牛至油对感染球虫病肉鸡的缓解作用

纪经良，李 颖

球虫病是由球虫原虫引起的一种鸡肠道寄生虫病，主要影响雏鸡，并通过接触受感染的雏鸡而传播。寄生虫在上皮细胞中的增殖导致组织坏死，由此增加腹泻、肠道出血的发生率，并可能导致消化过度，使鸡的日增重、采食量和饲料转化率降低，最终给家禽养殖业造成重大的经济损失。应用抗球虫药和灭活疫苗是预防和控制该病的常用方法，但频繁使用抗球虫药物会导致抗药性及艾美耳菌株的扩散，同时疫苗生产成本很高。因此，需要开发安全、廉价的方法来控制鸡球虫病的发生。牛至精油以其抗菌、抗真菌和抗原生动物活性而闻名（Botsoglou等，2002），其包含香芹酚和百里香酚，含量占到78%～82%。尽管有一些关于牛至油对家禽球虫病影响的可用信息（Tsinas等，2011），但需要更多的研究来评估其有效添加量。因此，本研究旨在通过比较牛至精油与抗球虫药物对肉鸡生长性能和球虫病预防的影响。

1 材料与方法

1.1 试验设计与饲养管理 试验共选择250只1日龄雌性肉鸡，采用完全随机试验设计，共分为5组，每组5个重复，每个重复10只。试验处理包括阴性对照组、阳性对照组、阳性对照日粮+200 mg/kg抗球虫药（杀球灵）、阳性对照日粮+200或400 mg/kg牛至油。各阶段肉鸡的基础日粮组成及营养水平见表1。雏鸡在出生后7 d内饲养在32℃、撒有木屑的水泥地板上，在第21天温度降至23℃。试验前2 d采用连续光照，在3～42 d光照23 h，光照强度为20 lx。试验期间肉鸡自由采食和饮水，按照常规免疫方法对鸡只进行免疫。

1.2 球虫感染 在试验第22天，除阴性对照组外的所有试验组均口服50倍剂量的灭活球虫疫苗，以造成轻度球虫病感染。每剂疫苗在0.01 mL蒸馏水中含有300～500个孢子卵囊，阴性对照组用0.5 mL蒸馏水假接种。

1.3 样品收集与分析 每周按重复记录肉鸡体重和饲料消耗量，记录死亡率并对死亡鸡只进行称重。根据这些数据，计算各阶段和整个试验期间肉鸡的日增重、日采食量和料重比。在试验第28天，每个重复随机选择2只鸡，称重，屠宰，收集十二指肠，并检查肠道3个区域（上部、中部和盲肠）的球虫病变。根据病变严重程度，每只鸡分别记录为0分（无病变）、1分（轻度病变）、2分（中度病变）、3分（严重病变）或4分（极严重病变）。累积损害评分用于判断整体的治疗效果。

表1 1～42d基础日粮组成及营养水平

各组粪便样本于攻毒后第28天采集，参考Landman（2003）的方法评估每克粪便卵囊计数，并对粪便及凋落物进行评分。采用pH计测定分别在每个粪便样品的5个位置测定pH，然后以平均值表示。

1.4 数据分析与统计 试验数据采用SPSS软件的单因素方差分析模型，对照组与处理组各种指标的平均值差异性用Tukey法进行多重比较，结果以P＜0.05作为差异显著判定标准。

2 结果与分析

2.1 牛至油和球虫药对肉鸡生长性能的影响本试验期间，各组肉鸡的死亡率均＜1%，且与处理无关。在试验前3周及整改试验期间，各组肉鸡生长性能分别见表2和表3。在试验第28天，感染艾美球虫一周后，未感染组和感染组+牛至油较阳性对照组显著提高肉鸡日增重（P＜0.05）。试验第29～35天时，未感染组肉鸡平均日增重显著高于其他组（P＜0.05），各感染组间日增重无显著差异（P＞0.05）。各处理对各阶段肉鸡平均日采食量无显著影响（P＞0.05）。

表2 牛至油和球虫药对1～21d肉鸡生长性能的影响

表3 牛至油和球虫药对22～42d及1～42d肉鸡生长性能的影响

22～28 d各处理对肉鸡料重比具有显著影响，其中未感染组和感染组+400 mg/kg牛至油较阳性对照组显著改善料重比（P＜0.05），但感染组+200 mg/kg牛至油和阳性对照组对料重比的影响无显著差异（P＞0.05）。各组对1～21 d、22～42 d、1～42 d日增重和平均日采食量及1～21 d肉鸡料重比均无显著影响（P＞0.05）。未感染组较阳性对照组显著改善22～42 d和1～42 d肉鸡的料重比（P＜0.05）。

2.2 牛至油和球虫药对28 d肉鸡球虫病评分、粪卵囊数、凋落物质量和pH的影响 由表4可知，各处理组对上部和中部区域球虫病变评分具有显著影响（P＜0.05），但对盲肠区域球虫病变无显著影响（P＞0.05），其中未感染组较阳性对照组显著降低小肠上部区域病变评分（P＜0.05）。与未感染组相比，感染组+400 mg/kg牛至油或200 mg/kg球虫药对小肠上部区域病变评分无显著影响（P＞0.05）。与其他组相比，未感染组和感染组+200 mg/kg球虫药组粪卵囊数最低（P＜0.05），但感染组+400 m/kg牛至油较阳性对照组显著降低粪卵囊数（P＜0.05）。阳性对照组较其他组显著提高凋落物和粪便评分及粪pH（P＜ 0.05）。

表4 牛至油和球虫药对28d肉鸡球虫病评分、粪卵囊数、凋落物质量和pH的影响

3 讨论

球虫病会导致肉鸡严重的生长问题，如吸收不良、痢疾等。在本研究中，在感染球虫病的肉鸡日粮中添加400 mg/kg牛至油可以减少球虫病对生长性能的有害影响，这与Tsinas等（2011）的研究结果一致。由于本试验中肉鸡受到轻度的球虫病感染，一周后，这些肉鸡能抵抗球虫病的影响。Scheurer等（2013）指出，15 d感染球虫病时对第22～39天的处理组肉鸡生长性能参数没有显著影响。牛至油含有百里酚和香芹酚等酚类物质，其可以通过改变阳离子通透性与细胞膜相互作用，如H+和K+，离子梯度的耗尽导致细胞内基本过程的破坏，允许细胞成分外漏，导致水环境失去平衡，细胞膜电位崩溃，抑制ATP合成，最终导致病毒细胞死亡（Ultee等，2002）。由此可以得出结论，牛至油通过缩短寄生虫的生命周期，可控制和预防球虫病，同时牛至油可以降低新生肠上皮细胞的污染，提高营养物质的吸收能力。

不同研究者用来判断球虫病疗效效果的一些指标包括组织病变评分、每克粪中卵囊卵数和粪便评分。在本研究中，未受感染组的病灶评分高于0分，表明在研究期间这些肉鸡也感染了球虫病，感染可能是由于来自受感染肉鸡的交叉污染，因为本研究是使用开放的围栏进行饲养试验。试验结果发现，牛至油对球虫病感染组织病变评分有改善作用。由于牛至油所含的百里香酚和香芹酚的抗菌机制是破坏细胞膜、抑制ATP酶活性和释放细胞内ATP，这些物质进入磷脂双分子层，并在脂肪酸链之间排列，使细胞膜具有通透性，同时这种修饰会导致膜膨胀、失稳，增加膜的流动性，从而增加被动渗透率（Giannenas等，2013）。

球虫感染最重要的特征之一是由腹泻引起的水样排泄物导致的湿粪问题。因此，添加抗球虫药可能会改善凋落物的质量。本研究发现，日粮添加牛至油可以降低肠道损失，降低凋落物评分和粪中卵囊数，这与Abd El-Wahab等（2012）的报道一致。凋落物pH影响氨的释放，应低于7，以减少氨的挥发。此外，未经酸化剂处理的凋落物的pH通常接近8或略高，在本研究中，由于球虫病引起的水样凋落物增多，导致凋落物pH升高，而日粮添加400 mg/kg牛至油可降低肉鸡凋落物得分和pH，减少球虫病对肉鸡的危害。

4 结论

肉鸡在22 d时受到艾美耳球虫感染主要影响22～28 d的生长性能。日粮中添加400 mg/kg牛至油可以减轻球虫感染对肉鸡的影响，其效果与抗球虫药一致。根据本研究的结果及已知使用抗球虫药物的危害，在肉鸡日粮中添加400 mg/kg牛至油可能是抗球虫药物的替代选择。