广金钱草和金钱草不同部位总黄酮含量研究

1.桂林医学院第二附属医院，广西 桂林 541199；2.桂林医学院，广西 桂林 541199

广金钱草为豆科植物广金钱草Desmodiumstyracifolium(Osb.) Merr.的干燥地上部分，具有利湿退黄、利尿通淋的功效，用于黄疸尿赤、热淋、石淋、小便涩痛等。金钱草为报春花科植物过路黄LysimachiachristinaeHance.的干燥全草，具有利湿退黄、利尿通淋、解毒消肿的功效，用于湿热黄疸、石淋、热淋、小便涩痛等[1]。由此可见，广金钱草和金钱草临床功效相似，而两者都含有黄酮类成分[2-3]，本研究以芦丁为对照品，采用紫外分光光度法对广金钱草和金钱草不同部位的总黄酮含量进行测定，考察两种药材以及不同药用部位总黄酮含量，可以对广金钱草和金钱草进行更好的开发利用，为临床应用提供参考依据。

1 仪器与材料

1.1 仪器 UV1100紫外分光光度仪(上海精密科学仪器有限公司)；梅特勒托利多EL204电子天平；KQ5200DB超声仪(昆山市超声仪器)。

1.2 材料 芦丁对照品(批号：100416-201607，中国食品药品检定研究院)。金钱草采自广西桂林，广金钱草采自广东廉江，均经桂林医学院附属医院蔡小琳主任中药师鉴定为报春花科植物过路黄和豆科植物广金钱草。95%乙醇，六水合氯化铝，三水合乙酸钠和醋酸等试剂均为分析纯。

1.3 材料处理 将干燥广金钱草和金钱草茎，叶分离备用。

2 方法与结果

2.1 对照品溶液制备 精密称取芦丁对照品0.0109 g(芦丁含量为97.5%)，用50%乙醇溶液溶解并定容至50 mL容量瓶中，摇匀，得对照品溶液(2.1255×10-4g/mL)。

2.2 供试品溶液制备 分别精密称定金钱草和广金钱草全草0.5 g，叶0.4 g，茎1.0 g置50 mL具塞锥形瓶中，加30 mL 50%乙醇溶液超声提取30 min[5]，过滤，并将滤液用50%乙醇溶液定容至50 mL容量瓶中，即得供试品溶液。

2.3 线性关系考察 精密量取对照品溶液0.5 mL、1.0 mL、2.0 mL、3.0 mL、4.0 mL分别置于25 mL容量瓶中，分别加入0.1 moL/L三氯化铝1.0 mL，pH醋酸-醋酸钠缓冲液1.0 mL，加水稀释至刻度，摇匀，在波长272 nm处测定吸收值[4]。以浓度X为横坐标，以吸光值A为纵坐标，得到回归方程Y=1167X+0.010，r2=0.999。表明芦丁在4.251×10-6g/mL～3.4008×10-5g/mL范围内线性关系良好。

2.4 精密度实验 取对照品溶液1.0 mL，重复测定5次，测得吸光度值，计算RSD=0.32%，结果表明本实验方法精密度良好。

2.5 稳定性实验 精密量取广金钱草和金钱草供试品溶液(全草)1 mL，按2.3项加入显色剂，于0、10、20、30、40、50、60、90 min分别测定吸光度值，RSD分别为1.13%和0.94%。表明供试品溶液90 min内稳定，稳定性良好。见表1。

表1 稳定性实验

2.6 加样回收率实验 分别精密称定已知含量广金钱草和金钱草供试品溶液(全草)0.5 g，按2.2项下制得供试品溶液，分别加入芦丁对照品溶液 0.5 mL、1.0 mL、1.5 mL、2.0 mL、3.0 mL，经过显色反应后测定吸光值。结果见表2和表3。

表2 广金钱草加样回收率实验

表3 金钱草加样回收率实验

2.7 金钱草和广金钱草各部位总黄酮含量测定 分别取广金钱草和广金钱草茎，叶和全草，按2.2项下制得供试品溶液，经过显色反应，测得总黄酮含量。结果见表4。

表4 广金钱草和金钱草不同部位总黄酮含量测定

3 结论

上述研究中发现，广金钱草茎、叶和全草的含量分别为0.78%、3.84%和2.33%；金钱草茎、叶和全草的含量分别为0.24%、3.15%和1.61%。由此可见，总黄酮含量在金钱草和广金钱草各部位含量为广金钱草叶>金钱草叶>广金钱草全草>金钱草全草>广金钱草茎>金钱草茎。广金钱草各部位的总黄酮含量分别大于金钱草各部位总黄酮含量，而广金钱和金钱草叶的总黄酮含量最大，其次是全草，茎最小。

本研究使用乙醇做提取溶剂，毒性较小，对环境污染较其他试剂少，提取率较高；选用紫外分光光度法做为检测方法操作简便，检测成本较低。研究中线性关系、精密度、稳定性、加样回收率均符合含量测定要求，采用的总黄酮含量检测方法可靠可行。广金钱草和金钱草中叶的总黄酮含量均最大，茎的含量最小，而广金钱草叶比金钱草叶的总黄酮含量大。

《中国药典》中以夏佛塔苷作为广金钱草含量测定指标，以槲皮素和山奈素作为金钱草含量测定指标[1]。夏佛塔苷，槲皮素和山奈素均属于黄酮类成分，而广金钱草和金钱草药理作用有相似之处[6]，故本研究测定广金钱草和金钱草不同部位总黄酮含量，研究结果可以为其资源开发和临床使用提供一定的研究依据。