饲粮铜水平对奶牛生产性能、养分表观消化率及血清生化指标的影响

付辑光 高艳霞 李 妍 李秋凤 曹玉凤 张秀江 李建国*

(1.河北农业大学动物科技学院，保定 071001；2.河北农业大学动物医学院，保定 071001；3.保定市农业局，保定 071000)

微量元素铜对奶牛泌乳与健康有重要作用，随着奶牛生产水平的不断提高，生产者为防止奶牛因缺铜而导致繁殖性能、生产性能和免疫功能的下降，往往在饲粮中超量添加铜[1-2]。早在20世纪初，科学家就证实铜是机体所必需的微量元素之一，它不仅参与酶的合成，还是一些酶的重要组成部分与一些酶的特殊激活剂[3-4]。于先宁等[5]研究表明，饲粮中添加10 mg/kg铜能提高奶牛的乳脂率和产奶量；刘曦[6]报道，当奶牛饲粮中添加16 mg/kg铜时，产奶量比对照组提高了20.79%，当饲粮中添加24 mg/kg铜时，产奶量降低；饲粮中添加适量的铜能提高血清铜蓝蛋白含量和超氧化物歧化酶(SOD)的活性[6-7]，当饲粮中添加24或27 mg/kg铜时，血清铜蓝蛋白含量和SOD活性降低[6-8]；Underwood等[9]提出饲粮中添加硫和钼会降低铜的利用率；对于1头体重650 kg、产奶40 kg的奶牛，饲粮中铜的需要量已由10 mg/kg(NRC，1988)[10]提高到15.7 mg/kg(NRC，2001)[11]。另据报道，奶牛对铜的需要量应在NRC(2001)基础上再提高20%～50%[12]。综上所述，前人对奶牛铜需要量及不同饲粮铜水平对奶牛的影响进行了研究，但试验结果不尽一致，对血清中铜蓝蛋白含量和SOD活性等指标研究较多，而对其他血液指标报道较少，不能全面揭示铜对奶牛生理状态的影响。另外，奶牛品种改良及生产水平提高等因素也会影响奶牛对铜的需要量。本试验旨在通过研究不同饲粮铜水平对奶牛生产性能、养分表观消化率和血清生化指标的影响，为奶牛饲粮中适宜铜水平提出建议值。

1 材料与方法

1.1 试验设计与试验动物

试验在保定昊宇牧业公司奶牛场进行。选择60头健康无疾病且处于泌乳中期的荷斯坦奶牛，采用单因子随机试验设计，随机分为4组，每组15头牛，各组间平均胎次、产奶量和泌乳天数差异均不显著(P>0.05)。以饲料级五水硫酸铜为铜源，各试验组在基础饲粮基础上分别添加0(对照，Ⅰ组)、10(Ⅱ组)、15(Ⅲ组)和20 mg/kg铜(Ⅳ组)，饲粮铜水平分别为8.09、18.09、23.09及28.09 mg/kg DM。试验期93 d，包括90 d饲养试验和3 d消化代谢试验。基础饲粮组成及营养水平见表1。

表1 基础饲粮组成及营养水平(干物质基础)Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet (DM basis) %

续表1项目 Items含量 Content玉米干酒糟及其可溶物 Corn DDGS1.92膨化大豆 Extruded soybean1.55菜籽粕 Rapeseed meal1.15啤酒糟 Brewers dried grain3.91预混料 Premix1)1.00小苏打 NaHCO31.06氧化镁 MgO0.26石粉 Limestone0.64磷酸氢钙 CaHPO40.77食盐 NaCl0.21合计 Total100.00营养水平Nutrient levels2)产奶净能 NEL/(MJ/kg)6.46粗蛋白质 CP16.52粗脂肪 EE4.48中性洗涤纤维 NDF34.77酸性洗涤纤维 ADF21.87钙 Ca0.80磷 P0.63硫 S0.29钼 Mo/(mg/kg)1.96铜 Cu/(mg/kg)8.09

1)预混料为每千克饲粮提供The premix provided the following per kg of the diet：VA 3 169 IU，VD3864 IU，VE 23 IU，Fe (as ferrous sulfate) 15 mg，I (as potassium iodide) 0.5 mg，Se (as sodium selenite) 0.3 mg，Zn (as zinc sulfate) 48 mg，Mn (as manganese sulfate) 14 mg，Co (as cobalt chloride) 0.11 mg。
2)产奶净能(NEL)为计算值，为各原料的NEL[11]分别乘以各自在全混合日粮(TMR)中所占的比例，再相加求和；其余营养水平为实测值。Net energy for lactation (NEL) was a calculated value，which was the sum of NEL[11]of ingredients multiplied by their percentages in the total mixed ration (TMR)； while the other nutrient levels were measured values.

1.2 试验饲粮和饲养管理

试验牛采用散栏饲养，自由采食，自由饮水，每日上料2次，试验组将含有不同铜水平的预混料和精料混匀后再和粗饲料进行搅拌，混匀后分别饲喂。试验期间每天记录产奶量。试验用预混料定制于北京福维康生物科技有限公司。

1.3 样品采集

1.3.1 饲粮样品的采集

试验期间，每周连续3 d称取各试验组饲粮的供应量和剩余量。同时按照四分法，采集饲粮样品，并制成风干样品(65 ℃下烘干48 h至恒重)，置于塑料封口袋内保存。

1.3.2 乳样的采集

试验期间，每天记录日产奶量，每月采集1次奶样，早、中、晚各收集乳样60 mL，将1 d中的乳样按4∶3∶3比例混合均匀，用于乳成分的测定。

1.3.3 血样的采集

饲养试验结束前1天，于晨饲前颈静脉无菌采血，每组采集3头牛，37 ℃水浴0.5 h后离心(1 240×g，15 min)，分离血清。用尖嘴吸管吸取上层血清，分装于带盖的0.5 mL离心管中，做好标记，-20 ℃冻存，用于血清生化指标的测定。

1.3.4 粪样及尿样的采集

饲养试验结束当天，每组随机选择3头试验牛，继续饲喂试验饲粮，采用全收粪和收尿法进行消化代谢试验，连续收集3 d。收集粪便后称重，将每头牛每天的粪样混合均匀后取粪样的5%分成2份，1份加10%的稀硫酸(每100 g粪样加20 mL 10%的稀硫酸)，1份不加酸；尿样收集前在集尿桶中加入200 mL 10%的稀硫酸防止尿样腐败分解，准确计量后取总尿量的1%，将每天的尿样混合均匀。粪样和尿样于-20 ℃保存以待分析。

1.4 指标的测定方法

1.4.1 采食量的测定

试验期内每周选择连续3 d记录投料量(TMR车停稳状态下电子显示的投料量)，每次饲喂前收集剩料并称重，根据投料量和剩料量计算每组奶牛的总采食量，共测定39次，由每组每天总采食量除以每组牛头数计算得出每组每头奶牛的平均日采食量。利用39次的测定值，计算出各组整个试验期每头奶牛的平均日采食量。

1.4.2 饲粮样品、粪样和尿样中养分含量的测定

将饲粮与粪样放入65 ℃鼓风烘箱中烘48 h，然后冷却24 h至常温后称重，测得初水分含量。将2 g风干饲粮与粪样放入105 ℃鼓风烘箱中烘3 h，取出，在干燥器中冷却30 min，再同样烘干1 h，冷却，称重，直到2次重量差小于0.000 2 g，测得吸附水含量。从而计算得到饲粮与粪样的干物质含量。每日干物质采食量=平均每日采食量×干物质含量。

4.2 CDC预防VAP护理实践指南 美国CDC 1981年发表了第1份关于HAP的预防及控制指南，于2003年再次进行了整理和修订［38］。其中护理实践部分包括7项措施:①正确洗手;②教育员工感染控制措施;③处理污物时戴手套;④拔管或气囊放气前行声门下吸痰;⑤床头抬高30～45°;⑥综合性口腔卫生保健;⑦心脏手术围手术期患者醋酸氯已定口腔冲洗。

饲粮和粪样中粗脂肪(EE)、钙(Ca)和磷(P)含量的测定按照国家标准[13-15]的测定方法进行，中性洗涤纤维(NDF)和酸性洗涤纤维(ADF)含量按照国家标准[16-17]的测定方法使用全自动纤维仪ANKOM-A2000i(美国)测定。饲粮、粪样和尿样中的含氮量按照国家标准[18]的测定方法使用全自动凯氏定氮仪(FOSS-8400，丹麦)测定。饲粮中硫和钼含量按照国家标准[19-20]的测定方法使用电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS，美国)测定。

饲粮养分的表观消化率计算公式如下：

某养分表观消化率(%)=100×(A1-B1)/A1。

式中：A1为饲粮中某养分含量；B1为粪中某养分含量。

1.4.3 乳成分的测定

用乳成分分析仪(MilkoScanTMMars，丹麦)检测乳脂率、乳蛋白率、乳糖率、乳非脂固形物(SNF)、乳总固形物含量和乳体细胞数量。

1.4.4 血清生化指标的测定

血清葡萄糖(Glu)含量采用葡萄糖氧化酶法，总蛋白(TP)含量采用双缩脲法，铜含量采用络合比色法，甘油三酯(TG)含量采用甘油三酯检测试剂盒(GPO-PAP)法，用半自动生化分析仪(Microlab300，荷兰)测定，操作过程按照中生北控生物科技股份有限公司试剂盒说明书进行。

血清中铜蓝蛋白、丙二醛(MDA)、三碘甲状腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)和免疫球蛋白G(IgG)含量，SOD、铜-锌超氧化物歧化酶(Cu-Zn SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及总抗氧化力(T-AOC)均采用酶联免疫分析试验(ELISA)中的双抗体夹心法，用酶标仪(Power Wave XS2，美国)测定，操作过程按照中生北控生物科技股份有限公司试剂盒说明书进行。

1.4.5 饲粮、粪样、尿样和乳中铜含量的测定

饲粮、粪样、尿样和乳中铜含量的测定参照国家标准[21]的测定方法，采用火焰原子吸收光谱仪(Zeenit-700P，德国)测定。

1.5 统计分析

试验数据采用SPSS 19.0统计软件中ANOVA过程进行单因素方差分析(one-way ANOVA)，差异显著时用Duncan氏法进行组间多重比较。试验结果用平均值±标准差表示，以P<0.05为差异显著，以P<0.01为差异极显著。

2 结 果

2.1 饲粮铜水平对奶牛干物质采食量和生产性能的影响

由表2可知，不同试验组的干物质采食量差异不显著(P>0.05)。试验牛的产奶量随着饲粮铜水平的增加呈上升趋势，Ⅲ组的产奶量最高，而铜水平最高的Ⅳ组产奶量略有下降。Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组产奶量分别比Ⅰ组提高了4.91%、6.27%和4.78%(P<0.05)，但Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组之间产奶量差异不显著(P>0.05)。

随着饲粮铜水平的增加，乳脂率和乳蛋白率呈先增高后降低的趋势，Ⅲ组乳脂率和乳蛋白率分别比Ⅰ组提高了5.31%和5.26%，但各组之间差异不显著(P>0.05)。饲粮铜水平对乳糖率、乳SNF和乳总固形物含量无显著影响(P>0.05)。

乳体细胞数量随着饲粮铜水平的增加而降低，Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组的乳体细胞数量分别比Ⅰ组降低了11.34%、15.18%和17.42%(P<0.01)，但Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组之间差异不显著(P>0.05)。随着饲粮铜水平的增加，饲料转化率(FCR)呈上升趋势，Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组的FCR分别比Ⅰ组提高了4.26%、5.67%和4.26%，但各组间差异不显著(P>0.05)。

表2 饲粮铜水平对奶牛干物质采食量和生产性能的影响Table 2 Effects of dietary copper levels on DMI and performance of lactating dairy cows

FCR=4%标准乳产量(kg)/干物质采食量(kg) FCR=4% FCM (kg)/DMI (kg)。
同行数据肩标无字母或相同字母表示差异不显著(P>0.05)，不同小写字母表示差异显著(P<0.05)，不同大写字母表示差异极显著(P<0.01)。下表同。
In the same row, values with no letter or the same letter superscripts mean no significant difference (P>0.05), while with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), and with different capital letter superscripts mean significant difference (P<0.01). The same as below.

2.2 饲粮铜水平对奶牛养分表观消化率的影响

由表3可知，试验各组间的CP、EE、Ca和P表观消化率差异不显著(P>0.05)。Ⅱ和Ⅲ组的NDF的表观消化率分别比Ⅰ组提高了6.21%和7.60%(P<0.05)；Ⅱ和Ⅲ组的ADF的表观消化率分别比Ⅰ组提高了6.78%和8.22%(P<0.05)；Ⅰ和Ⅳ组的NDF和ADF表观消化率差异不显著(P>0.05)。

2.3 饲粮铜水平对奶牛血清抗氧化指标的影响

由表4可知，随着饲粮铜水平的增加血清铜含量逐渐增加。与Ⅰ组相比，Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组血清铜含量分别提高了26.85%、24.92%和41.03%(P<0.01)；Ⅳ组血清铜含量极显著高于其他各组(P<0.01)，但Ⅱ和Ⅲ组之间差异不显著(P>0.05)。随着饲粮铜水平的增加，血清铜蓝蛋白含量及SOD、Cu-Zn SOD和GSH-Px活性逐渐增加。与Ⅰ组相比，Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组血清铜蓝蛋白含量分别提高了9.93%、20.71%和40.24%(P<0.01)。Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组的血清SOD、Cu-Zn SOD和GSH-Px活性也均极显著高于Ⅰ组(P<0.01)。血清T-AOC随着饲粮铜水平的增加呈先增高后降低的趋势，Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组血清T-AOC极显著或显著高于Ⅰ组(P<0.01或P<0.05)。与Ⅰ组相比，Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组血清MDA含量分别降低了50.00%、60.23%和47.08%(P<0.01)。

表3 饲粮铜水平对奶牛养分表观消化率的影响Table 3 Effects of dietary copper levels on nutrients apparent digestibility of lactating dairy cows %

表4 饲粮铜水平对奶牛血清抗氧化指标的影响Table 4 Effects of dietary copper levels on serum antioxidant indices of lactating dairy cows

2.4 饲粮铜水平对奶牛血清生化指标的影响

由表5可知，随着饲粮铜水平的增加，血清TP含量逐渐增加，与Ⅰ组相比，Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组TP含量分别提高了2.48%(P>0.05)、6.45%(P<0.01)和11.46%(P<0.01)；血清Glu含量随着饲粮铜水平的增加呈现出先增加后降低的趋势，Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组Glu含量分别比Ⅰ组提高了10.25%(P>0.05)、25.09%(P<0.01)和15.55%(P<0.05)；血清TG含量各组之间差异不显著(P>0.05)。随着饲粮铜水平的增加，血清T3和T4含量逐渐增加，与Ⅰ组相比，Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组血清T3含量分别提高了15.02%、19.48%和36.29%(P<0.01)，血清T4含量分别提高了15.03%、17.31%和33.98%(P<0.01)。血清IgG含量随着饲粮铜水平的增加呈先升高后降低的趋势，与Ⅰ组相比，Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组血清IgG含量分别提高了49.56%、165.56%和90.22%(P<0.01)，Ⅲ组极显著高于其他各组(P<0.01)，Ⅱ和Ⅳ组之间差异不显著(P>0.05)。

2.5 饲粮铜水平对奶牛铜代谢的影响

由表6可知，每天粪铜含量(即粪中铜的排出量)随着饲粮铜水平的增加而增加，与Ⅰ组相比，Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组每天粪铜含量极显著提高了125.15%、187.79%和250.83%(P<0.01)，各组间差异极显著(P<0.01)。各试验组每千克粪铜含量和每天粪铜总量变化规律一致。与Ⅰ组相比，Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组尿铜(即尿中铜的排出量)含量分别提高了6.32%(P>0.05)、40.27%(P<0.05)和65.61%(P<0.01)。饲粮铜水平对乳铜含量无显著影响(P>0.05)。各组的铜表观消化率差异不显著(P>0.05)。每日铜沉积量随着饲粮铜水平的增加而增加，Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组极显著高于Ⅰ组(P<0.01)，Ⅲ组显著高于Ⅱ组(P<0.05)，Ⅳ组极显著高于Ⅱ组(P<0.01)并显著高于Ⅲ组(P<0.05)。Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组的铜沉积率差异不显著(P>0.05)，但分别比Ⅰ组提高了80.37%、78.76%和79.91%(P<0.01)。

表5 饲粮铜水平对奶牛血清生化指标的影响Table 5 Effects of dietary copper levels on serum biochemical indices of lactating dairy cows

表6 饲粮铜水平对奶牛铜代谢的影响Table 6 Effects of dietary copper levels on copper metabolism of lactating dairy cows

3 讨 论

3.1 饲粮铜水平对奶牛干物质采食量和生产性能的影响

干物质采食量受饲粮适口性、瘤胃充盈度、食糜外流速度和奶牛自身的新陈代谢等因素的影响[22-23]。Ward等[24]研究表明，补铜可提高牛的干物质采食量，而本研究中不同饲粮铜水平对奶牛干物质采食量无显著影响，这种差异可能和试验牛品种、饲粮组成及试验牛对铜的缺乏程度有关。

产奶量是衡量经济效益的重要指标之一，在饲粮中添加7.6 mg/kg铜，产奶量提高了4.85%～9.61%，但乳脂率没有显著变化[25-26]。对分娩100～120 d的荷斯坦奶牛补铜，饲养120 d后，补铜组的产奶量比对照组高3.3%，每千克4%标准乳(4% FCM)消耗的产奶净能(NEL)比对照组低8.6%[27]。本试验结果显示，随着饲粮铜水平的增加，产奶量、乳脂率、乳蛋白率和FCR均有所提高，但当饲粮铜水平为28.09 mg/kg DM(铜采食量为624.44 mg/d)时，其产奶量较饲粮铜水平为23.09 mg/kg DM(铜采食量为514.21 mg/d)时反而有所下降，这与刘曦[6]研究结果一致，这可能是因为奶牛对铜的需要量受其自身条件和外部条件的影响[28]，采食过多的铜会对奶牛机体造成负影响，影响奶牛的生产性能。

3.2 饲粮铜水平对奶牛养分表观消化率的影响

许多研究表明，饲粮中铜水平的增加可显著提高NDF和ADF的表观消化率[29-31]，本试验也证实了这一论点，当饲粮铜水平为18.09 mg/kg DM(铜采食量为403.59 mg/d)和23.09 mg/kg DM (铜采食量为514.21 mg/d)时可显著提高NDF和ADF的表观消化率，这可能是因为奶牛采食适量的铜能够抑制有害菌的繁殖，促进有益菌的生长所致[31]；还可能是因为铜能够促使肠黏膜细胞更替减缓，从而降低消化道对能量的需要，进而降低机体对能量的维持需要[32]。另据研究报道，当奶牛饲粮中添加24 mg/kg铜时，CP的表观消化率最高[6]，而本研究中，当饲粮铜水平为28.09 mg/kg DM(铜采食量为624.44 mg/d)时，CP表观消化并没有达到最高，这种差异可能是因为试验饲粮组成不同所致[33]。

3.3 饲粮铜水平对奶牛血清抗氧化指标的影响

血清铜含量可反映铜在机体内代谢的状态[34-35]，奶牛的血清铜含量一般为7.87～18.89 μmol/L[36]。Suttle[37]研究表明，当牛羊血浆铜含量不足9 μmol/L时，就可断定其处于铜缺乏状态。本试验发现，血清铜含量随着饲粮铜水平的增加而升高，这与张圆[38]研究结果一致。虽然各组的血清铜含量均处于正常范围，但Ⅰ组(饲粮铜水平为8.09 mg/kg DM，铜采食量为179.84 mg/d)的血清铜含量在正常范围内属于较低水平。铜蓝蛋白是一种含铜的糖蛋白，具有调节铜在机体各个部位的分布、合成含铜的酶蛋白与作为机体抗氧化剂的作用，铜蓝蛋白还具有氧化酶活性，对多酚及多胺类底物有催化其氧化的能力[39-40]。本试验结果与程延彬[9]的研究结果均证实，血清铜蓝蛋白的含量随着饲粮铜水平的增加而升高。

3.4 饲粮铜水平对奶牛血清生化指标的影响

血清中TP、Glu和TG的含量可作为蛋白质、糖和脂肪代谢的指标[55-57]，在一定程度上反映机体营养代谢的状况。血清Glu含量的范围一般为2.3～4.1 mmol/L[58]。本试验中，随着饲粮铜水平的增加血清TP含量明显升高，Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组血清Glu含量较Ⅰ组显著增加且均处于正常范围内，血清TG含量呈相同变化趋势，这与王聪等[51]的报道一致，说明增加饲粮铜水平可促进蛋白质、糖和脂肪的代谢。T3和T4在机体代谢活动中起到提高基础代谢率的调节作用，T3和T4能增强糖原、蛋白质和脂肪的分解，有利于机体能量的供给[59-60]。铜缺乏会导致奶牛甲状腺内Cu-Zn SOD活性降低，这会引起脂质过氧化物的增多，从而抑制T3和T4的合成，影响甲状腺的功能，铜缺乏还会影响甲状腺组织细胞内色素氧化酶的活性，使细胞内的ATP合成不足，当细胞通过其他的代射途径获得ATP时会导致细胞内pH降低，这会抑制脱碘酶的活性，使T3的合成受阻[61]。通常情况下，甲状腺主要分泌T4，其中有40%的T4经过脱碘转变为T3。因为T3的生物活性远大于T4，所以普遍认为T4是通过转化为T3来发挥生理作用的[62]。本试验中，随着饲粮铜水平的增加，血清T3和T4的含量增加，这与乔栋等[63]、Lukaski等[64]研究结果一致，说明增加饲粮铜水平对甲状腺功能有促进作用，这对于Glu的吸收利用、脂肪的分解、维持泌乳和影响动物体温方面都有着重要作用[65]。

IgG在机体免疫中起到重要的免疫作用，动物缺铜会导致血清IgG含量降低[66-67]，这可能是因为缺铜会导致抗体的数量减少或免疫球蛋白分泌水平降低。Lukasewycz等[68]研究表明，缺铜会降低刺激原脂多糖(LPS)的反应性，从而导致血清IgG含量降低。铜缺乏可致奶牛淋巴细胞内细胞色素氧化酶活性降低，使细胞内ATP生成减少，从而造成IgG合成受阻[69]。在雏鸡上的试验发现，高铜组血清IgG含量随饲粮中铜水平的增加而降低[70]。然而，儿童体内铜含量不足或过量均会引起血清IgG含量的下降[71]。本试验中，Ⅲ组(饲粮铜水平为23.09 mg/kg DM，铜采食量为514.21 mg/d)血清IgG含量最高，而Ⅳ组(饲粮铜水平为28.09 mg/kg DM，铜采食量为624.44 mg/d)血清IgG含量却有所降低，这可能是因为高铜会对免疫器官造成负面影响，从而阻碍B淋巴细胞的增殖、分化和成熟，导致血清IgG含量的降低[72-75]。

3.5 饲粮铜水平对奶牛铜代谢的影响

机体内的铜主要依靠消化道排出，胆汁排出铜被认为是机体保持体内铜代谢平衡的主要途径之一，在调节铜平衡上，排泄要比肠道吸收更为重要[76]。饲粮中硫和钼的存在会降低铜的吸收率，饲粮中的硫会在瘤胃中转化为硫化物，生成硫化铜沉淀，从而阻碍铜的吸收和利用[77]。硫和钼会在瘤胃的固相食糜中形成四硫代钼酸盐，它会与铜结合生成高度不溶的复合物，从而降低铜的吸收率[78]。硫和钼对铜的影响还与饲料原料相关，Underwood等[8]认为，青贮饲料中可利用铜受钼水平影响较小，但若在饲粮中添加硫后，铜的利用率会明显下降；钼对干草饲料中铜的吸收存在抑制作用，但相对影响较小；硫和钼对于新鲜饲草中铜吸收率的影响远大于对干草和青贮饲料的影响，鲜草饲粮中添加硫和钼会显著降低铜的吸收率。在饲粮钼水平较低时添加钼对铜的吸收抑制作用较大，当饲粮钼水平达到4～5 mg/kg DM时，钼对铜吸收的抑制作用趋于稳定，这时再提高饲粮中钼的水平对铜的吸收无显著影响[79]。饲粮中添加的高剂量微量元素大部分都会随粪便排出体外，如果用这种动物粪便作为有机肥并且长期使用，会导致微量元素在土壤中富集，造成农作物的减产[80]。若这种粪便随废水排放而污染水源，则会显著降低水体的自净能力，使水质发生恶化，当水体中铜含量达到0.5 mg/kg时，可使大量的水生植物死亡[81]。通过降低微量元素的添加水平可有效减少粪便中微量元素的排泄量[82-83]。本试验中，随着饲粮铜水平的增加，粪铜、尿铜、乳铜含量和铜沉积量显著增加，但铜表观消化率却没有显著变化；增加饲粮铜水平后，虽然铜沉积率显著高于Ⅰ组(饲粮铜水平为8.09 mg/kg DM，铜采食量为179.84 mg/d)，但Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组之间没有显著差异，此试验结果与李宏等[84]研究结果一致。根据农业部2625号公告[85]和NRC(2001)[11]，本试验中饲粮铜水平低于我国规定的最高限量30 mg/kg DM，不会对奶牛造成中毒等危害。Ⅱ和Ⅲ组每千克粪铜含量低于我国在2008年颁布的《土壤环境质量标准》[86]，不会对土壤造成污染。本试验结果说明，饲粮铜水平的增加不影响奶牛对铜的消化和铜在奶牛体内的沉积。这可能是因为本试验所用饲粮中硫含量为0.29%，属于低硫饲粮，与饲粮中铜的拮抗作用较小；又因为本试验中粗饲料以全株玉米青贮为主，饲粮中钼水平为1.96 mg/kg DM，属于低钼饲粮，所以饲粮中不同水平的铜对其消化率和沉积率的影响较小。

4 结 论

在本试验条件下，饲粮中补充铜可以有效地提高奶牛的生产性能、饲粮NDF的表观消化率和机体的抗氧化能力和免疫力，但粪铜和尿铜含量随饲粮铜水平的增加而增加。综合考虑，奶牛饲粮适宜铜水平为18.09～23.09 mg/kg DM(铜的采食量为403.59～514.21 mg/d)。