小白薇根化学成分的研究

林玉萍，李欣坪，付胜男，周正兵，华 燕

（1.西南林业大学，西南山地森林资源保育与利用教育部重点实验室，云南 昆明 650224；2.云南中医药大学中药学院，云南 昆明 650500）

小白薇彝药名阿科牛，汉药名老君须，来源于萝摩科娃儿藤属植物云南娃儿藤Tylophora yunnanensisSchltr 的根，其生长于海拔2 000 m 以下山坡、向阳旷野及草地上，主产于云南、贵州等地，资源丰富［1-2］。小白薇味苦、性寒，归肝、脾、胃路，具有清火利湿、解毒消痈等功效，民间常用于治疗肝炎（腮哈佐）、肾炎、痢疾等，在《中国彝药学》《云南中草药》《全国中草药汇编》等均有记载［3-5］。国内外学者先后对其同属植物卵叶娃儿藤、七层楼进行化学成分的研究，发现娃儿藤属植物主要含有生物碱［6-8］、三萜［7-9］、多酚类成分［7-9］。陈珠等［10］研究发现云南娃儿藤醇提物具有显著的抗炎活性；杨超燕等［11］研究发现光叶娃儿藤水提物具有镇痛抗炎作用；甄月英等［6］、张成刚等［12］、王远兴等［13］研究发现卵叶娃儿藤总生物碱具有显著的抗肿瘤活性。为进一步探索其药理活性的物质基础和开发利用民族药用资源，本研究对小白薇根的化学成分进行研究，从中分离鉴定了11 个单体化合物，且所有化合物均为首次从该植物中分离得到。

1 材料

AM-400 型核磁共振波谱仪（TMS 为内标，德国Bruker 公司）；Autospec-3000 型质谱仪（美国Beckman 公司）；Yanaco-24l 型显微熔点仪测定（温度未校正，日本Yanaco 公司）；柱色谱所用硅胶G（100～200、200～300 目）、薄层色谱硅胶G板（青岛海洋化工厂）；Sephadex LH-20 凝胶（瑞士Pharmacia 公司）。所用试剂为工业纯（云南汕滇药业）或分析纯（中国天津市化学试剂一厂）；核磁氘代试剂（美国CIL 公司）。

小白薇药材2018 年采自云南昆明，经云南中医药大学张洁副教授鉴定为萝摩科植物云南娃儿藤Tylophora yunnanensisSchltr 的根。

2 提取与分离

小白薇根粗粉（9.7 kg），用90%乙醇加热回流提取3 次，每次4 h，合并提取液浓缩得浸膏（2.4 kg），加入适量水混悬至悬浮液，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，回收溶剂，得石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取物。

取乙酸乙酯萃取物（389.6 g）经硅胶柱（100～200 目），以石油醚-丙酮（100∶1～5∶1），氯仿-甲醇（50∶1～1∶1）梯度洗脱，经TLC 检查合并，划分为20 个组分A-1～A-20。其中A-1 组分经硅胶柱（200～300 目），石油醚-丙酮（50∶1～1∶1），氯仿-甲醇（50∶1～10∶1）梯度洗脱，得7 个组分，组分2 经硅胶柱（200～300 目），石油醚-丙酮（50∶1）洗脱，分离得化合物9（100 mg）；其中A-3 组分经硅胶柱色谱（200～300 目），石油醚-丙酮（10∶1～1∶1），氯仿-甲醇（50∶1～10∶1）梯度洗脱，合并得6 个组分，组分3 经硅胶柱（200～300目），氯仿-甲醇（20∶1）洗脱，分离得到化合物1（200 mg）；组分5 经硅胶柱（200～300 目），石油醚-丙酮（5∶1）洗脱，Sephadex LH-20 反复纯化，分离得化合物2（23 mg）；组分6 经硅胶柱色谱（200～300 目），石油醚-丙酮（3∶1）洗脱，Sephadex LH-20 纯化（丙酮）后，再经硅胶柱（200～300 目），石油醚-乙酸乙酯（5∶1）洗脱，分离得化合物3（26 mg）。其中A-7 组分经硅胶柱（200～300 目），氯仿-甲醇（20∶1～10∶1）梯度洗脱，合并得8 个组分，组分2 经硅胶柱（200～300目），石油醚-丙酮（10∶1）洗脱，再经Sephadex LH-20（氯仿-甲醇＝3∶2）谱纯化，分离得化合物4（24 mg）；组分5 经Sephadex LH-20 纯化后，再经硅胶柱（200～300目），氯仿-甲醇（20∶1）洗脱纯化，分离得化合物6（14.2 mg）；组分7 经硅胶柱（200～300目），石油醚-乙酸乙酯（10∶1）洗脱，分离得化合物10（200 mg）。其中A-9 组分经硅胶柱（200～300 目），氯仿-甲醇（30∶1～10∶1）梯度洗脱，得5 个组分，组分2 经硅胶柱（200～300 目），石油醚-乙酸乙酯（20∶1）洗脱，再经Sephadex LH-20 纯化，分离得化合物7（25.3 mg）；组分3 经硅胶柱（200～300 目），石油醚-乙酸乙酯（10∶1）洗脱，再经Sephadex LH-20（丙酮）纯化，分离得化合物5（46 mg）；组分3 经硅胶柱（200～300 目），石油醚-丙酮（10∶1）洗脱，再经Sephadex LH-20（氯仿-甲醇＝3∶2）纯化，分离得化合物8（38 mg）。其中A-18 组分经硅胶柱（200～300 目），氯仿-甲醇（10∶1～5∶1）梯度洗脱，合并得到4 个组分，组分3 经硅胶柱（200～300 目），氯仿-甲醇（10∶1）洗脱，再经重结晶，分离得化合物11（50 mg）。

3 结构鉴定

化合物1：白色结晶（甲醇），mp 106～109 ℃；FeCl3反应呈阳性。根据EI-MSm/z：137.2［M+H］+，推测分子式C8H8O2。1H-NMR（400 MHz，CD3OD）δ：7.88（2H，d，J＝8.4 Hz，H-2，6），6.84（2H，d，J＝8.4 Hz，H-3，5），2.52（3H，s，H-2′）；13C-NMR（100 MHz，CD3OD）δ：129.7（C-1），131.2（C-2，6），163.4（C-4），115.9（C-3，5），199.0（C-1′），25.8（C-2′）。以上数据与文献［14］基本一致，故鉴定为对羟基苯乙酮。

化合物2：白色粉末（氯仿-甲醇），mp 142～144 ℃；FeCl3反应呈阳性。根据EI-MSm/z：153.2［M+H］+，推测分子式为C8H8O3。1H-NMR（400 MHz，CD3OD）δ：7.66（1H，d，J＝7.2，H-6），6.34（1H，dd，J＝7.2，2.0，H-5），6.23（1H，d，J＝2.0 Hz，H-3），2.48（3H，s，H-2′）；13C-NMR（100 MHz，CD3OD）δ：113.4（C-1），164.2（C-2），104.7（C-3），163.8（C-4），109.2（C-5），130.6（C-6），198.8（C-1′），26.1（C-2′）。以上数据与文献［15］基本一致，故鉴定为2，4-二羟基苯乙酮。

化合物3：白色粉末（甲醇），mp 112～113 ℃；FeCl3反应呈阳性。根据EI-MSm/z：153.2［M+H］+，推测分子式C8H8O3。1H-NMR（400 MHz，CD3OD）δ：7.20（1H，d，J＝2.4 Hz，H-2），6.98（1H，dd，J＝7.1，3.0 Hz，H-6），6.76（1H，d，J＝7.1 Hz，H-5），2.56（3H，s，H-2′）；13C-NMR（100 MHz，CD3OD）δ：125.9（C-1），119.6（C-2），150.6（C-3），156.5（C-4），116.4（C-5），120.7（C-6），206.0（C-1′），27.0（C-2′）。以上数据与文献［16］基本一致，故鉴定为3，4-二羟基苯乙酮。

化合物4：无色针状结晶（丙酮），mp 168～170 ℃；FeCl3反应呈阳性。根据EI-MSm/z：167.2［M+H］+，推测分子式C9H10O3。1H-NMR（400 MHz，CDCl3）δ：7.24（1H，d，J＝1.5 Hz，H-2），6.93（1H，dd，J＝8.6，1.5 Hz，H-6），6.76（1H，d，J＝8.6 Hz，H-5），3.79（3H，s，4-OCH3），2.34（3H，s，H-2′）；13C-NMR（100 MHz，CDCl3）δ：129.5（C-1），116.2（C-2），148.7（C-3），155.4（C-4），114.3（C-5），121.8（C-6），203.5（C-1′），26.8（C-2′），58.4（6-OCH3）。以上数据与文献［17］基本一致，故鉴定为3-羟基-4-甲氧基苯乙酮。

化合物5：白色粉末（氯仿），mp 190～194 ℃；Liebermann-Burchard 反应呈红色。根据EI-MSm/z：426.7［M］+，推测分子式C30H50O。1H-NMR（400 MHz，CDCl3）δ：5.32（1H，m，H-11），3.23（1H，m，3-OH），1.02，0.98，0.92，0.81，0.75，0.72，0.78，0.76（18H，s，6×CH3），0.90（3H，d，J＝4.6 Hz，H-29），0.88（3H，d，J＝4.6 Hz，H-30）；13C-NMR（100 MHz，CDCl3）δ：35.9（C-1），27.9（C-2），79.0（C-3），39.1（C-4），52.6（C-5），21.7（C-6），27.2（C-7），42.2（C-8），148.3（C-9），39.5（C-10），113.8（C-11），37.0（C-12），37.1（C-13），37.4（C-14），28.0（C-15），32.6（C-16），41.2（C-17），54.3（C-18），49.6（C-19），36.0（C-20），28.9（C-21），38.6（C-22），28.2（C-23），15.6（C-24），21.8（C-25），15.7（C-26），16.0（C-27），32.3（C-28），22.3（C-29），23.4（C-30）。以上数据与文献［18］基本一致，故鉴定为新白前醇。

化合物6：白色粉末（氯仿），mp 241～243 ℃；Liebermann-Burchard 反应呈红色。根据EI-MSm/z：424.7［M］+，推测分子式C30H48O。1H-NMR（400 MHz，CDCl3）δ：5.31（1H，m，H-12），1.21，1.08，1.06，0.92，0.78，0.76（18H，s，6×CH3），0.89（3H，d，J＝5 Hz，H-29），0.86（3H，d，J＝5 Hz，H-30）；13C-NMR（100 MHz，CDCl3）δ：36.6（C-1），34.9（C-2），217.1（C-3），47.7（C-4），53.5（C-5），22.8（C-6），26.3（C-7），42.4（C-8），146.9（C-9），39.2（C-10），115.1（C-11），36.6（C-12），37.1（C-13），37.4（C-14），28.1（C-15），32.3（C-16），41.2（C-17），54.3（C-18），49.6（C-19），36.4（C-20），29.2（C-21），38.6（C-22），25.6（C-23），22.1（C-24），21.6（C-25），16.4（C-26），15.7（C-27），32.6（C-28），22.3（C-29），23.4（C-30）。以上数据与文献［18］基本一致，故鉴定为新白前酮。

化合物7：白色粉末（甲醇），mp 155～157 ℃；Liebermann-Burchard 反应呈红色。根据EI-MSm/z：426.7［M］+，推测分子式C30H50O。1H-NMR（400 MHz，C5D5N）δ：5.13（1H，t，H-12），3.44（1H，t，J＝7.9 Hz，H-3），1.24，1.21，1.03，1.02，0.99，0.94，0.88（21H，s，7×CH3）；13CNMR（100 MHz，C5D5N）δ：39.0（C-1），28.3（C-2），79.2（C-3），38.8（C-4），55.5（C-5），18.6（C-6），35.0（C-7），40.0（C-8），47.5（C-9），37.2（C-10），26.2（C-11），122.0（C-12），145.4（C-13），42.0（C-14），28.6（C-15），27.6（C-16），32.7（C-17），47.5（C-18），47.1（C-19），31.7（C-20），35.0（C-21），32.9（C-22），28.3（C-23），15.7（C-24），15.7（C-25），17.0（C-26），26.2（C-27），27.4（C-28），35.0（C-29），23.9（C-30）。以上数据与文献［19］基本一致，故鉴定为β-香树脂醇。

化合物8：白色针状结晶（氯仿），mp 178～179 ℃；Liebermann-Burchard 反应呈红色。根据EI-MSm/z：426.7［M］+，推测分子式C30H50O。1H-NMR（400 MHz，CDCl3）δ：5.55（1H，m，H-11），3.47（1H，m，H-3 ），1.13，1.04，0.93，0.88，0.87，0.80（18H，s，6×CH3），0.88（3H，d，J＝5.6 Hz，H-29），0.89（3H，d，J＝5.6 Hz，H-30）；13C-NMR（100 MHz，C5D5N）δ：35.9（C-1），28.3（C-2），76.8（C-3），41.3（C-4），54.5（C-5），21.2（C-6），28.7（C-7），44.7（C-8），140.7（C-9），33.4（C-10），121.5（C-11），39.3（C-12），42.5（C-13），37.3（C-14），29.5（C-15），39.7（C-16），33.4（C-17），48.3（C-18），29.5（C-19），36.4（C-20），30.7（C-21），40.0（C-22），25.3（C-23），23.4（C-24），20.6（C-25），16.6（C-26），15.4（C-27），30.8（C-28），27.3（C-29），27.8（C-30）。以上数据与文献［9］基本一致，故鉴定为娃儿藤乙素。

化合物9：C18H36O2，白色粉末（丙酮）。EIMSm/z：284.5［M］+，241.4，185.3，129.2，73.1，60.6，43.0。1H-NMR（400 MHz，CDCl3）δ：2.22（2H，t，J＝7.5 Hz，H-2），1.53（2H，m，H-17），1.18（28H，brs，H-3～16），0.83（3H，t，J＝6.8 Hz，H-18）；13C-NMR（100 MHz，CDCl3）δ：177.5（C-1），34.2（C-2），24.9（C-3），29.1～29.7（C-4～15），32.4（C-16），22.7（C-17），14.1（C-18）。以上数据与文献［20］基本一致，故鉴定为硬脂酸。

化合物 10：无色针状晶体（丙酮），Liebermann-Burchard 反应先呈紫红色渐变为污绿色，mp 135～137 ℃。1H-NMR（CDCl3，400 MHz）δ：5.34（1H，d，J＝5.2 Hz），3.50（1H，m），1.15（3H，d，J＝7.2 Hz），0.94（3H，d，J＝6.5 Hz），0.86（3H，d，J＝7.5 Hz），0.83（3H，t，J＝2.5，9.5 Hz），0.82（3H，s），0.67（3H，s）；13C-NMR（CDCl3，100 MHz）δ：37.5（C-1），31.8（C-2），72.1（C-3），45.9（C-4），140.7（C-5），121.8（C-6），33.7（C-7），31.9（C-8），50.2（C-9），36.8（C-10），21.2（C-11），39.7（C-12），42.3（C-13），56.5（C-14），24.5（C-15），28.4（C-16），56.3（C-17），11.8（C-18），19.6（C-19），36.4（C-20），18.7（C-21），31.8（C-22），23.3（C-23），30.3（C-24），29.5（C-25），19.9（C-26），18.6（C-27），26.3（C-28），11.6（C-29）。以上数据与文献［21］基本一致，故鉴定为β-谷甾醇。

化合物11：白色针状结晶（丙酮），乙酸酐-浓硫酸反应先紫红色渐变为污绿色。与胡萝卜苷标准品进行TLC 对照，多种展开系统下Rf 值均一致，故鉴定为胡萝卜苷。

4 讨论

本研究从小白薇根中分离得到11 个化合物，主要是三萜和多酚类，其中化合物9 为娃儿藤属植物中已报道的化合物。研究表明，化合物1、3 具有降血脂作用［22-23］、化合物4 具有降低肺动脉高压作用［24］、化合物6～7 具有抗炎作用［25-26］、化合物8 具有抗肿瘤作用［27］。化合物6～7 与民间常用小白薇治疗肝炎、肾炎等密切相关；化合物8 与小白薇具有清火利湿、解毒消痈等有关。三萜和多酚类是彝药小白薇的活性物质基础，将进一步进行化学成分和药理活性研究，以期有助于佐证彝药小白薇的民间应用，并为彝药小白薇植物资源的深入开发利用奠定基础。