新生儿溶血病患儿心肌酶谱、肌钙蛋白T及血清神经元特异性烯醇化酶检测的临床意义

林静 张建钫 周欢

[摘要]目的 通過对新生儿溶血病（HDN）患儿心肌酶谱、肌钙蛋白T（cTnT）及血清神经元特异性烯醇化酶（NSE）的检测，探讨心肌酶谱、cTnT、NSE在HDN引起心脏、神经系统功能改变中的临床意义。方法 选择2016年6月～2017年6月我院经临床和实验室确诊的336例HDN患儿，根据总胆红素（TBIL）水平将HDN患儿分为A组（46例）、B组（66例）、C组（169例）、D组（55例），同时选取40例正常足月新生儿作为对照组。检测各组的TBIL、间接胆红素（IBIL）、心肌酶谱[天门冬酸氨基转换酶（AST）、磷酸肌酸激酶（CK）、磷酸肌酸激酶同工酶（CK-MB）、乳酸脱氢酶（LDH）、α-羟丁酸脱氢酶（α-HBDH）]、cTnT以及NSE水平;分析各指标与TBIL、IBIL之间的相关性。结果 A、B、C、D组的TBIL、IBIL水平均高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）;A、B、C、D组的TBIL、IBIL水平比较，差异有统计学意义（P<0.05）;A、B、C、D组的AST、LDH、α-HBDH、NSE水平均高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）;A、B、C、D组的AST、LDH、α-HBDH、NSE水平比较，差异无统计学意义（P>0.05）;A、B组的CK、CK-MB水平均高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）;C、D组的CK、cTnT水平与对照组及A组比较，差异有统计学意义（P<0.05）;C组的CK-MB水平高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）;D组的CK-MB水平低于A组和B组，差异有统计学意义（P<0.05）。AST、LDH、α-HBDH及NSE与TBIL、IBIL不相关（P>0.05）;CK与TBIL、IBIL均成负相关（r=-0.18、-0.17，P<0.05）;CK-MB与TBIL、IBIL均成负相关（r=-0.19、-0.20，P<0.05）;cTnT与TBIL、IBIL均成正相关（r=0.15、0.16，P<0.05）。结论 HDN患儿存在心肌酶谱、cTnT、NSE的改变，提示患儿可能存在心功能、神经系统受损，但与胆红素水平无明显线性相关性。

[关键词]新生儿;高胆红素血症;心肌酶谱;肌钙蛋白T;神经元特异性烯醇化酶

[中图分类号] R722.1          [文献标识码] A          [文章编号] 1674-4721（2019）7（b）-0012-04

[Abstract] Objective To detect myocardial enzymes， troponin T （cTnT） and serum neuron specific enolase （NSE） in children with hemolytic disease of the newborn （HDN）， and to investigate the clinical significance of myocardial enzymes， cTnT and NSE in HDN induced changes of cardiac and nervous system functions. Methods A total of 336 children with HDN diagnosed by clinical and laboratory in our hospital from June 2016 to June 2017 were selected. Children with HDN were divided into group A （46 cases）， group B （66 cases） and group C （169 cases）， and group D （55 cases） according to total bilirubin （TBIL） level. At the same time， 40 normal newborns were selected as the control group. The levels of TBIL， indirect bilirubin （IBIL）， myocardial enzymes （aspartic acid amino-converting enzyme [AST]， creatine kinase [CK]， creatine kinase isoenzyme [CK-MB]， lactate dehydrogenase [LDH]， α-hydroxybutyrate dehydrogenase [α-HBDH]）， cTnT， and NSE were detected among the groups. The correlation between each indicator and TBIL， IBIL was analyzed. Results The levels of TBIL and IBIL in group A， B， C and D were higher than those in the control group， and the differences were statistically significant （P<0.05）. The differences of TBIL and IBIL levels in group A， B， C and D were statistically significant （P<0.05）. The levels of AST， LDH， α-HBDH and NSE in group A， B， C and D were higher than those in the control group， and the differences were statistically significant （P<0.05）. There were no significant differences in AST， LDH， α-HBDH and NSE levels among group A， B， C and D （P>0.05）. The levels of CK and CK-MB in group A and group B were higher than those in the control group， and the differences were statistically significant （P<0.05）. The levels of CK and cTnT in group C and group D were significantly different from those in control group and group A （P<0.05）. The level of CK-MB in group C was higher than that in the control group， and the difference was statistically significant （P<0.05）. The level of CK-MB in group D was lower than that in group A and group B， and the difference was statistically significant （P<0.05）. The AST， LDH， α-HBDH and NSE were not correlated with TBIL and IBIL （P>0.05）. The CK was negatively correlated with TBIL and IBIL （r=-0.18， -0.17， P<0.05）. The CK-MB was negatively correlated with TBIL and IBIL （r=-0.19， -0.20， P<0.05）. The cTnT was positively correlated with TBIL and IBIL （r=0.15， 0.16， P<0.05）. Conclusion Changes in myocardial enzymes， cTnT， and NSE in children with HDN suggest that there may be cardiac and neurological damage in children， but there is no significant linear correlation with bilirubin levels.

[Key words] Newborn; Hyperbilirubinemia; Myocardial enzymes; Troponin T; Neuron specific enolase

高胆红素血症是新生儿一种常见的疾病，其病因较为复杂，严重者可引起胆红素脑病（核黄疸），甚至导致死亡，存活者多留有后遗症[1-2]。新生儿溶血病（hemolytic disease of newborn，HDN）是高胆红素血症的主要原因之一，其发病机制是母亲所不具有的胎儿显性红细胞血型抗原通过胎盘进入母体，刺激母体产生相应的抗体并通过胎盘进入胎儿体内，与胎儿红细胞相应抗原结合，致敏的红细胞在单核-吞噬细胞系统内被破坏，导致不同程度的溶血，临床表现为不同程度的黄疸、贫血、水肿、脾肿大，严重者可致核黄疸，甚至死亡。对于高胆红素血症引起的心功能改变[3-6]、神经系统功能改变[7-11]已有许多报道，但单纯针对由HDN而引起的心脏、神经系统功能改变的报道较为少见。本研究以经临床和实验室确诊的336例HDN患儿作为研究对象，检测其心肌酶谱，包括天门冬酸氨基转换酶（aspartic acid amino- converting enzyme，AST）、磷酸肌酸激酶（creatine kinase，CK）、磷酸肌酸激酶同工酶（creatine kinase isoenzyme，CK-MB）、乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase，LDH）、α-羟丁酸脱氢酶（α-hydroxybutyrate dehydrogenase，α-HBDH），以及肌钙蛋白T（troponin T，cTnT）和血清神经元特异性烯醇化酶（neuron specific enolase，NSE），同时检测40例正常足月新生儿作为对照组。根据总胆红素（total bilirubin，TBIL）水平将HDN患儿进行分组，分析各组指标的差异，同时分析各指标与TBIL、间接胆红素（indirect bilirubin，IBIL）之间的相关性，现报道如下。

1资料与方法

1.1一般资料

选择2016年6月～2017年6月我院新生儿科收治的，经临床、影像学及实验室检查：母、婴、父血型，TBIL、直接胆红素（direct bilirubin，DBIL）、IBIL，新生儿溶血病“三项试验”（抗人球蛋白试验、游离试验和释放试验）等确诊为HDN的336例患儿作为研究对象，男204例，女132例，胎龄37～42周，日龄1～9 d，出生体重2500～4000 g。按照TBIL水平将其分为四组，即A组（46例），TBIL 96.1～<221 μmol/L;B组（66例），TBIL 221～<256 μmol/L;C组（169例），TBIL 256～<342 μmol/L;D组（55例），TBIL≥342 μmol/L。选取同期在我院分娩的足月新生儿40例（TBIL<96.1 μmol/L）作为对照组。各组均排除感染、窒息及先天畸形等。各组的一般资料比较，差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。本研究全部患儿家属均对本研究知情同意，且研究方案经医院医学伦理委员会审核批准。

1.2方法

1.2.1标本采集与处理  HDN患儿及正常对照组新生儿均用含促凝剂真空采血管采集股静脉血2管各2 ml，1管用于检测TBIL、DBIL、IBIL、AST、CK、CK-MB、LDH、α-HBDH，另1管用于检测cTnT、NSE。

1.2.2检测方法  TBIL、DBIL、IBIL、AST、CK、CK-MB、LDH、α-HBDH检测仪器为Cobas 8000全自动生化分析仪（Roche公司），cTnT检测采用Cobas411生化分析仪（Roche公司），NSE检测采用电化学发光检测，仪器为CobasE601全自动电化学发光免疫分析仪（Roche公司），所有试剂均为配套试剂，严格按照使用说明书进行操作。

1.3观察指标

检测各组的TBIL、IBIL、心肌酶谱（AST、CK、CK-MB、LDH、α-HBDH）、cTnT以及NSE水平;同时分析各指标与TBIL、IBIL之间的相关性。

1.4统计学方法

采用SPSS 11.5统计学软件进行数据分析，计量资料用均数±标准差（x±s）表示，正态分布的计量资料多组间比较先用方差分析，算出F值与P值，P<0.05的数据再用LSD法进行两两比较，算出t值与P值，成正态分布方差不齐的两组数据比较采用t′检验，方差齐则采用t检验;两因素间的相关性采用直线相关分析，系数结果用r表示，以P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1各组TBIL、IBIL、AST、CK、CK-MB、LDH、α-HBDH、cTnT、NSE水平的比較

A、B、C、D组的TBIL、IBIL水平均高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）;A、B、C、D组的TBIL、IBIL水平比较，差异有统计学意义（P<0.05）;A、B、C、D组的AST、LDH、α-HBDH、NSE水平均高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）;A、B、C、D组的AST、LDH、α-HBDH、NSE水平比较，差异无统计学意义（P>0.05）;A、B组的CK、CK-MB水平均高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）;C、D组的CK、cTnT水平与对照组及A组比较，差异有统计学意义（P<0.05）;C组的CK-MB水平高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）;D组的CK-MB水平低于A组和B组，差异有统计学意义（P<0.05）（表1）。

2.2 HDN患儿各项指标与TBIL、IBIL的相关性分析

AST、LDH、α-HBDH及NSE与TBIL、IBIL不相关（P>0.05）;CK、CK-MB与TBIL、IBIL均成负相关（P<0.05）;cTnT与TBIL、IBIL均成正相关（P<0.05）（表2）。

3讨论

足月新生儿高胆红素血症发生率较高，国内流行病学调查发现，足月新生儿血清胆红素峰值>220.6 μmol/L者达34.4%[12]，其中HDN是高胆红素血症的重要原因。HDN是由于母体存在与胎儿血型不相容的血型抗体（IgG）引起，因胎儿红细胞进入母体循环，当母体缺乏胎儿红细胞所具有的抗原时，母体就产生相应的血型抗体，此抗体通过胎盘进入胎儿循环，则引起胎儿红细胞凝集、破坏，导致血清间接胆红素的增高[13]。近年研究发现，当胆红素水平过高，超过肝脏代谢能力，会对心、脑、肝、肾等重要器官及血液、免疫系统造成不同程度的损伤[14]。目前，常用的判断心肌是否受损及受损程度的实验室指标有心肌酶和肌钙蛋白[15-16]，NSE可作为反映脑组织损伤的理想生化指标[17-18]。

心肌酶的各项指标中，AST在心肌细胞和肝细胞中含量较多，LDH广泛分布于心肌、红细胞、肌肉和肝脏中，CK主要分布在心肌和骨骼肌中，其次分布在脑、平滑肌等细胞中，CK-MB绝大部分存在于心肌细胞浆内，是一种心肌特异性酶。因此当心肌细胞受损，细胞膜结构破坏，细胞通透性改变，心肌酶可以释放入血[4]。有研究显示，CK-MB并非只存在心肌细胞，同时也存在于骨骼肌中，并且有研究证实CK-MB可以通过胎盘，CK-MB的升高更多反映了母亲分娩时的应激以及骨骼肌受累程度[19]。本研究结果显示，HDN各组的AST、LDH、α-HBDH、CK水平均高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05），但是AST、LDH、α-HBDH与TBIL、IBIL之间无相关关系（P>0.05），CK、CK-MB与TBIL、IBIL均成负相关（P<0.05），提示HDN患儿虽然存在部分心肌酶谱的升高，因此，HDN患儿心肌酶谱水平并不能完全反映新生儿的心肌损伤程度，这与杨文青等[5]及赵辉[20]的研究结果相同。

心肌肌钙蛋白特异地分布于心肌组织，作为心肌损伤高敏感性和特异性的标志物。心肌肌钙蛋白由3种亚基组成：肌钙蛋白C（cTnC）、肌钙蛋白I（cTnI）及cTnT。当心肌细胞因缺血缺氧等因素遭破坏时，游离的cTnT和cTnI首先迅速从细胞中释放入血，随后结合于心肌结构蛋白中的结合型cTnT和cTnI逐渐分解，缓慢释放入血循环中，故心肌细胞受损后，cTnT和cTnI在循环中较早出现并能持续较长时间。本研究结果显示，cTnT与TBIL、IBIL均成正相关（P<0.05），当TBIL>256 μmol/L时，cTnT水平明显高于A组（P<0.05），这与何景东[4]及阴崇娟等[6]的研究结果一致，提示当HDN患儿的TBIL>256 μmol/L时，会导致患儿心肌标志物的升高，提示有心肌损害。

NSE是神经元及神经内泌细胞的一个标志酶，当神经元损伤或坏死后，细胞质中的NSE进入脑脊液（CSF），使CSF中的NSE浓度增高。HDN患儿由于红细胞的破坏，导致大脑一定程度的缺血缺氧，同时，由于因高未结合胆红素血症新生儿血脑屏障整体性破坏及通透性增加，高未结合胆红素通过血脑屏障进入CSF与神经细胞结合，致神经细胞凋亡，造成包括胆红素脑病在内的神经系统损害，导致脑脊液NSE升高，由于血脑屏障整体性破坏及通透性增加，使得CSF中NSE释放人血液，致血清NSE升高。王吉等[10]报道，高胆红素血症新生儿血清NSE水平较高，且可引起患儿脑损伤。成红霞等[17]报道，胆红素脑病患儿血清NSE水平明显高于高胆红素血症患儿，且血清NSE水平与胆红素脑病发病具有相关性，提示血清NSE可作为早期预测胆红素脑损伤的辅助指标。丁丽丽[21]报道高未结合胆红素的升高伴随体内NSE水平升高，NBNA神经功能评分相应下降，同时患儿体内NSE含量越高，其NBNA评分相对越低，表明脑部神经功能损伤越严重。本研究结果显示，HDN患儿各组的NSE水平均高于对照组（P<0.05），提示患儿存在一定程度的神经系统损害。相关分析结果显示，血清NSE与TBIL、IBIL水平均无线性相关（P>0.05），提示血清TBIL、IBIL水平升高虽可引起高胆红素血症，但可能与患儿脑损伤的发生无明显关系。

综上所述，HDN患儿存在心肌酶谱、cTnT、NSE的改变，但与胆红素水平无明显线性相关，提示HDN患儿可能存在心功能、神经系统受损，但与高胆红素血症无明显相关，建议临床要根据患儿的临床表现，结合实验室检查、心电图和神经行为测定评（BAEP）等，综合判断病情。

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（收稿日期：2019-01-16  本文编辑：任秀兰）