高效液相色谱法检测几种蔬菜中啶虫脒农药残留

张静

摘 要：随着人们生活水平的提高，对日常的衣食住行的质量要求也越来越高，尤其是对于食物方面。在食物的食用方面，蔬菜瓜果是最普遍的，但是，目前我国的蔬菜瓜果的种植还是主要依赖于农药使用，而人们一般比价排斥用农药种植的蔬菜，原因有二：一是农药种植口味差;二是农药种植的果实残留多。基于此种现状，本文就用高效液相色谱法检测蔬菜中啶虫脒的农药残留问题进行简单阐述。

关键词：高效液相色谱法;检测;杀虫剂;农药残留

一、高效液相色谱法基本原理及啶虫脒的性质

1.高效液相色谱法。高效液相色谱法是农药检测常用的检测方法之一，相比其他检测方法，它具有色谱较为灵敏、反应快速、分辨率高、重复性好的特点。首先，顾名思义，该方法检测的就是液体相，两相之间是互不相容的，会出现一个明显的界面，当开始试验的时候，由于分离检测极性强，所以当溶质开始测试的时候会相互分配，当即将达到平衡的时候，就可以很明显的发现所测成分的各种表观性质。下文主要是讲述该方法在农药中检测啶虫脒中的应用。另外，高效液相色谱主要分类有：高效凝胶色谱、高效离子交换液相色谱、反相高效液相色谱、疏水性高效液相色谱、高效亲和液相色谱以及高效聚焦液相色谱等类型。用不同类型的高效液相色谱分离或分析各种农作物农药的原理基本上与相对应的普通液相层析的原理是相似的。

2.啶虫脒。啶虫脒属中等的毒性农药，原来是对害虫以胃毒和触杀，对植物内部组织渗透性强，所以耐雨水冲刷，残效期长，对于害虫的防止有良好效果。目前，大部分的作用是用来果黄蚜的防止，屡试不爽。主要使用方法是：根据虫害发生的密集期，当温度提高之后，然后进行喷洒，有良好的治疗和防止效果。但是在使用的时候，要注意不要在桑园附近喷洒，气雾会对于桑园产生不利影响，在使用过程中，不要与碱性农药混用，这样会减小药效。

二、实验部分

1.仪器、试剂和材料。美国Waters液相色谱仪;德国eppendrf5810离心机;德国IKA匀浆机;涡旋混合器;美国N-EVAP112氮吹仪;电子天平;食品捣碎机。色谱纯乙腈;分析纯中性氧化铝：（100～200目，500℃灼烧4h，贮于密封容器中备用）;分析纯弗罗里硅土（60～100目，500℃灼烧4h，贮于密封容器中备用）;色谱纯硅藻土;啶虫脒等九种农药标准物质，分别用乙腈溶剂配制成浓度为1000μg/mL的标准储备液;使用前用乙腈稀释成适用浓度的混合标准工作液（混标）。表2列出了1种农药的基本信息。

2.液相色谱串联质谱条件。色谱柱：BEHC18色谱柱，21cm×50mm（i.d.）×1.7μm，或性能相当者;进样量：10μL;电离方式：+EI;离子源温度：120℃;锥孔反吹气流量：50L/h;去溶剂气：氮气，纯度≥99.999%，流速700L/h，温度380℃;流动相：乙腈和0.1%甲酸;梯度洗脱见表2，测定方式：多反应监测。

3.样品前处理。称量0.5g样品于研钵中，加入1g硅藻土混匀后，再加入1.5g中性氧化铝或硅胶，充分研磨，装入带有筛板和滤纸的6mL固相萃取柱中，用2mL乙腈洗涤研钵，转入柱中，再用10mL乙腈洗脱，收集洗脱液于10mL试管中，经氮吹仪吹至近干后，用乙腈定容到1.0mL，用液相色谱串联质谱仪检测。

三、结果与讨论

1.洗脱剂体积的确定。为了确定所用乙腈的洗脱体积，本研究分别试验了9种农药的洗脱曲线及其相应回收率，洗脱曲线基本相似，以噻螨酮的洗脱曲线为例。结果显示，当淋洗体积为10mL时，可洗脱完全，故洗脱体积选择10mL。

2.仪器分析方法的优化。9种农药多属于难以气化物质，根据9种农药的这一性质，我们选择了液相色谱-质谱联用作为检测和确证的方法，如图4所示。

3.检测下限和线性关系。研究过程中，广泛查找了美国、欧盟、日本等发达国家和地区对于9种农药在蔬菜、水果、肉和鱼类食品中的残留限量，并依据限量优化方法条件，使所得到的方法能夠满足国内外残留限量的要求。方法检测下限是依据10种样品基质中9种农药在LC-MS/MS性噪比（S/N≥10）而定的。在本方法所确定的检测条件下，分别对9种农药标准物在一定浓度范围内制备5个不同浓度水平的混合标准溶液，以相对浓度与相对峰面积作曲线，浓度范围为0.01～1.00μg/mL时，呈良好线性关系。方法检出限、标准曲线相关系数以及添加的浓度为0.01mg/kg，0.02mg/kg和0.051mg/kg的回收率范围列于表1。

4.样品测定。根据食品中水分、脂肪、糖等成分的含量不同进行了科学、细致、合理的分类，分别在植物源性食品和动物源性食品中，选取了10种代表性样品（白菜、土豆、玉米、紫甘蓝、梨、鲤鱼、鸡胸、香菇、菠菜、大葱）作为研究对象，采用本文方法对样品进行9种农药的添加回收实验，平行测定7次。

四、含啶虫脒农药残留的检测实例

两种检测方法中，各有局限性，酶抑制法目前之能实在蔬菜中检测一些酯类的农药，高效液相色谱法在当今的农药检测方面占有很大的比重，尤其是在啶虫脒的检测中，下文就使用该方法去检测几类蔬菜的实例去进一步探讨未来的色谱法检测农药残留的一些注意事项和经验。

1.茶叶中的啶虫脒测定。因为茶叶由于种类比较多，而且产地不同，所以农药残留在茶叶上对于茶叶的品质有很大的影响，因此，就需要用高效液相色谱法来检测。第一步：先将茶叶中的试样提取出来，主要方式有震荡提取法，索式提取法等。然后进行净化，排除实验中的干扰物质，如果还是不能满足实验要求，就需要再进行浓缩，啶虫脒作为一种碱性杀虫剂，作用速度较快，因此在实验过程中要设定好合适的色谱条件，严格按照高效液相色谱法的相关操作流程，在最后的萃取过程中，要进行数据积分处理，利用PCA投影法进行初步探测。要想获得更为理想的实验结论，需要在实验的数据处理分析，色谱处理条件上创新。

2.啶虫脒在普通蔬菜中的残留测定。蔬菜是生活中不可或缺的东西，所以对蔬菜中的含量进行研究是十分必要的，主要实验步骤是：严格设置色谱分析条件、纯样本的制备、净化。回收。然后分析其方法线性关系来确定回收率，再用最低检出量计算最低检出质量分数，利用高效液相色谱法测定蔬菜中的啶虫脒既简单有快捷，而且计量比较准确，还可以进行定量分析。

3.啶虫脒在西红柿中的残留测定。由于啶虫脒的组织渗透性较强，所以在种植西红柿瓜的时候一般不采用含有该成分的农药，但是从理论上检测西红柿中的啶虫脒含量也是可以的，在实验的过程中，如果要考虑西红柿汁对于实验的影响，可能要多一道工序就是二次取样。五、结语。啶虫脒在农药中的使用已经非常普遍，为了保证人们食用的安全，再一步提高生活质量和健康水平。针对这种情况以及目前我国使用农药的泛滥，当下迫在眉睫的就是完善农药检测的相关法规和条例，然后国家要有相关的政策支持地方或者企业去研究检测的手段和技术问题。

参考文献：

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[2]邬阳，郭艳，郭艳琼.高效液相色谱-质谱法测定果蔬中氟虫腈等7种农药残留的方法研究[J].北方农业学报，2017，45（1）：70-75.