全自动血液分析仪检测血小板的影响因素

李可成

[摘要] 血小板检测是研究凝血与止血功能的重要指标之一，也是手术前必要检查项目，因此血小板检测结果是否准确，不仅会对出血性疾病患者、血栓性疾病患者的诊断结果产生影响外，还会决定其治疗结果。当前，临床在对血小板组织进行计数时，通常会对多种血液分析设备联合应用，并以电阻抗法为主要计数原理，然而该方案往往会受多种因素影响，其中又以血小板组织、大血小板组织、小血小板组织以及小红细胞组织的体积方面表现出差异大的特征，针对此情况，为了保证血小板计数结果的准确性，近年来光学法血小板计数被逐渐应用到检测活动当中去，效果突出。

[关键词] 全自动血液分析仪;血小板;检测;影响因素

[中图分类号] R446.11 [文献标识码] A [文章编号] 1672-5654（2019）01（a）-0173-02

全自动生化分析仪及医疗设备在我国各级医院被广泛使用，并在临床诊断中提供了快捷准确的结果，使得常规检测更加方便、快捷。然而在仪器的操作过程中，由于医务人员没有深入了解仪器的原理，也没有熟练掌握仪器的性能，导致全自动生化分析仪的检测结果存在一定误差[1]。全自动生化分析仪是应用吸引探针来抽取适量的样品进行准确的检验后送入混匀腔，再混同稀释液共同流入转换器，再利用转换器根据流程检验白细胞、血红蛋白和抗体和血小板的所有参数，对于前两种指标的分析，将前两者的溶血剂放入测量室，首先进行稀释和溶解红细胞，然后溶血剂会出现10 s的化学反应，在此过程中红细胞被溶解生成血红蛋白，并形成红色甲基血红蛋白，血细胞没有任何变化。另外，运用dc细胞流式检测器检可以检验白细胞的数量及大小，在血红蛋白的检验过程中，可使用光度计分析血蛋白浓度。在后两者指标的检测中，将检验后的成分从测量室转移到转换器中，且大小和数量红血球为主计算，运用流式细胞仪法可对血小板进行分析[2]。全自动生化分析仪主要应用电容法和光电比色法的原理，而且轻易受多种因素的影响[3]。笔者就自身研究结果作如下综述。

1  不同计数标准对血小板指数产生的影响

近年来，血小板专业计数工作中，以全自动血液分析设备进行计数时，其计数方法有电阻抗法和光学法。

1.1  电阻抗法

当体积大小不等的血细胞通过仪器计数小孔时，引起小孔内、外电流和电压的变化，形成与血细胞数量相当，体积大小相应的脉冲变化，从而间接地区分出血细胞。但由于其检测原理的局限性，结果易受多种因素影响，使血小板结果假性增高[4]。

申岩梅[1]对血液分析仪RT-7600血小板计数的准确性研究认为设备能够对受检对象身体中的血小板组织以及红细胞组织等进行明确划分，然而如果红细胞组织的计数尚未达到55fl，而以电阻抗法对其展开专业计数，其计数结果通常会异常上升，表明机体红细胞组织体积不足55fl时，设备会对其计数结果形成干扰因素，而且如果血小板组织直方图出现不规则性特征，电阻抗法产生的计数值也会呈现出升高迹象[5-7]。而CD-1700血细胞分析设备则强调采用电子阻抗原理，血小板和红细胞是在同一个检测系统中通过颗粒大小来加以识别的，血小板与红细胞测量的信號常有交叉，小红细胞的脉冲信号可能视为血小板信号造成实验误差，而致血小板计数的假性增高[8]。

所以目前使用的血液分析仪，只要是用电阻抗法检测血小板，都会存在血小板假性增高的问题。

1.2  光学法

其应用原理是：当激光对红细胞组织、血小板组织进行充分照射时，红细胞组织中血红蛋白成分的浓度偏高，所以对于激光产生的折射指数也会相对偏高，一旦有红细胞组织的残骸、大血小板组织、红细胞组织碎片等出现，尽管其体积表现出相似性特征，然而由于内容物方面存在差异，所以对于激光产的折射指数也会存在巨大差异[9]。

ADVIAl20全自动六分类血细胞分析仪，由于采用了血细胞等渗球形化和两维激光扫描等检测原理，基本上排除了对血小板检测的各种影响因素，从而也达到了血小板检测快速，王德春[5]对该仪器检测血小板的性能特点作了系统探讨，认为其检测的重复性及相关性非常好;具有较宽的和很好的线性范围;携带污染仅为0.25%，是目前检测血小板最为理想的仪器之一。巫小莉[6]利用德国拜耳ADVIA2120二维激光法和美国雅培CD3700电阻法血小板计数进行比较研究认为，在病理情况下的大血小板、小红细胞，特别是临界值的血小板计数，电阻法结果差异较大，而二维激光法更接近手工法所检测结果，计数结果比较准确、可靠。同样，王晓贤[7]等利用Sysmex XT-4000i对电阻法和光学法检测血小板进行评估，也认为光学法在对小红细胞、红细胞碎片和大血小板各组检测中，血小板组织的计数结果也会比电阻法更为精确[10-16]。

光学法尽管能降低小红细胞组织、红细胞组织碎片和大血小板等因素对血小板计数的影响，但是也存在一定的局限性，当血小板聚集时却无法消除其对血小板计数的影响[17]。

2  异常形态血液细胞对血小板计数的影响

2.1  红细胞对血小板的影响

如果全自动血细胞分析仪采用电阻抗法检测时，它根据颗粒的大小来区别细胞，红细胞和血小板同在一个检测通道，仪器把2～30 fl范围的细胞判定为血小板，而将25～250 fl范围的细胞判定为红细胞，因而红细胞与血小板之间存在计数的交叉区域。有研究认为当MCV<70 fl 时或 MCV为70～81.9 fl而RDW>14.5%巨大血小板，小红细胞可干扰血小板计数[8]。叶长钦[9]等报道实验MCV<70 fl的红细胞会引起血小板计数假性增高;而MCV为70～81.9 fl的组中，红细胞分布宽度（RDW）大于正常者血小板计数假性增高，RDW正常者对结果影响不大。当MCV在65～70 fl之间时，血细胞分析仪与镜检法之间血小板计数结果无照著性差异，但当MCV<65 fl时，因有多量的小红细胞存在，大部份体积很小的红细胞被计入血小板内，而导致血小板数量假性增高，两种方法之间具有明显差异性[18-19]。

地中海贫血是遗传性血红蛋白病，属于是小细胞低色素贫血。张天朗等[11]认为携带地贫基因时，红细胞体积要显著低于正常对照组。与对照组相比，采前和采后手工计数血小板均要高于自动计数，平均相差达19.3%。这是由于小体积的红细胞在自动计数时会被误判为血小板，造成血小板计数假性增高。说明红细胞的大小与分布度对血小板计数有直接的影响[20-21]。

红细胞碎裂如果用电阻抗法同样也会引起血小板的假性增高[22]。

2.2  血小板聚集

临床所用抗凝剂以EDTA盐为主，但是却可能会有PLT聚集情况出现，以至于对EDTA-K2进行应用时，PLT值假性偏低情况十分普遍，表明对于血小板聚集时，无论是电阻法还是光学法血小板计数都无法得到可靠准确的结果，此时就得依靠传统的手工复检来纠正血小板的数量[23-24]。

2.3  对血小板计数的异常纠正

由于诸多因素对血小板计数的准确性有影响，所以各个不同厂商都在扰仪器上的有不同的改进。日本东亚Sysmex-9000该仪器中含有专业浮动界标装置，利用机内计算机在血小板的计数范围内寻找直方图的最低点，以此定为红细胞与血小板的量限。同时，通过对血细胞分析设备充分利用，在对机体红细胞组织以及血小板组织等进行准确计数时，往往要在相同通道条件下，对机体体内颗粒组织的整体体积准确计算、鉴别，以此形式即可获取到检测值，虽然还会有小红细胞组织始终存在，但不会对血小板组织计数结果的测定结果带来影响[25]。

3  结语

在全自动血液分析仪飞速发展的今天，传统的手工法正逐渐容易被检验人员淡忘，仪器计数只是一种过筛手段，对于异常标本，必须进行光学法或者手工法复核。

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（收稿日期：2018-09-25）