响应面法优化超声波辅助乙醇/盐双水相萃取栀子中京尼平苷

刘磊磊， 赵 帅， 王 欢， 彭 胜2， 郭 婕2

(1.吉首大学 林产化工工程湖南省重点实验室, 湖南 张家界 427000；2.湖南省植物功能成分利用协同创新中心， 湖南 张家界 427000)

响应面法优化超声波辅助乙醇/盐双水相萃取栀子中京尼平苷

LIU Leilei

刘磊磊1,， 赵 帅1， 王 欢1， 彭 胜1,2， 郭 婕1,2

(1.吉首大学 林产化工工程湖南省重点实验室, 湖南 张家界 427000；2.湖南省植物功能成分利用协同创新中心， 湖南 张家界 427000)

采用超声波辅助乙醇/盐双水相萃取技术对栀子中京尼平苷的提取分离效果进行了系统研究，在单因素试验基础上，采用响应曲面试验设计进行优化，进一步比较了该方法与超声波溶剂提取法、热回流提取法等传统方法对京尼平苷的提取效果。结果表明：超声波辅助乙醇/盐双水相萃取的最佳工艺条件为构建10.0 g乙醇/NaH2PO4双水相体系，其中加入无水乙醇4 mL(即体系中乙醇质量分数为31.56%)，NaH2PO4质量分数为15.00%，超声波温度为30 ℃，超声波时间为30 min，栀子干粉加入量为0.03 g，上相中京尼平苷的得率为51.77 mg/g。该方法提取时间短、提取温度较低，而且得率较高，对栀子中京尼平苷的提取效果明显优于超声波溶剂提取法和热回流提取法等传统方法。

双水相体系；超声波辅助；栀子；京尼平苷

茜草科植物栀子的果实是我国一味传统中药，是卫生部公布的第1批药食两用资源，具有护肝、利胆、降压、镇静、止血、消肿等作用，中医临床上常用于治疗黄疸型肝炎、扭挫伤、高血压、糖尿病等[1-3]。京尼平苷(GP)属于环烯醚萜类结构，是栀子的主要药效成分，随产地和采摘时间不同含GP为3%～8%，GP对消化系统、心血管系统和中枢神经疾病有显著疗效，具有抗癌、抗炎和治疗软组织损伤的作用[4-8]。GP的传统提取分离方法，一般从栀子干果或栀子黄色素废液中提取，选用甲醇、乙醇、水等极性溶剂作为提取溶剂，采用冷浸、渗漏、热回流等方法提取，活性炭脱色，乙酸乙酯脱脂，再用柱层析进一步分离纯化，洗脱液用丙酮重结晶可得京尼平苷单体，一般100 g栀子可得到2.0 g GP单体[9]。由此可见，传统分离方法步骤繁多、繁琐耗时，产率偏低，成本较高，同时存在溶剂残留问题。双水相萃取技术(ATPS)作为一种新型液/液萃取分离技术，具有易于放大、可连续化操作、易集成技术、绿色环保等优点[10]。自从1956年Albertsson[11]首次采用聚合物/聚合物ATPS技术实现叶绿素的分离以来，ATPS技术在黄酮、生物碱、萜类及多酚等天然产物的分离纯化中有着广泛的应用[12-13]。近年来，ATPS技术被报道用于GP的提取分离。Pan等[14]采用ATPS技术从500 g栀子中得到纯度为77%的GP产品39 g，同时发现增加盐浓度和减少PE62浓度均能增加GP在盐相的分配系数。ATPS组成一般有2种聚合物、聚合物和盐、离子液体和盐、小分子亲水有机溶剂和盐等体系。特别是亲水有机溶剂/盐ATPS体系，具有溶剂容易回收、成本低廉、易于放大等优点，在天然活性成分分离中具有独特的优势，与超声波及微波技术联用后，利用超声波与微波的空化作用、机械作用和热效应原理，实现提取分离同步完成，简化传统工艺，能有效提高提取效率，在中药活性成分的分离中应用较多，比如，降香中鹰嘴豆芽素A[15]、丹参中紫草酸B[16]、金银花中黄酮和糖[17]、木豆根中染料木素和芹菜素[18]。本研究构建多种亲水性有机溶剂/盐ATPS体系，辅助超声波提取技术提取分离栀子中GP，采用单因素试验和响应曲面优化提取分离工艺，并与超声波溶剂提取法、热回流提取法进行了对比，旨在寻找适合栀子中京尼平苷提取分离的时间短、能耗低、得率高的有效方法。

1 实 验

1.1 原料、试剂与仪器

栀子购于安徽省亳州市贡药饮片厂(批号：140624)，粉碎，80 ℃烘干后放置在干燥器内，避光常温保存，备用(京尼平苷为5.8%)；京尼平苷对照品(批号：141115，HPLC测得纯度≥98%)，上海如吉生物科技有限公司；无水乙醇、正丙醇、异丙醇和无机盐均为分析纯；甲醇，HPLC色谱纯试剂，购于天津康科德科技有限公司；水为去离子水。

LC-20A高效液相色谱仪，日本岛津公司；SB-25-12DT型超声波清洗仪，宁波新艺生物科技股份有限公司；TDL- 40B型离心机，上海安亭科学仪器厂；AL204型万分之一天平，梅特勒-托利多(上海)有限公司。

图1 双水相相图Fig.1 The phase diagrams of aqueous two-phase at room temperature

1.2 双水相相图的绘制

为了确定小分子醇和2种无机盐水溶液的分相范围，采用浊点法[19]绘制了正丙醇、异丙醇、乙醇 3种小分子醇与NaH2PO4和(NH4)2SO4两种无机盐所组成的双水相相图，结果见图1。如图1所示，图中描绘的曲线为双节线，在曲线上方区域内为分相区域，在曲线下方为均相区域。在分相区域内，上相为富集小分子醇相，下相为富集无机盐相，由此确定分相时醇及盐的质量分数。实验过程中，先配置一定浓度无机盐水溶液，通过滴定管逐滴滴加小分子醇，逐渐增加小分子醇的用量来改变浊点位置，从而绘制双节线。当小分子醇加入过多时，由于盐析作用导致无机盐结晶析出，影响双水相体系组成的确定。

1.3 超声波辅助双水相萃取栀子中京尼平苷

在15 mL具塞PP离心管中精确加入一定质量的无机盐和去离子水，充分溶解后，加入一定质量的无水乙醇，使得双水相体系总质量为10.0 g。称取一定质量的栀子干粉加入到该双水相体系中，在超声波作用(功率为240 W)下于一定温度下提取一定时间；然后进行离心处理(4 000 r/min，15 min)，以加快双水相体系分相速率，离心后上下两相间界面清晰(GP主要富集于上相中)，栀子残渣全部富集在上下两相之间。将上下相溶液全部移出置于有刻度的10 mL玻璃试管内，分别记录上、下相体积。上、下相溶液过0.45 μm有机滤膜，并进行HPLC检测。通过式(1)～(3)计算分配系数(K)、相比(R)和得率(Y)。

K=Ct/Cb

(1)

R=Vt/Vb

(2)

Y=CtVt/(1 000md)

(3)

式中：Ct、Cb—上、下两相中GP的质量浓度，mg/L；Vt、Vb—上、下两相溶液的体积，mL；md—栀子加入量，g。

1.4 GP的HPLC检测

GP色谱条件：液相色谱柱为Agilent TC C18柱(4.6 mm×250 mm, 5 μm)；流动相为甲醇- 0.1%磷酸水溶液，体积比35∶65；检测波长238 nm；流速1.0 mL/min；柱温35 ℃；进样量20 μL。

精密称取一定量的GP对照品于5 mL容量瓶中，用50%甲醇水溶液溶解并定容，得到1 046 mg/L的 GP对照品储备液，4 ℃保存，备用。采用逐级稀释法将对照品储备液稀释，制得质量浓度分别为 2.1、10.7、26.8、66.9、167.4、418.4和1 046 mg/L GP的对照品溶液。按上述色谱条件进行HPLC检测，以对照品质量浓度(mg/L)为横坐标(X)，色谱峰面积为纵坐标(Y)，绘制对照品标准曲线，进行线性回归分析，确定回归方程为：Y=30 188X+71 261(R2=0.999 9，n=8)，线性范围为2.1～1 046 mg/L。

2 结果与分析

2.1 不同条件对超声波辅助双水相萃取效果的影响

2.1.1 双水相体系 在前期研究中，考察了乙醇与NaH2PO4、(NH4)2SO4、K3PO4、K2HPO4、KH2PO4和NaCl共6种无机盐的分相情况[20]，结果显示：NaCl溶液和乙醇不能形成双水相体系，KH2PO4在水中溶解度偏小，其他4种无机盐可以和乙醇形成稳定的双水相体系。由于K3PO4和K2HPO4的水溶液显弱碱性，而GP分子对碱性溶液敏感，所以重点考察了(NH4)2SO4和NaH2PO4两种无机盐的分相能力。文献报道[21]，正丙醇、异丙醇和乙醇3种小分子醇的分相能力为：正丙醇>异丙醇>乙醇，与图1结果一致。因此，选用(NH4)2SO4和NaH2PO4作为分相无机盐，正丙醇、异丙醇和乙醇作为分相有机溶剂，构建双水相体系，分别对栀子中GP进行提取分离，由醇、无机盐和水构建10.0 g双水相体系，加入0.1 g栀子干粉，超声波辅助萃取温度30 ℃，超声波作用时间30 min，结果见表1。由表1可知，乙醇/(NH4)2SO4和乙醇/NaH2PO4对栀子中GP具有较好的分离效果，但是(NH4)2SO4在构建的双水相体系中很容易结晶析出，而且乙醇/NaH2PO4所组成的双水相体系可以得到较高的得率、分配系数和相比，所以选用乙醇/NaH2PO4为最佳ATPS体系。

2.1.2 NaH2PO4质量分数 为了优化NaH2PO4的质量分数，分别称取1.50～2.70 g(即质量分数15%～27%)的NaH2PO4与质量分数30%乙醇构建10.0 g双水相体系，加入0.1 g栀子干粉，温度30℃,超声波时间30 min,结果见表1。由表1可知，随着NaH2PO4质量分数的增加，GP的得率先由47.68 mg/g增加到48.14 mg/g，后又下降至39.06 mg/g。由此可以推断，随着NaH2PO4质量分数的增加，GP分子与无机盐之间的静电作用增大，导致GP易富集到上相；同时相比变小，乙醇相体积减小，导致上相中GP得率先升高后下降。所以选择NaH2PO4的质量分数为18%。

表1 不同醇/无机盐双水相体系对栀子中GP提取分离效果的影响

2.1.3 乙醇质量分数 由图1可知，当乙醇质量分数低于20%时，需要较高质量分数的NaH2PO4水溶液才能形成双水相体系，而当乙醇质量分数大于36%时，双水相体系中有NaH2PO4析出。为了优化乙醇的质量分数，向含有1.80 g(18%)NaH2PO4的双水相体系中，加入2.40～3.20 g(24%～32%)乙醇和 0.1 g栀子干粉，温度30 ℃，超声波提取30 min，结果见图2(a)。由图2(a)可知，当乙醇质量分数由24%增加到32%时，分配系数和相比呈现明显增大趋势，而GP的得率在乙醇质量分数为30%时达到最大。由此可知，乙醇质量分数是影响GP提取分离的重要影响因素。所以选用18%NaH2PO4/30%乙醇双水相体系进行后续研究。

2.1.4 提取温度 在由18%NaH2PO4与30%乙醇组成的双水相体系中，加入0.1 g栀子干粉，设定超声波作用时温度在20 ℃到60 ℃之间，提取30 min，实验结果见图2(b)。由图2(b)可知，温度由20 ℃上升到30 ℃时，GP的得率明显增加；温度在30 ℃到50 ℃变化时，GP的得率变化不明显，当温度达到60 ℃时，GP的得率明显下降。原因可能是升高温度可以增强超声波传质作用，增大GP的得率；而温度过高时，栀子中更多杂质溶出，抑制了GP的溶出，导致GP的得率减小。基于低能耗要求，选用30 ℃作为超声波提取温度。

2.1.5 提取时间 在确定双水相体系组成为18%NaH2PO4和30%乙醇，加入0.1 g 栀子干粉，提取温度为30 ℃条件下，选择提取时间为20～60 min，考察时间对GP得率的影响，结果见图2(c)。由图2(c)可知，在提取时间为30 min时，分配系数、相比和得率均达到最大值；提取时间超过30 min后，分配系数、相比和得率均逐渐下降。原因可能是延长提取时间，可以将GP更充分溶出，萃取更加彻底；但是过长的提取时间导致更多的杂质溶出，影响双水相萃取的选择性分配，使GP得率下降。所以提取时间选用30 min。

2.1.6 栀子干粉加入量 在上述优化实验条件下，栀子干粉加入量选择为0.03～0.50 g，实验结果见图2(d)。由图2(d)可知，栀子干粉加入量对相比影响不大；栀子干粉加入量在0.03～0.40 g范围内，分配系数逐渐降低，当栀子干粉加入量为0.50 g时，分配系数略有升高；随着栀子干粉加入量的增加，GP得率则是先增加到50.18 mg/g，后下降至41.02 mg/g。这可能是由于栀子干粉加入量为0.05 g时，GP在上相中溶解达到饱和，增加栀子干粉加入量，上相中GP的量仍然保持不变，所以导致GP得率先增加后下降[22]。此外，随着栀子干粉加入量的增加，体系中GP分子和杂质也都增加，减弱了双水相体系的分离效果，导致GP得率下降。所以栀子干粉加入量选用0.05 g。

图2 不同条件对分配系数、相比和得率的影响

2.2 响应曲面法优化实验结果与分析

依据单因素试验结果，在超声波提取温度30 ℃和提取时间30 min条件下，选择NaH2PO4质量分数(X1)、乙醇质量分数(X2)和栀子干粉加入量(X3)为自变量，GP得率(Y)为应变量，采用Desgin-Expert 8.05b软件进行3因素3水平响应曲面回归分析，响应曲面分析试验因素设计及试验结果见表2。

表2 响应曲面试验设计与结果

对回归方程进行方差分析，结果见表3。

表3 回归模型方差分析

响应曲面图可以用来解释变量之间的相互作用以及用来测定在最大响应条件下每个变量的最佳水平。依据二次多元回归方程，固定其中某一个因素，可以作出另外2个因素的响应曲面图，结果见图3。由图3可知，在所选范围内存在极值点，即响应面最高点，其中图3(a)中曲线坡度较陡，表明NaH2PO4和乙醇质量分数交互作用明显，而图3(b)和3(c)中图曲面平缓，表明栀子干粉加入量和NaH2PO4以及栀子干粉加入量和乙醇质量分数之间的交互作用较小，这与方差分析结果一致。由Design-Expert软件对模型方程进行GP得率的最大化分析，得到GP的最大响应值(Y)时，因素X1、X2、X3对应的值分别为15.00%、31.19%、0.03 g，GP得率最大预测值为52.28 mg/g。

图3 响应曲面图

2.3 验证试验

为检测响应曲面法所得结果的可靠性，进行验证实验。考虑到实验的可操作性，加入无水乙醇 4 mL(即体系中乙醇质量分数为31.56%)，NaH2PO4质量分数15.00%，栀子干粉加入量0.03 g，超声波温度为30 ℃，提取时间为30 min，进行6次平行实验，GP得率分别为51.94、51.83、52.14、51.56、51.59和51.54 mg/g，平均值为51.77 mg/g，RSD为0.24%，接近模型最佳预测值52.28 mg/g，由此可知该模型可靠。

2.4 与传统提取方法对比

对比实验中选择《中华人民共和国药典》2015版一部中栀子中GP的提取方法和经典的热回流提取作为参考。《中华人民共和国药典》中提取方法：称取栀子干粉1.00 g，加50%甲醇水溶液10 mL，超声波处理40 min，过滤，定容至25 mL，滤液进行HPLC定量检测；热回流提取法：称取栀子干粉1.00 g，加20 mL去离子水，温度设定为100 ℃，回流时间为1 h，回流次数为2次，过滤，定容至100 mL，滤液进行HPLC定量检测。3种提取方法的比较结果如表4所示。由表4可知，热回流提取法提取效果最好，超声波辅助乙醇/盐双水相萃取(UAATPE)法次之，《药典》提取法最差。进一步对比3种提取方法的提取时间和提取温度可知，UAATPE法所用提取时间最短、提取温度较低，而且得率与热回流提取法相差不大。由此可知，UAATPE法提取栀子中GP具有提取效果良好、提取时间短、能耗低等优点。

3 结 论

3.1 采用超声波辅助乙醇/盐双水相萃取(UAATPE)栀子中京尼平苷(GP)，在单因素试验基础上进行响应面试验设计筛选出最优的双水相体系及最佳工艺条件为：在10.0 g乙醇/NaH2PO4双水相体系中，加入无水乙醇4 mL(即体系中乙醇质量分数为31.56%)、NaH2PO4质量分数15.00%、超声波温度 30 ℃、时间30 min、栀子干粉加入量0.03 g，上相中GP的得率高达51.77 mg/g。

3.2 该UAATPE技术对栀子干粉中GP的提取涉及液-固萃取和液-液萃取2个过程，在液-固分离中，超声波作用加快了提取速度；在液-液萃取中，利用双水相萃取技术的选择性分配原理将GP主要富集在上相中，而杂质和全部不溶物被保留在水相或两相界面间，从而实现栀子中GP的提取和分离同步完成。与《中华人民共和国药典》中超声波溶剂提取法及热回流提取法等传统方法相比，UAATPE技术提取时间最短、提取温度较低，而且得率也较高，作为一种多功能萃取方法，具有提取时间短、能耗低等优点，提取分离效果优于传统方法。

[1] 中华人民共和国药典委员会. 中华人民共和国药典：第一部[M]. 北京: 中国医药科技出版社, 2015: 248. Chinese Pharmacopoeia Commission. Pharmacopoeia of the People′s Republic of China：Volume Ⅰ[M]. Beijing: China Medicine Science and Technology Press, 2015: 248.

[2] TANG W C, EISENBRAND G. Chinese Drugs of Plant Origin-GardeniajasminoidesEillis [M]. Berlin: Springer-Verlag, 1992: 539-543.

[3] CHANG W L, WANG H Y, SHI L S, et al. Immunosuppressive iridoids from the fruits ofGardeniajasminoides[J]. Journal of Natural Products, 2005, 68(11): 1683-1685.

[4] DENG Y H, GUAN M F, XIE X X, et al. Geniposide inhibits airway inflammation and hyperresponsiveness in a mouse model of asthma [J]. International Immunopharmacology, 2013, 17(3): 561-567.

[5] CHEN J Y, WU H, LI H, et al. Anti-inflammatory effects and pharmacokinetics study of geniposide on rats with adjuvant arthritis [J]. International Immunopharmacology, 2015, 24(1): 102-109.

[6] FU Y H, LIU B, LIU J H, et al. Geniposide, fromGardeniajasminoidesEllis, inhibits the inflammatory response in the primary mouse macrophages and mouse models [J]. International Immunopharmacology, 2012, 14(4): 792-798.

[7] WANG G F, WU S Y, XU W, et al. Geniposide inhibits high glucose-induced cell adhesion through the NF-κB signaling pathway in human umbilical vein endothelial cells [J]. Acta Pharmacologica Sinica, 2010, 31(8): 953-962.

[8] WANG C J, WANG S W, LIN J K. Suppressive effect of geniposide on the hepatotoxicity and hepatic DNA binding of aflatoxin B1 in rats [J]. Cancer Letters, 1991, 60(2): 95-102.

[9] 郑礼胜, 倪娜, 刘向前, 等. 京尼平苷和京尼平研究及应用现状 [J]. 药物评价研究, 2012, 35(4): 289-298. ZHENG L S, NI N, LIU X Q, et al. Study and application of geniposide and genipin [J]. Drug Evaluation Research, 2012, 35(4): 289-298.

[10] RATANAPONGLEKA K. Recovery of biological products in aqueous two phase systems [J]. International Journal of Chemical Engineering and Applications, 2010, 1(2): 191-198.

[11] ALBERTSSON P A. Partition of Cell Particles and Macromolecules [M]. New York: Wiley, 1986.

[12] FEDERICO R R, JORGE B, OSCAR A, et al. Aqueous two-phase affinity partitioning systems: Current applications and trends [J]. Journal of Chromatography A, 2012, 1244: 1-13.

[13] 刘磊磊, 李秀娜, 赵帅. 双水相萃取在中药活性成分提取分离中的应用进展 [J]. 中草药, 2015, 46(5): 766-773. LIU L L, LI X N, ZHAO S. Advances in application of aqueous two-phase system in separation and purification of active constituents from Chinese materia medica [J]. Chinese Traditional Herb Drugs, 2015, 46(5): 766-773.

[14] PAN I H, CHIU H H, LU C H, et al. Aqueous two-phase extraction as an effective tool for isolation of geniposide from gardenia fruit [J]. Journal of Chromatography A, 2002, 977(2): 239-246.

[15] MA F Y, GU C B, LI C Y, et al. Microwave-assisted aqueous two-phase extraction of isoflavonoids fromDalbergiaodoriferaT. Chen leaves [J]. Separation and Purification Technology, 2013, 115: 136-144.

[16] GUO Y X, HAN J, ZHANG D Y, et al. An ammonium sulfate/ethanol aqueous two-phase system combined with ultrasonication for the separation and purification of lithospermic acid B fromSalviamiltiorrhizaBunge [J]. Ultrasonics Sonochemistry, 2012, 19(4): 719-724.

[17] LIU Y, HAN J, WANG Y, et al. Selective separation of flavones and sugars from honeysuckle by alcohol/salt aqueous two-phase system and optimization of extraction process [J]. Separation and Purification Technology, 2013, 118: 776-783.

[18] ZHANG D Y, ZU Y G, FU Y J, et al. Aqueous two-phase extraction and enrichment of two main flavonoids from pigeon pea roots and the antioxidant activity [J]. Separation and Purification Technology, 2013, 102: 26-33.

[19] ASENJO J A, ANDREWS B A. Aqueous two-phase systems for protein separation: Phase separation and applications [J]. Journal of Chromatography A, 2012, 1238: 1-10.

[20] 赵帅, 刘磊磊, 郭婕, 等. 双水相气浮溶剂浮选法分离富集杜仲叶中京尼平苷酸 [J]. 中草药, 2015, 46(16): 2400-2406. ZHAO S, LIU L L, GUO J, et al. Separation and enrichment of geniposidic acid from leaves ofEucommiaulmoides by aqueous two-phase flotation [J]. Chinese Traditional Herb Drugs, 2015, 46(16): 2400-2406.

[21] JIANG X M, LU Y M, TAN C P, et al. Combination of aqueous two-phase extraction and cation-exchange chromatography: New strategies for separation and purification of alliin from garlic powder [J]. Journal of Chromatography B, 2014, 957: 60-67.

[22] FAN J P,CAO J, ZHANG X H, et al. Optimization of ionic liquid based ultrasonic assisted extraction of puerarin from radixPuerariaelobataeby response surface methodology [J]. Food Chemistry, 2012, 135(4): 2299-2306.

Optimization of Ultrasonic Assisted Extraction of Geniposide from Gardenia Fruits by Using Ethanol/Salt Aqueous Two-phase System with Response Surface Method

LIU Leilei1,2, ZHAO Shuai1, WANG Huan1, PENG Sheng1,2, GUO Jie1,2

(1.Key Laboratory of Hunan Forest Products and Chemical Industry Engineering, Jishou University, Zhangjiajie 427000, China;2.Hunan Co-innovation Center for Utilization of Botanical Functional Ingredients, Zhangjiajie 427000, China)

An ultrasonic-assisted technology combined with ethanol/NaH2PO4aqueous two-phase system (UAATPE) was developed for the extraction and purification of geniposide (GP) from gardenia fruits. Based on the results of single factor experiments, the Box-Behnken Design combined with response surface methodology was applied to optimize the operating parameters. Furthermore, the comparisons with ultrasonic solvent extraction, heat reflux extraction, and ultrasonic-assisted aqueous two-phase extraction were also assessed. GP was mainly extracted into the top ethanol-rich phase. And the optimal experimental conditions were 10.0 g ethanol/salt aqueous two-phase system,NaH2PO4mass fraction 15.00%, ethanol 4 mL(ethanol mass fraction 31.56%), extraction temperature 30 ℃, extraction time 30 min and sample loading 0.03 g. And the maximum yield of GP in top phase was 51.77 mg/g. The comparison results indicated that ultrasonic-assisted aqueous two-phase extraction was more efficient and environmentally friendly than ultrasonic solvent extraction and heat reflux extraction, for the technique had the shorter extraction time, the lower extraction temperature and the higher extraction efficiency.

aqueous two-phase systems; ultrasonic assisted; gardenia fruits; geniposide

10.3969/j.issn.0253-2417.2017.02.012

2016- 06-27

国家自然科学基金资助项目(31560105);湖南省自然科学基金资助项目(14JJ6037)

刘磊磊(1984— )，男，河南汝州人，讲师，博士，主要从事天然产物化学与分离新方法研究；E-mail:liull126@126.com。

TQ35

A

0253-2417(2017)02- 0093- 08

刘磊磊，赵帅，王欢，等.响应面法优化超声波辅助乙醇/盐双水相萃取栀子中京尼平苷[J].林产化学与工业，2017，37(2)：93-100.