毛木耳多糖的提取及生物活性的研究进展

马昱阳 贾凤娟 赵淑芳 弓志青 崔文甲 王延圣 王文亮

摘 要：从毛木耳多糖的提取、药理功能及免疫活性等方面对其研究现状进行综述，为毛木耳多糖的研究提供科学依据。

关键词：毛木耳多糖;提取;药理功能;免疫活性

毛木耳富含胶体，口感爽滑且清脆，营养物质丰富，环境适应性较好、产量较高，但是针对毛木耳多糖的功能性研究较少。本文综述了毛木耳多糖的提取纯化、药理功能及其免疫活性等方面的研究进展，为提高毛木耳多糖的得率以及毛木耳多糖功能的研究提供科学依据。

1 毛木耳多糖的提取方法

毛木耳多糖属于酸性杂多糖，是从毛木耳子实体中经过热水提取而得到的多糖，含有多种微量元素。毛木耳多糖纯化后有2种组分，分别为APP-A、APP-B，它们均由甘露糖、葡萄糖、木糖、岩藻糖和糖醛酸等5种糖类组成[1]。

1.1 热水浸提法

吴春敏等[2]用热水浸提法提取毛木耳多糖，将毛木耳粉碎过筛，在80℃左右的热水中浸提，浸提结束后，进行离心，取上清液浓缩，加乙醇进行多糖的沉淀，烘干脱水得到毛木耳粗多糖半成品。赵爽等[3]将毛木耳筛粉，按照比例料液1∶ 25进行水浴加热4 h，温度控制在90℃，接着在离心机2 000 r/min离心10 min，之后取混合液的上层清液，用乙醇来进行多糖的沉淀，最终得到毛木耳粗多糖。清源等[4]用1∶ 10的料液比，浸提时间为3 h，滤液加入乙醇沉淀，Sevage法除去蛋白质，得到粗多糖。

1.2 乙醇浸提法

贾卫梅等[5]用乙醇浸提法提取毛木耳粗多糖，乙醇作为浸提剂，需要2次浸提，第1次浸提需要乙醇的浓度为95%，第2次浸提需要乙醇的浓度为70%，将提取液离心，收集提取液进行浓缩，过滤，真空干燥，得到毛木耳粗多搪。

1.3 超声波热水浸提法

张丹凤等[6]采用超声波热水浸提法提取毛木耳多糖，将毛木耳粉碎过筛，浸泡于水中，得到的溶液进行发酵，过滤，然后用超声波破碎之后，将多糖提取液加入蒸馏水，水浴加热3 h，最后计算每升发酵液的粗多糖含量。

1.4 酸碱浸提法

魏燕平等[7]为了提高多糖的提取率，采用不同的浸提温度及料液比来进行试验，发现料液比为1∶ 30，温度90℃左右，提取率最高，接着通过酸碱溶液浸提的方法在最优条件下提取多糖，发现采用草酸铵、草酸及NaOH溶液等可提高实体多糖的提取率。

2 毛木耳多糖的药理作用

2.1 抗凝血作用

在毛木耳的研究中，最多的是毛木耳多糖增加體内的凝血时间的药理作用。吴春敏等[2]用毛木耳多糖液灌胃小鼠，通过进行体外抗凝血的实验，发现毛木耳多糖能明显延长体外血浆凝固时间。钟韩等[8]研究发现，毛木耳多糖延长凝固血液的时间最主要的一种途径是通过增加凝固血浆的原酶。经口给予小鼠毛木耳多糖，30d后发现小鼠凝血活酶时间延长。现在研究一般认为，毛木耳多糖主要通过调节内源性凝血系统来达到其抗凝血的作用。

2.2 抗血栓作用

毛木耳多糖抗血栓的作用方式主要有减缓优球蛋白溶解速度、增加纤溶酶活性、降低血小板的数量等。吴春敏等[9]通过进行纤维蛋白溶解时间影响的试验，将毛木耳多糖灌胃小鼠，发现毛木耳多糖能够缩短小鼠优球蛋白溶解时间约为34%，增加了纤溶酶的活力，将37 mg/kg毛木耳多糖液喂养小鼠，一段时间后取血，检验分析发现小鼠的血小板的数量减少。贾卫梅等[5]对毛木耳多糖进行研究，对毛木耳多糖去掉蛋白质进行试验，发现它没有抗血小板凝集的作用，推测毛木耳多糖的抗血小板聚集作用可能与含有蛋白质的多糖有关。

2.3 降血脂作用

吴春敏等[10]研究发现，毛木耳多糖液喂养患有高血脂症的小鼠一段时间后，测定血清中的胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）及低密度脂蛋白（LDL-C）的含量，结果发现，3种物质的含量明显降低。

2.4 抗氧化作用

毛木耳多糖在抗氧化作用方面比较显著，是多糖研究的重点之一，毛木耳多糖提高抗脂质氧化作用的机理是通过清除自由基的方式。研究发现，毛木耳多糖清除自由基的方式主要是通过与羟基自由基发生反应来实现的，而毛木耳多糖对超氧离子的自由基清除率甚至更高[11]。所以推断，毛木耳多糖抗氧化能力的基本原理是其结构中的活性羟基与羟自由基或者多糖中的活泼氢与活泼的超氧阴离子发生自由基反应，生成稳定的化合物水来实现的[2]。

3 毛木耳多糖免疫功能作用的研究

3.1 毛木耳多糖对免疫器官的影响

脾脏和胸腺是机体中免疫功能的重要免疫器官，因此脾脏与胸腺的重量变化也是用来进行免疫评价的标准之一。吴春敏等[2]通过用毛木耳多糖进行免疫反应的研究，发现毛木耳多糖能够提高免疫抑制小鼠的脾指数。余梦瑶等[12]研究发现，毛木耳多糖能够明显提高小鼠免疫脏器的重量，反映出多糖能够影响其免疫脏器的指数。

3.2 毛木耳多糖对免疫细胞的影响

在免疫应答过程中要有免疫细胞直接或者间接的参与，淋巴细胞和辅助细胞在免疫应答过程中扮演了重要的角色。其中，淋巴细胞在免疫应答过程中扮演着重要的角色，而起着辅助作用的两种免疫细胞则是吞噬细胞和树突状细胞。吴春敏等[13]对小鼠进行毛木耳多糖的注射，然后吸取腹腔洗液制片观察，发现注射75 mg/kg和150 mg/kg的小鼠体内吞噬率分别增加21%和53%，吞噬指数增加31%和95%。余梦瑶等[12]对小鼠进行碳粒廓清能力试验，通过毛木耳多糖灌胃30d后发现，多糖促使碳粒廓清指数明显提高，成正比例剂量关系，这些数据反映了毛木耳多糖对免疫功能低下的小鼠腹腔巨噬细胞具有较好的非特异性免疫促进作用，能够加速淋巴细胞的转化率。王道福[13]通过进行反向离子对高效液相色谱的方法来测定小鼠腹腔巨噬细胞蛋白激酶A活性，发现毛木耳多糖能够引起小鼠腹腔巨噬细胞蛋白激酶A的活性升高，并且具有一定浓度剂量依赖性。

3.3 毛木耳多糖对免疫球蛋白的影响

在动物的血液血清、淋巴液、组织液及其他外分泌液中都含有一种具有免疫功能的物质——免疫球蛋白。余梦瑶等[12]通过对小鼠随机分组，给予口服不同剂量的毛木耳多糖液，增加空白组，一段时间后在尾部静脉注射墨汁进行血清溶血素抗体生成实验，发现毛木耳多糖灌胃的小鼠，血清溶血素抗体生成的能力水平明显比空白组高，且差异明显。陈琼华等[11]进行毛木耳多糖的分离、分析及免疫药理活性的研究，发现小鼠灌胃毛木耳多糖后测定半数溶血值HC50，HC50值比空白对照组提高，而且吞噬指数K明显提高，这些实验说明毛木耳多糖具有明显增强免疫的功效。

4 研究展望

毛木耳具有较高的经济价值和社会生态效益，提高毛木耳多糖的提取率，研究毛木耳的药理功能作用及提高免疫的作用，对毛木耳多糖生物活性研究和发展具有重要意义。

参考文献

[1]和寿英，熊子仙.毛木耳多糖的分析研究[J].云南師范大学学报（自然科学版），1999（4）：40-42.

[2]吴春敏，陈琼华.毛木耳多糖的分离、分析及免疫药理活性的研究[J].中国药科大学学报，1991（2）：97-100.

[3]赵爽，刘宇，许峰，等.毛木耳多糖降血脂功效研究[J].食品科技，2013（6）：192-195.

[4]清源，余梦瑶，罗霞，等.毛木耳子实体中活性多糖APPⅡA的分离纯化与结构初探[J].菌物学报，2009，28（6）：813-818.

[5]贾卫梅，何国襄，刘晶.毛木耳对血小板聚集作用的成分研究[J].中国食用菌，1991（2）：45-47.

[6]张丹凤，郑仕栋，陈国平，等.白背毛木耳胞内多糖的提取与纯化[J].食用菌学报，2010，17（3）：51-54.

[7]魏燕平，杨梅.白背木耳子实体多糖和菌丝体多糖提取方法的研究[J].宁德师范学院学报（自然科学版），1998（1）：71-73.

[8]钟韩，杨振湖，李惠英，等.毛木耳粗多糖止血机制初探[J].中国食用菌，1991（2）：14-15.

[9]吴春敏，陈琼华.毛木耳多糖的抗凝血和降血脂作用[J].中国药科大学学报，1991（3）：164-166.

[10]吴春敏，陈琼华.毛木耳多糖对实验性血栓形成的影响[J].中国生化药物杂志，1992（2）：45-46.

[11]吴春敏，陈琼华.毛木耳多糖耐缺氧作用及对心脏和血压的影响[J].中国生化药物杂志，1992（1）：21-23.

[12]余梦瑶，张剑，朱小牧，等.毛木耳多糖对小鼠免疫功能的影响[J].时珍国医国药，2012，23（11）：2711-2713.

[13]王道福，邵林萍，菊保文，等.毛木耳多糖对小鼠腹腔巨噬细胞蛋白激酶 A活性的影响[J].解放军药学学报，2002，12（1）：102-103.

Abstract：This paper reviewed the research advancement of Auricularia polytricha polysaccharides from three aspects of extraction，pharmacological function and immune activity to afford scientific basis for future research and development.

Keywords：Auricularia polytricha polysaccharide;extraction;pharmacological function;immune activity

（责任编辑 唐建敏）