1136例胃癌活检组织HER-2蛋白的表达及其意义

2018-03-17 06:39刘志良黄传生罗庆丰邹弯弯
实用癌症杂志 2018年12期
关键词:缓冲液异质性阳性率

刘志良 高 玟 黄传生 罗庆丰 蔡 勇 邹弯弯

中国胃癌每年新发病例数十万,居消化道肿瘤发病率的第1位,死亡率占癌症致死率的第2位[1]。 我国半数以上的患者在确诊时已经处于中晚期,手术和化疗不能明显延长此类患者的生存时间,分子靶向治疗正成为此类患者的新选择。TOGA研究是胃癌治疗的一个里程碑,其确立了曲妥珠单抗在胃癌HER-2阳性患者中的治疗地位[2]。胃癌中HER-2状态的准确评估是提高靶向治疗疗效的关键,免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)法是最常用的检测方法。本研究应用IHC法检测胃镜活检肿瘤组织HER-2蛋白的表达,并观察其表达与胃癌患者生物学行为的关系。

1 材料与方法

1.1 一般资料

收集2013年12月至2016年8月江西省肿瘤医院病理科存档资料完整的胃癌活检标本1136例,其中男性850例,女性286例;年龄20~90岁,<60岁者457例,≥60岁者679例;所有患者胃镜活检前均未行放化疗及生物治疗。所有肿瘤活检组织经10%中性缓冲福尔马林固定6~48 h后石蜡包埋切片。

1.2 检测方法

标本均采用IHC法染色,一抗及二抗均购自福州迈新生物技术有限公司,一抗为鼠抗人单克隆抗体CerbB-2(克隆号:EP3),试剂盒采用 EnVision 两步法。检测仪器:石蜡切片机(型号:Leica RM2235),显微镜(型号:OLYMPUS BX51)等。

石蜡组织切片常规脱蜡和水化,加3%过氧化氢溶液室温孵育10 min以阻断内源性过氧化物酶;高温高压抗原修复;PBS缓冲液冲洗3×3 min;滴加一抗(鼠抗人单隆抗体CerbB-2),4 ℃冰箱过夜;室温下孵育20 min,PBS缓冲液冲洗3×3 min,滴加二抗(生物素化山羊抗小鼠IgG),室温孵育20 min;PBS缓冲液冲洗3×3 min,滴加新配制的DAB显色液,显微镜下观察,阳性为棕黄色颗粒状、定位于细胞膜;自来水冲洗,苏木精复染,脱水透明,封片、观察结果。

1.3 结果判读

无反应或任何肿瘤细胞无膜染色为0;肿瘤细胞团微弱或隐约可见膜染色(无论染色的肿瘤细胞比例多少)为1+;肿瘤细胞团有弱~中度的基侧膜、侧膜或完全膜染色(无论染色的肿瘤细胞比例多少)为2+;肿瘤细胞的基侧膜、侧膜或完全膜的强染色(无论染色的肿瘤细胞比例多少)为3+。0和1+为HER-2阴性,3+为HER-2阳性,2+为HER-2不确定。内镜活检胃癌标本虽不存在肿瘤细胞百分比界值,但要求至少含有5个阳性细胞的细胞簇。

1.4 统计学方法

所有数据使用SPSS 22.0统计软件进行统计学分析。组间比较用χ2检验,P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 HER-2蛋白的表达

HER-2蛋白IHC 3+为13.2%(150/1136),IHC 2+为18.8%(214/1136),IHC 1+为8.0%(91/1136),IHC 0为60.0%(681/1136)。

2.2 HER-2蛋白表达与胃癌临床病理特征的关系

HER-2蛋白的表达与患者的性别、患病年龄和病变部位无关,与胃癌的分化程度和Lauren分型相关。见表1。

3 讨论

中国两项大型多中心研究数据显示,中国胃癌患者的HER-2阳性率为12%~13%[3-4],本研究中HER-2的阳性率为13.2%,略高于多中心研究的数据。有研究认为胃癌HER-2蛋白过表达与胃癌的病理类型和分化程度密切相关[5],本研究结果显示胃癌活检组织HER-2蛋白表达与肿瘤分化程度和Lauren分型密切相关,在分化好的胃癌组织中阳性率高于分化差的,在Lauren分型中,肠型胃癌HER-2蛋白的表达要显著高于弥漫型和混合型。已有多项研究数据表明,在肠型胃癌和胃食管结合部腺癌中,HER2的阳性率较高[6-8],本研究中胃食管结合部腺癌HER-2蛋白的阳性率(15.0%)高于其他部位,但差异无统计学意义,可能和肿瘤的异质性有关。胃癌的肿瘤异质性比乳腺癌更常见,5%~30%的胃癌出现肿瘤异质性[9],为避免肿瘤的异质性对结果的影响,要求活检时尽可能多点取材、必要时可再次检测。

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