的发展，集约化、规模化等高密度的养殖模式成为主要的养殖模式，加上水体的流动性，病原的相互隔离很难掌控，车轮虫病每年都会大规模暴发。车轮虫的感染除了直接导致水产动物的死亡之外，还会间接引起细菌和病毒的继发感染，造成严重的经济损失并制约着水产养殖业的健康发展[9-16]。

有关车轮虫的研究主要集中于车轮虫的分类学、药物防治及生态应用方面[6，17-21]，在生产实践中车轮虫病害的发生与养殖水环境因子关联性研究较少。为了揭示车轮虫与环境因子之间的关系，研究了黄颡鱼养殖水体车轮虫感染丰度与水温、总磷、活性磷、总氮、亚硝酸盐、氨氮之间的关系。

1 材料与方法

1.1 采样点

武汉市水产科学研究所山南养殖池、江夏黄颡鱼养殖户、江夏山坡黄颡鱼养殖基地。

1.2 试验设计

水样采集：7～9月每周采样两次，时间为上午的9：00～10：00，分别于塘四角及中央用采水器各采5 L水，取混合样。理化因子的取样测定与浮游生物样品采集同步进行，其中，温度现场测定，总磷、总氮、NH4-N、NO2-N、和PO4-P等水质指标参照水和废水监测分析方法进行[22]。

车轮虫感染丰度的统计：现场捕获黄颡鱼取第二片鳃组织，用200 μL无菌水反复冲洗鳃组织，涂片于显微镜下统计车轮虫数量。

1.3 数据分析

通过GraphPad Prism 5软件分析环境因子与车轮虫感染丰度之间的相关性。

2 结果与分析

2.1 车轮虫数量及水环境因子测定

试验共采集数据30次，分别测定了总磷、总氮、NH4-N、NO2-N、和PO4-P的浓度，同时统计了第二片鳃组织上的车轮虫数量，结果见表1。

2.2 车轮虫的感染丰度与温度相关性分析

数据测定时间为7～9月，水温在24.0～30.5 ℃间波动，即在平均温度27.25 ℃上、下波动11.8%。第二鳃片组织上的车轮虫感染丰度在20～420个之间波动，即在平均感染丰度220个上、下波动90.9%（图1）。相关性分析结果表明，车轮虫的感染丰度与温度无显著相关性（P=0.682 0）。

2.3 车轮虫的感染丰度与总磷浓度相关性分析

总磷含量在0.017～0.719 mg/L间波动，即在平均浓度0.368 mg/L上、下波动95.3%。第二鳃片上的车轮虫感染丰度在20～420个间波动，即在平均感染丰度220个上、下波动90.9%。相关性分析结果表明，车轮虫的感染丰度与总磷浓度显著负相关（P=0.000 3）。

2.4 車轮虫的感染丰度与活性磷浓度相关性分析

活性磷含量在0.013～0.265 mg/L间波动，即在平均浓度0.139 mg/L上、下波动90.6%。第二鳃片上的车轮虫感染丰度在20～420个之间波动，即在平均感染丰度220个上、下波动90.9%。相关性分析结果表明，车轮虫的感染丰度与活性磷浓度显著负相关（P=0.007 5）。

2.5 车轮虫的感染丰度与总氮浓度相关性分析

总氮含量在0.171～1.946 mg/L间波动，即在平均浓度1.059 mg/L上、下波动83.8%。第二鳃片上的车轮虫感染丰度在20～420个间波动，即在平均感染丰度220个上、下波动90.9%。相关性分析结果表明，车轮虫的感染丰度与总氮的浓度显著负相关（P=0.026 6）。

2.6 车轮虫的感染丰度与亚硝酸盐浓度相关性分析

亚硝酸盐含量在0.008～0.071 mg/L间波动，即在平均浓度0.040 mg/L上、下波动79.7%。第二鳃片上的车轮虫感染丰度在20～420个之间波动，即在平均感染丰度220个上、下波动90.9%。相关性分析结果表明，车轮虫的感染丰度与亚硝酸盐浓度显著正相关（P=0.002 1）。

2.7 车轮虫的感染丰度与氨氮浓度相关性分析

氨氮含量在0.021～0.880 mg/L之间波动，即在平均浓度0.451 mg/L上、下波动95.3%。第二鳃片上的车轮虫感染丰度在20～420个之间波动，即在平均感染丰度220个上、下波动90.9%。相关性分析结果表明，车轮虫的感染丰度与氨氮浓度无显著相关性（P=0.908 8）。

3 小结与讨论

唐发辉[23]研究表明车轮虫在10～30 ℃之间，车轮虫的感染率随着温度的升高而升高，Palm等[24]研究显示车轮虫对川鲽的感染率随温度的下降反而上升，本研究发现在24.0～30.5 ℃之间没有直接相关性，这可能与温度变化范围小有关，同时由于本研究调查的水体为养殖水体，存在其他化学指标浓度较高的因素，间接导致车轮虫对温度的变化不敏感。同时，研究发现车轮虫的感染丰度与水体总磷、总氮、活性磷的浓度呈负相关性，总磷、总氮、活性磷指标反映的是水体的富营养化水平。Marcogliese等[19]研究表明鱼体感染车轮虫感染丰度在污染物浓度为1%时明显上升，但是没有给出污染物的各项指标参数。本研究测定结果表明，总磷含量在0.017～0.719 mg/L间波动，总氮含量在0.171～1.946 mg/L间波动，活性磷含量在0.013～0.265 mg/L间波动，已达富营养水平，在该水体中车轮虫的食物微生物及有机碎屑含量极为丰富，车轮虫无需附着于鱼体摄取食物，这可能是导致车轮虫感染丰度下降的主要原因。亚硝酸盐是一种对黄颡鱼有毒有害的化学物质，高含量的亚硝酸会抑制黄颡鱼的生理指标，导致黄颡鱼的免疫力下降，本研究测定结果表明，亚硝酸盐浓度在0.008～0.071 mg/L间波动，在该浓度下由于黄颡鱼体质下降，使得车轮虫的感染丰度上升。这与Ogut等[25]研究结果是一致的，同样高含量的氨氮浓度也会抑制黄颡鱼的生理指标，但是在本研究中发现氨氮浓度与车轮虫的感染丰度没有直接的相关性，可能是高浓度的氨氮含量同时对车轮虫的数量造成了一定的抑制效果。

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