BD（FACSCalibur）流式细胞仪常见故障分析及处理

于双白 安徽省宿州市立医院 （安徽 宿州 234000）

内容提要： 为了保障检验科室工作，提高设备使用率，降低医院维护成本，对流式细胞仪常见故障的维修方向及方法进行简单介绍，保障设备的维修及时性。

随着医院的发展，医疗设备的维修在医院运行中作用越发明显。对于设备的维修，首先医疗设备维修工程师要明白医疗设备的运行原理、工作流程和操作方法。只有明确这些在实际维修工作中才能思路清晰，设备故障判断准确，从而起到提高工作效率，为医院节省成本的作用。针对这一现象，本文就流式细胞仪（Flow Cytonletry，FCM）进行简单原理介绍和故障分析。

1.流式细胞仪的概念及发展趋势

流式细胞仪是对高速直线流动的细胞或生物微粒进行快速定量测定和分析的仪器，是一种集激光技术、电子物理技术、光电测量技术、电子计算机以及细胞荧光化学技术、单克隆抗体技术为一体的新型高科技仪器。概括来说，流式细胞术就是对于处在快速直线流动状态中的细胞或生物颗粒进行多参数、快速的定量分析和分选的技术。主要包括样品的液流技术、细胞的计数和分选技术，计算机对数据的采集和分析技术等。

随着科技的发展，临床流式细胞术发展趋势可归纳为：①流式细胞仪从单纯大型仪器发展为适应各种实际应用的便携式、台式、高分辨率、高质量分选的研究型流式细胞仪；②对流式细胞术检测荧光参数，从采用荧光单色、双色分析发展为多色分析，目前最多可同时检测15种荧光信号；③从检测参数的相对定量发展为绝对定量；④从检测参数的手动人工分析发展为计算机软件的自动分析；⑤所采用的荧光试剂，从非配套试剂发展为配套的试剂盒试剂。而这一切，就要求流式细胞仪使用者和科研人员一定要不断地有意识地学习上述各门学科知识，只有这样才能更好地将流式细胞术应用到生物医学的临床实践和基础科学研究工作中去。

2.FACSCalibur流式细胞仪常见故障分析及处理

针对本院检验科使用的FACSCalibur流式细胞仪在日常使用中常见的故障进行一下分析和处理方式。

2.1 故障一

故障描述：检验科室在使用过程中容易出现，仪器和电脑无法联机，BDPAC check发生错误。

分析及处理：首先需要工程师，检查仪器左侧直流电源，PS1电压（+5V、+15V和-12V），PS2（+15V和-15V），如果直流电源电压不正常，更换对应直流电源，电源正常的情况下，要确认仪器和电脑的GPIO线连接是否正常，这就需要工程师重新插拔BDPAC板、status板、classifier板和CCB板，确认设备板件连接正常，如仍旧无法排除故障，需要考虑更换联机五件套（GPIO线、BDPAC板、status板、classifier板和CCB板），一个一个判断，最后重新安装系统软件。

2.2 故障二

故障描述：设备运行中容易出现进样针外管滴水，蠕动泵不工作。

分析及处理：针对这种情况，仍旧是检查仪器左侧直流电源，PS1电压（+5V、+15V和-12V），如果直流电源电压不正常，更换直流电源，如电源正常工作，需要进一步检查蠕动泵的供电-12V，如果电正常，则更换蠕动泵。如果没有供电，进行下一步检查，支架臂后方触点开关的通断，拔掉压力开关的压力进端管路，如蠕动泵不工作，则更换压力开关。如果蠕动泵工作，则判断为废液管路堵塞，疏通废液管路。

2.3 故障三

故障描述：设备运行过程中，运行样本，但没有信号输出。

分析及处理：出现上述问题时，首先检查run灯颜色是否正常。

首先，run灯如为橙色，检查压力：①测量鞘液桶压力是否为4.5psi。如果压力低，检查加压开关是否拨在“加压”档、鞘液桶黑盖是否盖好、鞘液桶是否漏气、气泵输出压力是否为9psi、regulator出口压力是否为4.5psi、管路接头是否有松动、3.5psi压力开关是否完好。②检查鞘液过滤器是否有气泡，短接过滤器。如run灯颜色变绿，则需更换鞘液过滤器。③检查进样针密封圈是否磨损，可更换新的密封圈以作判断。

其次，run灯颜色为绿灯，说明压力正常，需进一步检查：①检查废液流量，标准值为18mL/min。如流量低，从流动室废液出口处再测量，如果还是低，则检查2号和4号阀（通过短接法判断）。如果流动室废液出口处流量正常，则检查3号阀。②如果废液流量正常，则检查进样针是否堵塞，可将进样针取下，用clean液冲洗进样针。测试高速样本流速是60μL/min。如果样本流速低，则检查压力比较器和压力调节板。

再次，如果样本流速正常，则进行下一步检查：①进入cellquest软件，调出status栏，检查激光功率，正常应为15mW。如功率不正常，则需更换激光器。②通过显微镜观察是否有光斑，如果没有光斑，通过调节左右偏转棱镜，找出光斑，调节对应通道的光路系统，看是否恢复正常。③打开测试信号，如果没有测试信号，则考虑更换ADC板。④如果测试信号正常，切换阈值，观察在不同阈值下的信号情况。如果只是在某一通道下没有信号，则应检查该通道对应的PMT、PMT帽、放大板以及信号处理板。

3.小结

流式细胞仪在使用过程中，机器精密度较高，容易引起故障的地方，正常在板块连接和液体管路两个方面，这就要求设备管理科室制定此类设备的日常维护方案和维修流程，一旦设备出现故障，维修不及时或维修错误，引起使用科室检验标本无法及时检验，影响使用科室工作和临床对患者的诊断，防止这些问题的出现就需要维修工程师熟悉设备的相关技术资料，根据自身的维修经验和设备的工作流程以及扎实的动手能力，及时解决故障，提高设备的使用率，减少医院的维修成本。