两个灵芝菌株特性比较研究

李朝谦 周 靖 苟明鑫 李春 韩鸿翼 叶哓菊 王晨光*

（1龙泉市兴龙生物科技有限公司，浙江龙泉323700；2上海百信生物科技有限公司，上海201403；3成都汇道堂中药饮片有限公司，四川成都600833；4浙江省华丹农业微生物资源应用研究院，浙江杭州，310024；5龙泉市食药用菌产业办公室，浙江龙泉323700）

灵芝是灵芝科（Ganoderceae）灵芝属（Ganoderma）腐生真菌，其子实体和孢子粉所含的多糖、三萜等生物活性物质丰富，在提高人体免疫功能，防治肿瘤和心脑血管疾病等有良好效果，深受广大消费者欢迎，国内外市场广阔。近30年灵芝产业发展迅速，全国灵芝（孢子粉）年栽培量约8000 hm2，产量达15万t[1]。

灵芝栽培技术的发展为其产品深加工提供了优质原料。目前，灵芝栽培由原来单一培育子实体转变为培育子实体“育芝型”和培育孢子粉“育粉型”两种。“育芝型”栽培以培育灵芝子实体形大，盖厚，底色好，有效成分含量高为目标；“育粉型”栽培则以培育产量高、质量好孢子粉为目的。究其根本是满足市场对灵芝子实体和孢子粉的需求，因此，选育符合上述生产要求的灵芝菌株是关键。笔者考察了两个灵芝菌株特性，为灵芝菌株选育及灵芝发育机理研究提供参考。

1 材料与方法

1.1 供试灵芝菌株

灵芝菌株为浙江龙泉市张良明菌种场提供的龙芝二号（203-1#）和沪农灵芝一号（119#）。

1.2 试验方法

1.2.1 栽培试验

试验地为龙泉兰巨、宝溪、屏南三地。每个菌株栽培10段段木（壳斗科阔叶树青冈木段木，单段长15～20 cm）。

按灵芝段木栽培技术规程，完成段木锯断、装袋、灭菌、发菌、埋土、芝芽修剪等程序。每段段木保留一朵灵芝。子实体发育成熟，白色生长圈消失，扎袋套筒培育孢子粉。套筒65 d采收孢子粉和子实体。测定子实体和孢子粉产量。

1.2.2 测定方法

1.2.2.1 子实体显微结构观测

采用透射电镜观察灵芝菌盖表皮、菌管、菌孔及子实层孢子结构。

1.2.2.2 单个灵芝子实体产量统计

采用称量的方式分别测定单个灵芝子实体的重量及所产孢子的重量。

1.2.2.3 灵芝子实体及孢子粉有效活性成分含量测定

用NY/T 1676—2008法测定多糖含量，NY/SJ 339—2001法测定三萜的含量。

2 结果与分析

2.1 电镜观察结果

通过电镜透射菌管结构成像发现龙芝二号的菌孔小，管壁厚，菌管内有一层类胶质物覆盖于菌管的网状结构上；沪农灵芝一号菌孔大，管壁薄，菌管内没有类胶质物覆盖。见图1。

2.2 供试灵芝菌株单个子实体及孢子粉产量

套筒65 d三地各采收10朵灵芝称重，计算单个子实体及孢子粉平均产量（以干重计算产量，鲜子实体按40%折干，湿孢子粉按85%折干），结果见表1及图2。

图1 灵芝子实体电镜透射照片

由表1可见：套筒65 d，龙芝二号单个灵芝子实体及孢子粉平均总产量为352.83 g，其中孢子粉产量1.52 g，占总量0.43%；子实体产量351.31 g，占总量99.57%。沪农灵芝一号单个灵芝子实体和孢子粉平均总产量为289.5 g，其中孢子粉174.34 g，占总量60.22%；子实体115.16 g，占总量39.78%。

表1 单株灵芝子实体和孢子粉产量

2.3 供试灵芝菌株子实体经济性状

测定结果：龙芝二号子实体平均菌盖直径23 cm，盖厚1.4 cm，增厚线4条，底部光板、色均匀、金黄色（图3、图5），质地坚硬；沪农灵芝一号子实体，平均菌盖直径21 cm，盖厚0.3 cm，没有增厚线，底部不平整、色不均、灰白色（图4、图5），质地较松软。

2.4 供试灵芝子实体及孢子粉活性成分检测结果

图2 龙芝二号及沪农一号子实体（背面）及孢子粉量（袋装）

图3 套筒65 d的龙芝二号

图4 套筒65 d沪农灵芝一号

图5 采收灵芝子实体（左为龙芝二号，右为沪农一号）

由于龙芝二号孢子粉产量极低，实际生产中采集意义不大，因此不检测其活性成分含量。活性成分检测结果详见表2。由表2可见，龙芝二号子实体的多糖含量是沪农灵芝一号子实体多糖含量的1.34倍、龙芝二号子实体的三萜含量是沪农灵芝一号子实体三萜含量的1.9倍，可见无论是子实体还是孢子粉两种活性成分龙芝二号均高于沪农灵芝一号；沪农灵芝一号孢子粉多糖含量为其子实体的2.36倍，三萜含量两者相当。

表2 供试灵芝菌株子实体及孢子粉活性成分检测结果

3 小结与讨论

灵芝细胞生殖菌丝是组成灵芝繁殖体的基本结构[2]，龙芝二号菌管孔小，管壁厚，菌管内有一层类胶质物覆盖于菌管的网状结构上。分析认为就是这层类胶质物覆盖物阻碍抑制了孢子的繁殖和弹射，生产性试验验证了这个分析判断（其孢子粉产量占其生物总产量0.43%）。沪农灵芝1号菌孔大，管壁薄，菌管内没有类胶质物覆盖。其繁殖和弹射孢子能力强，产孢量大，其孢子粉产量占生物总产量的60.22%。由此可见，灵芝子实体菌管结构特性与孢子粉产量之间存在着密切相关性，其机理有待进一步研究。

段木栽培灵芝是以适宜的阔叶树木段为营养基质，灵芝子实体生长发育所需的碳、氮及矿物质元素等营养成分基本上是靠菌丝体分解吸收木材组分而来[3]。段木灵芝发育生长过程就是灵芝菌丝细胞从段木基质中分解转化木质吸收营养成分的过程，由于不同灵芝菌株的特异性，其供给目标不同，龙芝二号99.57%的菌丝营养提供给子实体生长，其子实体产量高，质量好；沪农灵芝一号60.22%菌丝营养提供了孢子粉生长，其孢子粉产量高，质量好。研究为灵芝菌种选育及灵芝发育机理研究提供了参考。