建立HPLC法测定盐酸法舒地尔注射液的含量

索英梅

摘 要： 目的：采用HPLC测定盐酸法舒地尔注射液的含量。方法：采用HPLC法，色谱柱：色谱柱：Diamonsil （鉆石） C18柱 250×4.6mm，5μ，流动相：磷酸盐缓冲液-乙腈（体积比为900：100），检测波长：275nm，流速：1.0ml/min，进样量：20μl，柱温：室温 。结果：盐酸法舒地尔浓度范围在7.5μg/ml～90μg/ml，线性回归方程为y = 372461x+162205，r = 0.9999，浓度与峰面积呈良好的线性相关；平均回收率为100.17%，RSD为1.26%，重复性100.31%，RSD（%）为0.68%。溶液稳定性8小时内稳定较好，RSD（%）为0.17%；结论：该HPLC测定盐酸法舒地尔注射液的含量方法简便，准确度高，能准确的测定其含量。

关键词： 高效液相色谱法；盐酸法舒地尔注射液；含量测定

盐酸法舒地尔注射液是一种高效的血管扩张药，临床用于治疗脑血管痉挛引发的蛛网膜下出血，目前盐酸法舒地尔注射液的含量测定方法多数还是紫外分光光度法和和高氯酸滴定法测定[1-4]。由于HPLC法灵敏度高，能准确的测定含量，因此本文建立了HPLC测定盐酸法舒地尔注射液的含量。

1仪器与试药

1.1仪器

岛津LC-10AT，紫外检测器；色谱柱 Diamonsil （钻石） C18柱 250×4.6mm，5μ；梅特勒—托利多MS205DU十万分之一电子天平。

1.2试药

盐酸法舒地尔对照品：来源：中国食品药品检定研究院，批号：100614-201603 纯度：99.9%。

参比制剂：山东鲁抗医药集团鲁亚有限公司规格1.0g 批号161102

供试品批号：170401、170102、170403

磷酸二氢钾 厂家：北京化工厂 批号2017021

无水磷酸氢二钠、厂家：天津市光复精细化工研究所 批号20160206

乙腈（色谱纯） 厂家：Honey well 批号171A1H

2方法与结果

2.1色谱条件

色谱条件与系统适用性试验 色谱柱：Diamonsil （钻石） C18柱 250×4.6mm，5μ，流动相：磷酸盐缓冲液-乙腈（体积比为900：100），检测波长：275nm，流速：1.0ml/min，进样量：20μl，柱温：室温 。

2.2测定法

取本品，加水制成每1ml中约含盐酸法舒地尔30μg的溶液，作为供试品溶液，精密量取20μl注入液相色谱仪，记录色谱图；另取法舒地尔对照品适量，加水制成每1ml中约含盐酸法舒地尔30μg的溶液，摇匀，作为对照品溶液，同法测定，按外标法以峰面积计算，即得[5，6]。

2.3方法学验证

2.3.1线性与范围

取盐酸法舒地尔对照品15.06mg至10ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，作为储备液。分别量取储备液0.25ml，0.5ml，1ml，2ml，3ml，置50ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，制成浓度分别为7.5ug/ml、15ug/ml、30ug/ml、60ug/ml、90ug/ml的供试品溶液。精密量取上述供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图；以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标绘制标准曲线。

结果：在7.5μg/ml～90μg/ml范围内，盐酸法舒地尔的线性回归方程为y = 372461x+162205，r = 0.9999。Y轴截距与100%响应值的比值为1.55%，小于2%，且响应因子的RSD为0.33%。浓度与峰面积呈良好的线性相关。

2.3.2回收率试验

对照品贮备液的制备 精密称取盐酸法舒地尔对照品15.11mg，加水溶解并稀释至100ml，制成含盐酸法舒地尔150ug/ml的溶液.

供试品贮备液的制备 取盐酸法舒地尔原料（批号：含量：99.9%）15.31mg，加水至50ml，制成300ug/ml的溶液，作为供试品溶液。

供试品溶液制备 精密量取三份供试品溶液2.5ml，置50ml量瓶中，分别加入对照品贮备液3.0ml、5.0ml、7.0ml，加水定容至刻度，摇匀，分别作为供试品溶液Ⅰ（80%）、Ⅱ（100%）、Ⅲ（120%）。照上述含量测定法，在275nm的波长出分别测定峰面积。计算盐酸法舒地尔含量。结果表明：三份样品的回收率分别为100.11%、99.46%、100.05%，平均回收率为99.87%，：RSD为0.65%，均符合准确度试验要求。

2.3.3 重复性考察

精密配制供试品6份，照含量测定方法测定，计算其RSD值，测定结果分别为：100.93%、100.67%、100.67%、99.31%、99.74%、101.01%。平均含量为100.31%，RSD（%）为0.68%。试验结果表明，本方法重复性良好。

2.3.4精密度考察

取盐酸法舒地尔对照品适量，加水制成每1ml含0.03mg溶液做为供试品溶液，连续进样5次，记录峰面积，结果：平均峰面积为2347.334，RSD为：0.23%本方法精密度良好。

2.3.5溶液稳定性试验

取本品，照含量测定法加水制成每1ml中约含盐酸法舒地尔30μg的溶液，于室温（25℃）下放置，分别于0、2 、4 、6 、8小时后取样，精密量取20ul注入液相色谱仪，记录色谱图。结果8小时内的平均含量为99.59%，RSD为0.17%。结果表明供试品溶液在8小时较稳定，无需现配现制。

2.3.6供试品含量测定

精密量取三批供试品及参比制剂按照上述含量测定方法测定其含量。三批供试品含量分别是100.69%，99.99%，100.71%，参比制剂含量为101.38%。三批供试品及被仿制品含量均不少于90.0% 。

3结论

本文建立了HPLC法测定盐酸法舒地尔的含量，并对其建立的方法进行方法学验证，主要包括线性，重复性、准确度、精密度、溶液稳定性试验等方面进行验证。结果通过对三批供试品和参比制剂的检验，结果表明该方法能有效的测定盐酸法舒地尔注射液的含量。

参考文献

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