青蒿中草药添加剂对散养肉鸡抗病及免疫性能的影响

张滔滔，陈胜昌*，张华琦，王清峰，杨林花，陆小萝，卢盛勇

（1.贵州大学动物科学学院，贵州贵阳550025；2.铜仁职业技术学院畜禽健康养殖中心，贵州铜仁554300）

为防治肉鸡疾病和提高经济效益，在肉鸡的养殖中普遍使用抗生素等人工合成类药物做饲料添加剂，虽然有防治效果，但也产生了药物残留、环境污染等问题。因此，寻找安全、绿色的饲料添加剂刻不容缓（廖玉英等，2010；郭爱伟等，2009）。中草药具有毒副作用小、无药残与不易产生耐药性等特点，其含有丰富的营养与生物活性物质，能够提高动物机体免疫和生长性能，是抗生素的理想替代品（卢福山等，2011）。青蒿是我国常见中草药，具有解暑、祛风、止痒等功效。有研究表明，青蒿作为饲料添加剂应用于畜禽的实际生产中，能够提高畜禽的生产性能、免疫性能以及改善畜禽的产品品质（宋志华等，2016；周全民等，2015；马飞等，2011）。目前，关于青蒿应用于肉鸡实际生产的报道相对较少。本试验以青蒿及其中草药复方作为饲料添加剂，研究其对散养肉鸡免疫及抗病性能的影响，确定青蒿作为饲料添加剂的最佳添加方式，为其应用于肉鸡的实际生产提供理论依据与实践参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料 试验所用中草药购于贵阳市太升中药批发市场，药材经65℃烘干，粉碎后80目过筛备用。

1.2 试验动物与设计 试验选用体况健康、初始体重基本一致[（580±18.34）g]的30日龄脱温肉鸡360只，采用多因素单水平的试验设计，将试鸡随机分为4个组，每个组3个重复，每个重复30只，进行60 d的饲养试验，试验1组饲喂基础日粮（表1），试验2、3、4组分别在基础日粮中添加1%的青蒿、1%的青蒿复合添加剂Ⅰ（青蒿、板蓝根、鱼腥草、陈皮等）及1%的青蒿复合添加剂Ⅱ（青蒿、黄芪、天麻、金银花等），具体见表2。

1.3 饲养管理 采用围栏分区散养，每天喂料2次（早晚各1次），试鸡自由采食、饮水。试验期间，按照常规饲养管理，定期清扫圈舍，消毒。

表1 基础饲粮组成及营养水平

表2 试验分组情况

1.4 指标测定及方法

1.4.1 腹泻率、发病率及死亡率 于正式期每天观察3次（早、中、晚）鸡群状态，详细记录鸡群腹泻、发病、死亡等情况。

1.4.2 免疫器官指数 饲养试验结束后，每个重复选取3只试鸡，取免疫器官胸腺、脾脏以及法氏囊等称重。

1.4.3 血清免疫及抗氧化指标 试验结束后每个重复选取3只试鸡进行翅静脉采血5 mL，离心分离出血清，分装于离心管中-20℃条件保存，用于血清免疫及抗氧化指标的测定。所用试剂盒均购自南京建成生物技术有限公司，操作方法严格按照试剂盒说明书的步骤进行。

1.5 数据处理 本试验全部数据都采用Excel 2013进行初步整理分析，应用SAS 9.3软件中Proc GLM过程进行统计分析。平均值的多重比较采用Duncan’s法进行，差异显著性水平为P＜0.05。试验数据以“平均值±标准差”表示。

2 结果与分析

2.1 青蒿及其复合中草药添加剂对肉鸡抗病性能的影响 由表3可知，青蒿及其复合中草药添加剂都能够显著降低散养肉鸡的腹泻率和死亡率（P＜0.05）。试验2组的腹泻率和死亡率最低，较试验1组分别降低了68.31%和85.73%（P＜0.05）。试验2组和试验3组的发病率较试验1组分别降低了42.44%与57.56%（P＜0.05），其中试验3组的发病率最低。

表3 青蒿及其复合中草药添加剂对肉鸡抗病性能的影响%

表4 青蒿及其复合中草药添加剂对肉鸡免疫器官指数的影响g/kg

2.2 青蒿及其复合中草药添加剂对肉鸡免疫器官指数的影响 由表4可知，试验2组胸腺指数最高，与试验1组相比提高了57.29%（P＜0.05）；脾脏指数和法氏囊指数3个中草药添加组与对照组之间无显著差异（P＞0.05），但都高于试验1组。

2.3 青蒿及其复合中草药添加剂对肉鸡血清免疫指标的影响 由表5可知，青蒿及其复合中草药添加剂能不同程度提高血清中免疫球蛋白和补体C3、C4的含量。其中3个中草药组IgM的含量较试验1组分别提高了93.44%、126.23%和106.56%（P＜0.05），IgM含量以试验3组最高，3个中草药组之间差异均不显著（P＞0.05）。IgG含量和IgA含量各组之间差异不显著（P＞0.05）。对于补体C3含量，3个中草药组都显著高于对照组，分别提高了30.82%、41.01%和27.87%（P＜0.05），其中以试验3组含量最高，试验2组和4组与其差异不显著（P＞0.05）。各组之间补体C4的含量差异不显著（P＞0.05），但都有所提高。

表5 青蒿及其复合中草药添加剂对肉鸡血清免疫指标的影响

2.4 青蒿及其复合中草药添加剂对肉鸡血清抗氧化指标的影响 由表6可知，试验3组超氧化物歧化酶（SOD）含量最高[（223.48±15.82）U/mL）]，与试验1组相比提高了17.84%，且差异显著（P＜0.05），3个中草药添加组之间差异不显著（P＞0.05）。谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）含量和丙二醛（MDA）含量各组之间差异不显著（P＞0.05）。

表6 青蒿及其复合中草药添加剂对肉鸡抗氧化指标的影响 U/mL

3 讨论

3.1 青蒿及其复方中草药添加剂对肉鸡抗病性能的影响 研究表明，中草药作为饲料添加剂具有药物与营养双重作用，不仅能提高动物的生产性能，还能防治疾病，增强动物的抗病性能（鲍宇红等，2016）。有关青蒿在肉鸡抗病性能方面的研究鲜见报道。相关研究表明，饲用青蒿复合制剂与小鼠免疫力与抗病性能的增强呈正相关。在小鼠超敏反应和T细胞介导的皮肤炎症反应试验中发现，局部给予小鼠青蒿素可有效抑制超敏反应和ConA驱动的T细胞增殖；诱导调节T细胞的产生，达到对相关疾病的治疗作用（Li等，2012）。冯文宇（2006）将由中草药青蒿和金银花组成的青银注射液注射进感染病原菌的小鼠体内，研究发现青银注射液能够有效抑制或灭杀小鼠体内的致病菌，并能提高小鼠的存活率以及增强其抗病性。金银花中主要活性成分如绿原酸、黄酮类等能够提高机体免疫力、抗病性能且具有抑菌、抗病毒的功效，而青蒿因其有效成分如黄酮类、香豆素类和挥发油类等同样具有抑菌、抗病毒和免疫调节的作用（汪晓河等，2018；王申，2015）。因此，两者组合而成的青银注射液对小鼠的健康机能有促进作用。康红军（2009）研究表明，在断奶仔猪的饲粮中分别添加四种青蒿提取物（RY16、RY17、RY18、RY19），与对照组相比，试验组RY16、RY17、RY18、RY19的总发病率分别降低了27.2%、21.8%、19.8%、6.3%，且RY16、RY17的腹泻率显著降低（P＜0.05），表明青蒿提取物具有提高仔猪抗病性能的功效。贾玉刚（2018）通过在藏鸡的基础日粮中分别添加由黄芪、党参、当归、甘草等配伍而成的中草药制剂，发现该复方中草药制剂能提高试鸡的存活率，增强机体免疫机能，接近或达到抗生素的饲用效果，有良好的替抗前景。本试验结果表明，在试鸡日粮中添加青蒿及其复方中草药制剂均能显著降低试鸡的腹泻率和死亡率，其中试验2组的抗病效果最好，说明青蒿及其复方中草药制剂具有提高散养肉鸡抗病性能，降低其死亡率的功效，这与上述的研究结果较为一致。

3.2 青蒿及其复方中草药添加剂对肉鸡免疫器官指数的影响 胸腺、脾脏和法氏囊作为家禽的免疫器官在发挥免疫相关功能中有着极其重要的作用，免疫器官指数是衡量肉鸡免疫性能的重要指标（燕磊等，2017）。其重量可反映肉鸡的免疫状况（吕景旭等，1998）。Rivas（1988）认为，鸡的免疫性能与其免疫器官重量成正相关关系，免疫器官会因其自身重量的增加而功能增强。青蒿等中草药中含有很多的免疫活性成分，如有机酸、生物碱、多糖及苷类等，这些活性成分能够刺激动物的免疫系统并使其活化，增强机体免疫功能。代飞燕（2004）通过白术、干姜、天花粉等配伍而成的复方中草药制剂添加在试鸡的基础日粮中进行为期42 d的饲养试验，研究发现与对照组相比，复方中草药组试鸡的免疫器官指数显著提高（P＜0.05）。帅学宏（2015）为观察青蒿多糖对免疫抑制小鼠免疫功能的调节作用，用环磷酰胺（Cy）作用于小鼠建立免疫抑制模型，并将4个不同剂量的青蒿多糖对模型小鼠进行腹腔注射，7 d后测定其免疫器官指数，并对其胸腺、脾脏进行组织学观察，研究发现青蒿多糖可提升免疫抑制小鼠的脾脏指数，且组织学观察显示青蒿多糖对Cy引起的脾脏和胸腺的结构损伤具有一定修复作用，表明青蒿多糖具有增强机体免疫功能的作用。本试验在日粮中添加青蒿及其复方中草药饲喂肉鸡，结果表明肉鸡的免疫器官指数均有不同程度的提高，其中试验2组与试验1组的胸腺指数相比差异显著（P＜0.05），说明青蒿及其复方中草药制剂对肉鸡的免疫器官指数有促进作用，这与前人的研究结果一致，其中试验2组（青蒿组）的综合效果最好。本试验中试验3、4组（青蒿复合I组、青蒿复合II组）相比于试验1组，肉鸡的免疫器官指数有所提高，但差异不显著（P＞0.05）。马飞（2011）研究表明，青蒿复合中草药制剂能显著提高试鸡的免疫器官指数（P＜0.05），这与本试验中两个青蒿复合中草药组的研究结果并不一致，其原因可能与青蒿的配方、添加剂量以及试验动物所处的生长阶段不同有关，有待进一步研究。

3.3 青蒿及其复合中草药添加剂对肉鸡血清免疫和抗氧化指标的影响 血清中免疫与抗氧化指标能直接反映机体的健康状况。血清中的免疫球蛋白主要有IgG、IgM、IgA等，免疫球蛋白在畜禽机体的体液免疫系统中发挥着极其重要的作用，其含量的高低能反映机体免疫力的强弱（刘辉等，2015）。补体是体液免疫中一些必须经过活化才能产生生物活性的蛋白质，能参与机体的免疫反应。C3和C4作为补体系统的重要组成部分，在动物机体免疫和维持内环境稳定中发挥着重要作用。Guo（2004）研究发现，中草药提取物能够改善和修复肉鸡的免疫功能，并能刺激试鸡使其体液免疫的活力增强。相关研究表明，青蒿口服液能够提高小鼠体液免疫与细胞免疫功能。林盛裕（2017）通过将松针、仙人掌、辣蓼等配伍而成的复方中草药提取物添加到广西麻鸡的基础日粮中，进行为期120 d的饲养试验，研究发现较对照组，中草药提取组试鸡血清中IgG、IgA、IgM、补体C3和C4的含量显著提高（P＜0.05），表明中草药提取物能显著改善试鸡的血清免疫指标，增强机体免疫功能。马绍伟（2016）通过在河田鸡的基础日粮中添加复方中草药超微粉，进行为期105 d的饲养试验，并分别于28、56、105 d采血进行血清免疫指标的测定，结果显示，复方中草药超微粉能显著提高试验28 d时试鸡血清中补体C4和IgM含量（P＜0.05），显著提高56 d和105 d试鸡IgG的含量，表明该中草药超微粉能提高河田鸡的免疫机能。本试验结果表明，青蒿及其复合中草药添加剂都能够不同程度提高试鸡血清中免疫球蛋白的含量，其中各中草药组的IgM含量相比于对照组都显著提高（P＜0.05），IgG和IgA的含量各组之间差异不显著（P＞0.05），但中草药组都有所提高，这与上述的研究结果较为一致，说明青蒿及其复合中草药在一定程度上能够增强肉鸡的机体免疫功能，有利于鸡群的健康状况。

畜禽机体在代谢时会生成一些对自身不好的氧自由基，具有强氧化性，这些氧自由基会引发生物膜发生脂质过氧化反应，产生如MDA等会对膜蛋白造成损害的终产物，破坏细胞的正常功能，对机体造成损害（Rafalowska，1989）。机体对自由基的清除主要依赖于机体完整的抗氧化防御系统的预防性或阻断性控制，从而保护机体组织和细胞免受自由基的氧化损伤（霍振华等，2009）。机体的抗氧化指标主要包括MDA、GSH-Px、SOD、CAT与T-AOC（M Szczubial，2004）。许多研究表明，中草药添加剂能有效提高SOD和GSH-Px等酶的活性，抑制脂质过氧化反应，降低MDA等有害终产物的含量。青蒿中富含养分和抗氧化活性物质，且青蒿中的抗营养因子比例极低，能够作为饲料添加剂应用于实际生产中。黄金华（2017）研究表明，在广西灵山土鸡的基础日粮中添加中药沉香粉能显著提高试鸡的抗氧化能力（P＜0.05）。邱玉朗（2017）在白羽肉鸡的基础日粮中添加复方中草药添加剂并探究对其对抗氧化指标的影响，发现复方中草药制剂显著提高了血液SOD、TAOC和GSH-Px水平（P＜0.05），同时降低了MDA水平（P＜0.05），表明该复方中草药制剂具有增强试鸡机体抗氧化性能的功效。本试验研究表明，3个中草药组与对照组相比试鸡血清中的GSH-Px与SOD含量不同程度提高，MDA含量降低，其中试验3组的SOD含量最高，且显著高于对照组（P＜0.05），说明青蒿及其复合中草药添加剂可以提高散养肉鸡的抗氧化能力，有利于鸡群健康生长。本研究中试验3组（青蒿复合Ⅰ组）的添加效果要优于试验2组（青蒿组），其原因可能是多成分、多功能的青蒿复方添加剂在配伍之后发生药效互补，使其效果要好于添加单体青蒿。

4 结论

在日粮中添加青蒿及其复方中草药添加剂均能不同程度改善和提高散养肉鸡的抗病性、免疫器官指数、血清免疫以及抗氧化指标。综合分析，试验2组（添加1%青蒿组）对提高散养肉鸡抗病以及免疫性能的效果最好。