肥胖伴高脂血症患者血清食欲素A变化及其与胰岛素抵抗相关性研究

周 菁 钱玲华 胡碧群

肥胖和高脂血症作为代谢综合征（metabolic syndrome，MS）的重要组分，对心脑血管的潜在危害已成为全球性的公共卫生问题。研究[1]发现，超过70%的肥胖症患者存在高脂血症。目前公认胰岛素抵抗（insulin resistance，IR）及继发的高胰岛素血症是肥胖和高脂血症发生发展的重要病理基础[1-3]。食欲素A（orexin A）是由下丘脑合成和分泌的一种具有促进摄食作用的小分子神经多肽，近年研究[4-5]发现，orexin A与IR关系密切。本研究通过检测肥胖合并高脂血症患者血清orexin A水平，分析其与IR的关系，以期为肥胖和高脂血症的防治提供新途径和新靶点。

1 资料和方法

1.1 临床资料 选择2016年2月—2017年1月本院门诊或住院的肥胖伴高脂血症患者96例，其中男52例，女 44例，平均年龄（52.32±7.28）岁。纳入标准：（1）均符合中华医学会内分泌学分会肥胖学组制定的《中国成人肥胖症防治专家共识》中肥胖的诊断标准[6]：体质指数（BMI）≥28kg/m2，腰围男性＞90cm，女性＞85cm。（2）符合中国成人血脂异常防治指南修订联合委员会制定的《中国成人血脂异常防治指南（2016年修订版）》中血脂异常的诊断标准[7]：空腹血浆总胆固醇（TC）≥5.2mmol/L和（或）甘油三酯（TG）≥1.7mmol/L和（或）低密度脂蛋白（LDL-C）≥3.4mmol/L和（或）高密度脂蛋白（HDL-C）≤1.0mmol/L。（3）年龄 18～75 岁。（4）就诊前 2 个月未用胰岛素增敏剂、调脂药。（5）排除糖尿病、肝脏疾病、甲状腺功能异常、肿瘤等引起的继发性血脂异常及垂体瘤、库欣综合征引起的继发性肥胖者、年龄＜18岁或＞75岁者、妊娠哺乳期妇女。（6）患者或家属签署知情同意书。选取同期本院健康体检者78名作为对照组，均来源于门诊体检人员，年龄20～75岁，其中男43名，女 35 名，平均（49.50±9.25）岁，均无糖尿病、肥胖、高血压及高脂血症病史。观察组与对照组在年龄及性别构成比上差异无统计学意义（P＞0.05）；本研究经本院伦理委员会批准同意。

1.2 方 法 所有入组受试者均禁食10h以上，于次日清晨8:00—10:00空腹抽取肘静脉血8mL，置于EP管室温下放置1h后，4℃ 4000r/min离心10min，去上清液后取血清置-70℃冰箱保存待用，用于相关指标测定。

1.3 观察指标

1.3.1 体质指数（body mass index，BMI）及腰臀比（waist-to-hip ratio，WHR） 由经过培训的人员测量受试者身高、体质量、腰围、臀围以减少试验误差。腰围按照WHO推荐的肋骨下缘与髂嵴最高点连线的中点作为测量点，臀围以耻骨联合和背后臀大肌最凸处为测量点。所有受试者均脱鞋、免冠、仅穿内衣，取站立位在平静呼气状态下，用软尺水平环绕测量部位，松紧适度，测量过程中嘱受试者避免吸气，并保持软尺各部分处于水平位，分别以kg、cm为单位记录，数据精确到0.1kg或0.1cm（BMI=体质量/身高2，WHR=腰围/臀围）。

1.3.2 血清orexin A水平测定 采用酶联免疫吸附试验法（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）进行。人orexin A ELISA试剂盒由美国DSL公司提供（批号YS01201B）。采用AMR-100酶标仪测定各孔吸光度值，并根据绘制的标准曲线计算相对应的浓度。

1.3.3 胰岛素抵抗指数（homeostasis model assessment，HOMA-IR） 采用贝克曼库尔特AU5800全自动生化分析系统检测空腹血糖（fasting blood glucose，FBG）水平，采用放射免疫法检测空腹胰岛素（fasting blood insulin，FBIn）水平（人胰岛素放射免疫试剂盒由上海瑞齐生物试剂有限公司提供），采用稳态模型评价法（homeostatic model assessment，HOMA）计算胰岛素抵抗程度，将数据代入如下公式计算得出：HOMA-IR=（FBG×FBIn）/22.5。

1.3.4 血脂指标测定 采用贝克曼库尔特AU5800全自动生化分析系统检测。试剂盒由山东博科生物产业有限公司提供（批号A135464）。

1.4 统计学方法应用SPSS13.0软件进行统计分析，计量资料以均数±标准差（x±s）表示，性别比较采用χ2检验，正态分布数据经方差齐性检验后采用独立样本t检验，相关性分析采用Sperman检验，P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组BMI、WHR比较 观察组BMI及WHR均较对照组明显升高，差异有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 肥胖伴高脂血症患者与对照组BMI、WHR比较（x±s）

2.2 两组血脂指标比较 观察组血清TC、TG、LDLC 水平均明显高于对照组（P＜0.01，P＜0.05），血清HDL-C则明显低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），见表 2。

2.3 两组血清orexin A水平及HOMA-IR比较 观察组血清orexin A较对照组明显下降（P＜0.05），而HOMA-IR值较对照组显著升高（P＜0.01），见表3。

表2 肥胖伴高脂血症患者与对照组血脂指标比较（mmol/L，x±s）

表3 肥胖伴高脂血症患者与对照组血清orexin A水平及HOMA-IR比较（x±s）

2.4 相关性分析 相关性分析表明，orexin A与BMI、WHR、TG、TC、LDL-C、HOMA-IR 均呈明显负相关 （r分别为-0.632、-0.648、-0.834、-0.756、-0.706、-0.547；P＜0.01）；与 HDL-C 呈明显正相关（r=0.818，P＜0.01）。

3 讨论

IR已被证实是诱发肥胖和高脂血症的共同病理基础[1-3]，肥胖症患者中多个环节如炎症、脂肪因子分泌异常、高游离脂肪酸血症及骨骼肌、肝脏的脂质异位沉积等都可干预胰岛素信号的转导，诱导IR的发生[8]。而IR情况下高胰岛素血症进一步刺激食欲增加，促进葡萄糖转化为脂肪，加重血脂代谢紊乱，促进肥胖发展[1]。

Orexin主要由涉及摄食行为的下丘脑区域合成分泌，包括Orexin A及Orexin B两种类型，其中orexin A含33个氨基酸多肽，是存在于神经元囊泡中的一种神经递质或调质，主要参与能量代谢、内分泌平衡及睡眠/唤醒行为等多种生理或病理过程，是机体能量平衡调节网络中的重要物质。Orexin A与IR的关系十分复杂，有可能依赖于血糖水平的变化。Orexin A神经元对循环中的葡萄糖水平十分敏感，单独给胰岛素介导低血糖对食欲素神经元产生明显刺激。Switońska 等[9]研究发现，Orexin A 对胰岛素的刺激呈剂量依赖性，且Orexin A和胰岛素的作用存在时相上的差异。国内赵玉岩等[10]研究发现，高脂膳食诱导的IR大鼠模型中Orexin A及受体表达明显下降。内源性Orexin及其受体信号可能介导了高脂饮食对糖代谢和肥胖的有害作用[11]。Orexin可强烈抑制食源性肥胖以及后续出现的IR[11]。因此在IR的发生和发展中，Orexin A及其受体的基因转录和翻译可能参与调节脂肪-胰岛轴的重要因素。Orexin系统、胰岛素和葡萄糖可能是相互调控、相互制约、密切相关的，它们之间的相互作用涉及整个脂肪-胰岛轴的平衡状态[10]。

目前，Orexin A在肥胖合并高脂血症中的作用仍鲜有报道，仅有的几项临床研究[4]发现，Orexin A是胰岛素抵抗及肥胖发生的重要标志。本研究结果显示，患者组肥胖指数（BMI、WHR）、HOMA-IR 指数及血脂指标（TG、TC、LDL-C）较对照组明显升高，血脂HDL-C水平则明显降低，提示肥胖合并高脂血症患者存在明显的IR。进一步研究发现，患者组血清Orexin A水平较对照组明显下降，这与国内赵玉红等的研究[4]相符。相关性分析提示Orexin A与BMI、WHR、TG、TC、LDL-C、HOMA-IR 均呈明显负相关，与HDL-C呈明显正相关，这提示肥胖合并高脂血症患者中Orexin A水平的减少与肥胖、脂代谢异常及IR密切相关。推测可能的机制是：外周胰岛素抵抗相关的高脂高糖抑制了下丘脑Orexin A的表达，而Orexin A有助于维持下丘脑胰岛素敏感性，Orexin A表达受到抑制后可导致胰岛素受体、瘦素受体及Orexin A受体信号中断，进一步加剧外周组织的IR，从而产生了下丘脑和胰岛素抵抗的恶性循环[12]。

综上所述，肥胖合并高脂血症患者存在明显的IR，Orexin A可能通过调控IR参与肥胖及脂代谢紊乱的发生发展，但其更深层次的机制仍需进一步扩大样本量深入研究。

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