流式细胞术在临床检验中的应用研究

【摘要】：目的  探究临床检验中应用流式细胞术的作用价值。方法  在2019年1月-2019年12月中采用多次严谨性的实验来分析实验数据，确保实验的真实性、严谨性，通过资料回顾性分析，总结临床检验中流式细胞术的可行性。结果  最终实验数据显示，在临床检验中应用流式细胞术，可以有效检验淋巴细胞亚群、肿瘤标志物、HLA-B27抗原、临床微生物。结论  临床检验应用流式细胞术的价值显著，现已在多個医学领域中得到应用。

【关键词】流式细胞术;临床检验;应用价值

流式细胞术是借助流式细胞仪实现单细胞的定量分选、分析技术，该技术可以在短时间内分析数以万计的细胞，在每个细胞中获取的参数具有多样性，将其应用于临床检验中，具有方便快捷、高精度、准确性佳的优势。现阶段在临床上流式细胞术可以检测受染细胞内部、表面的病毒抗体，但是由于流失细胞术检测多是单细胞，因此在进行受染细胞检测时具有一定的局限性，多将其用于血液标本、尿液标本、灌洗液（支气管）标本的检验中[1]。在整个检验的过程中，需要开展DNA-RNA的荧光标记工作，将蛋白探针、代谢的活性呈现出来，作为细胞定量分析最为先进的技术，现已成为临床检测的重要组成部分。本文重点探究临床检验中应用流式细胞术的作用价值，以供有关人士参考，现将报道数据整理如下。

1.资料与方法

1.1一般资料

本文研究开展时间为2019年1月-2019年12月，在该时间段内收集流式细胞术的临床检验资料，依据资料收集结果发现，流式细胞术检验技术为细胞分选、细胞定量分析，其用于实验的细胞有很多，如肾上皮细胞、骨肉瘤细胞、乳腺癌细胞等。此次研究的实验进行获得了伦理委员会的批准。

1.2方法

首先，检验医师需要进行细胞培养，其涉及到的工作步骤包括铺板、细胞转染、细胞分板放置、样本上机制备、药物刺激、细胞获得、细胞处理、试剂配制等。在这个操作过程中，需要对细胞的数量加强控制，确保每瓶的细胞数在1X107之下，在细胞计数之前需要在铺板环节分化细胞，如果所计数的细胞存在高密度的情况，为了确保计数的准确性，需要用试剂来稀释细胞，使细胞倍数合理。具体在铺板时需要在培养皿中置于合适数量的细胞，然后需要晃动培养皿，避免细胞出现聚集的情况，确保其分布的均匀性，在晃动培养皿时要注意以水平为方向，并且要注意动作的轻柔性，以免培养液洒出，在完成上述工作后，将培养箱作为细胞的盛放容器，对细胞进行转染。

在细胞的转染环节，首要操作是选择适宜的染色剂，然后需要借助载体将基因质粒构建出来，当前临床常用的载体为DEF-FN，在转染之前需要检查细胞密度，只有密度值在50%-60%之间时才可以开展转染，当转染时长超过12小时，需要以1：3的比例将细胞分板，在分板时主要以细胞密度为依据，确保最终的细胞密度处于30%[2]。

在选择阳性对照物时，主要有两种，即转染质粒、药物处理细胞等，细胞铺板超过1天，开展药物刺激，培养1天后对获取的细胞进行处理，在收集培养液这一过程中，需要将适宜剂量的胰酶加入到相应规格板中，等待期消化完全后再开展胰酶的中和工作。在上述工作结束后，需要间隔4小时以上在冰箱等储存容器中取出细胞样本，之后用1XPBS进行清洗与混合，并将其置于水浴锅中进行半小时的避光处理，从而有效完成细胞样本的制备工作中。

处理分选样本时，需要在细胞贴壁处进行相关的培养，在培养环节选择细胞板规格在10cm，之后要充分消化培养酶，在细胞脱壁后，应该选择5ml左右的培养液进行中和处理，确保细胞分散的均匀性，与此同时，需要进行转染效率的测定工作，以测定结果为依据，合理选择分选模式，对细胞浓度进行合理的调节，确保上样速率的数值在每秒1000-3000个。

2.结果

本文调查结果显示，流式细胞技术应用优势体现在同时在单个细胞中获取多个参数，定量对受染细胞进行检验，准确测定样本中存在的病毒、病毒抗原，现阶段流式细胞技术常用于淋巴细胞亚群、肿瘤标志物、HLA-B27抗原、临床微生物等方面。

3.讨论

肿瘤标志物的检测主要是分析患者是否存在细胞癌变，主要是在检测时，对肿瘤细胞DNA进行染色处理，分析其含量，掌握细胞增值能力，以其为依据对治疗方案进行科学的制定。HLA—B27基因主要分析患者是否患有关节炎、脊柱炎，借助流式细胞术进行检验，需要采用CD3/HLA抗体，先将T淋巴细胞亚群测定出来，之后分析细胞表面HLA—B27的组织抗原，临床微生物检测有助于科学选取抗病菌药物，降低细胞的耐药性，主要是在检测的过程中应用荧光染料，依据发光轻度来判断。

综上所述，流式细胞术在临床检验中广泛应用于淋巴细胞亚群、肿瘤标志物、HLA-B27抗原、临床微生物等方面，有利于疾病的诊断与治疗，因此流式细胞术值得临床进一步应用与推广。

参考文献：

[1]李文波，李文华. 流式细胞术在临床检验中的应用探究[J]. 影像研究与医学应用，2018，2（19）：219-220.

[2]王师，张孟源，童能胜，张火兵. 流式细胞术在临床检验中的应用[J]. 检验医学与临床，2017，14（06）：897-898+902.

作者简介：李必生，男，1969年7月出生，四川南充人，汉族，本科，副主任技师，现为河北省医学遗传学会委员