烟酸阿莫西林可溶性粉在猪体内血药浓度测定和药代动力学试验

武晋孝,刘晓东,孟冬霞,武果桃,任 杰,卫顺生,赵 娟,孟 帆,闫益波

(1.山西省饲料兽药监察所,山西 太原 030027;2.山西省武乡县动物防疫监督所 ,山西 长治 046300;3.山西省农业科学院畜牧兽医研究所,山西 太原 030032)

阿莫西林 (Amoxicilin)又称羟氨苄青霉素,为半合成的耐酸广谱青霉素类抗生素。该药抗菌谱广、杀菌力强、作用迅速,对主要的革兰阳性菌及一些阴性菌如链球菌、巴氏杆菌、不产青霉素酶的葡萄球菌、大肠杆菌、沙门菌、奇异变形杆菌等均敏感,可广泛用于治疗各种动物的尿道、呼吸道及皮肤的敏感菌感染。目前,国内已批准使用于猪、牛及家禽的敏感菌感染,临床使用的主要为阿莫西林三水合物。由于阿莫西林水溶性差,按照兽药典生产阿莫西林可溶性粉溶解性较差,通过查阅文献,烟酸作为助溶剂,可显著提高阿莫西林的溶解度。本项目通过研究烟酸阿莫西林可溶性粉在猪体内的生物利用度及药动学特征,并比较烟酸阿莫西林可溶性粉与市售阿莫西林可溶性粉的药动学差异,为临床提供依据。

1　材料与方法

1.1动物 12头健康的长白 ×约克夏×杜洛克杂交猪,公母各半,8周龄左右,体重范围 13～17(15.6 ±1.8)kg。 按常规饲养,自由饮水和采食,饲料为全价日粮,不含抗菌药物。临床观察一周表现健康。猪只随机平均分为两组[1-3],按随机交叉试验设计,第1组进行口服市售的10%阿莫西林可溶性粉药动学试验,第2组进行烟酸阿莫西林可溶性粉的药动学试验。给药剂量均为 10 mg/kg·bw。试验前16 h起及试验期间禁食,仅自由饮水。

1.3仪器 Waters2695高效液相色谱分析系统(2478紫外检测器);涡旋混合机(VORTEX 4);高速冷冻离心机(Biofuge Stratos)。

1.4色谱条件 色谱柱 XDB C18(Φ4.6 mm ×250 mm,5 μm), 流动 相:乙 腈 -0.068 mol/L KH2PO4(4.5∶95.5)[4],流速:1.0 mL/min,检测波长:225 nm,柱温:25℃ ±0.1℃。

1.5给药和血样采集 猪只仰卧保定,从前腔静脉采血。给药前采一次空白血。口服(胃管灌服)给药后分别于 5,20,40 min 及 1、2、3、4、8、12、15、24、36 h采血。每次从静脉采血约3 mL,置于含肝素的离心管中,混匀,4 000 r/min离心 10 min,分离血浆,-20℃冰箱保存至测定。

1.6血浆样品处理 精密量取上述储备血浆样本0.4 mL,补加0.1 mL蒸馏水(添加样品不再补加),加入20%(V/V)高氯酸溶液0.1 mL沉淀蛋白[5],旋涡震荡30 s,高速冷冻离心15 000 r/min(4℃)离心5 min,取上清液100 μL,待测。

1.7药代动力学参数测定 取“1.5”项下储备的血浆样本,按“1.6”和“1.4”项下方法操作,得色谱峰面积(A),代入阿莫西林标准线,得阿莫西林血浆样本浓度。

采用3P97软件处理实测血浆阿莫西林浓度一时间数据,计算出有关药代动力学参数。阿莫西林可溶性粉和烟酸阿莫西林可溶性粉的药代动力学参数采用配对t检验进行统计学比较。

2　结果

药代动力学参数测定 受试猪口服两种阿莫西林可溶性粉后,不同时间血药浓度的实测值见表1,药代动力学最佳数学模型均为一级吸收二室模型,即血药浓度与时间的关系可用下列方程式表示:C=Ae+Be—p一(A+B)e—kat。口服两种阿莫西林可溶性粉的药代动力学参数见表2。

表1　猪单剂量口服两种阿莫西林可溶性粉的血药浓度(μg/mL)　(± SD,n=6)

表1　猪单剂量口服两种阿莫西林可溶性粉的血药浓度(μg/mL)　(± SD,n=6)

ND:notdetectable(检测不到,P＜0.05 μg/mL)

采血时间　　口服阿莫西林______________________可溶性粉(10/%)口服烟酸阿莫西林可溶性粉(60/%)5 m　0.07 ±0.04　0.17 ±0.08 20 m　0.70 ±0.41　1.52 ±0.75 40 m　3.12 ±1.56　6.38 ±3.12 1 h　5.03 ±2.36　6.05 ±3.08 1.5 h　4.85 ±2.32　5.61 ±2.68 2 h　4.75 ±2.38　5.25 ±2.58 3 h　4.23 ±2.16　4.65 ±2.41 4 h　2.54 ±1.32　3.05 ±1.35 8 h　1.02 ±0.52　1.45 ±0.76 12 h　0.16 ±0.08　0.35 ±0.16 15 h　0.10 ±0.04　0.16 ±0.07 24 h　0.05 ±0.02　0.06 ±0.03________36_______________________________________________h_ND_ND

表2　猪单剂量口服两种阿莫西林可溶性粉(10 mg/kg·bw)的药代动力学参数

3　讨论

3.1本试验建立了烟酸阿莫西林可溶性粉中阿莫西林血浆药物浓度的反相高效液相色谱测定方法

利用色谱柱XDB C18柱(Φ4.6 mm×250 mm,5 μm),乙腈 -0.068 mol/L KH2PO4(4.5∶95.5)流动相系统,能够将血浆中杂质、血浆中阿莫西林有效分离,分离度大于1.5。采用20%(V/V)高氯酸溶液直接沉淀血浆蛋白,取上清液测定阿莫西林血浆药物浓度,方法简便,适合于阿莫西林血浆药物浓度测定。

3.2烟酸阿莫西林可溶性粉药代动力学特征 健康猪口服烟酸阿莫西林可溶性粉后,主要动力学参数为:tmax(h)=0.75,Cmax(μg/mL)=6.38,AUC0→t(h·μg/mL)=32.394。以上参数说明烟酸阿莫西林可溶性粉比市售阿莫西林可溶性粉吸收迅速,达峰提前,峰浓度提高,AUC明显增加,揭示了烟酸阿莫西林可溶性粉因溶解度提高而显著提高了阿莫西林的生物利用度。

参考文献: