白背天葵多酚的提取及其抗氧化活性

马景蕃 林哲民 柳盈 刘喜明 陈雪梅

摘  要：本文研究了白背天葵多酚的超臨界CO₂提取工艺及其体内外抗氧化活性，为白背天葵的开发利用提供依据。以萃取压力、萃取时间、萃取温度、CO₂流量和夹带剂浓度为单因素，以多酚提取得率为指标，采用响应面法对提取工艺条件进行优化。采用体外抗氧化活性试验分析提取物对DPPH及ABTS自由基的清除能力。体内抗氧化活性试验以D-半乳糖致衰小鼠为模型，白背天葵多酚提取物150、300、600 mg/kg连续灌胃30 d，测定其血清及肝组织中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、过氧化氢酶（CAT）活性和丙二醛（MDA）含量。结果表明，白背天葵多酚的超临界CO₂最优提取工艺为萃取压力35 MPa、萃取时间2 h、萃取温度40 ℃、CO₂流量20 L/h，多酚提取得率为5.32%。体外抗氧化试验表明，多酚对DPPH及ABTS自由基的清除率随其浓度的提高而提高。与空白组比较，衰老模型组血清及肝组织中的SOD、GSH-Px、CAT活性显著性降低，MDA含量显著性升高，白背天葵多酚提取物能显著提高衰老模型组血清及肝组织中的SOD、GSH-Px、CAT活性，并降低MDA含量。

关键词：白背天葵;超临界CO₂;自由基清除;抗氧化物酶;丙二醛（MDA）中图分类号：S647; R284.2      文献标识码：A

Extraction and Antioxidant Activity of Polyphenols from Gynura formosana Kitam

MA Jingfan^1，2， LIN Zhemin¹， LIU Ying¹， LIU Ximing³， CHEN Xuemei^1，2

1. College of Life Sciences， Longyan University， Longyan， Fujian 364012， China; 2. Fujian Key Laboratory of Preventive Veterinary Medicine and Biotechnology （Longyan University）， Longyan， Fujian 364012， China; 3. College of Communication and Design， Longyan University， Longyan， Fujian 364012， China

Abstract： The extracting technique of polyphenols fromGynura formosanaKitam by supercritical CO₂was optimized and the antioxidant activityin vitroandinvivowas studied to provide a theoretical basis for the development and comprehensive utilization ofG. formosanaKitam. Extraction pressure， extraction time， extraction temperature， CO₂ flow rate， and the consolvent concentration as single factors， the response surface method was used to optimize the extract conditions based on extraction yield. The antioxidant activity in vitrowas established by DPPH and ABTS radicals scavenging rate. The antioxidant activityin vivowas evaluated using the D-galactose aging mice model. Three different doses （150， 300， 600 mg/kg every day） of polyphenols fromG. formosanaKitam were given for 30 days.  superoxide dismutase （SOD）， glutathione peroxidase （GSH-Px）， catalase （CAT） activities and malondialdehyde （MDA） content were determined in mice serum and liver. The best conditions for extracting polyphenols fromG. formosanaKitam were extraction pressure 35 MPa， extraction time 2 h， extraction temperature 40 ℃ and CO₂flow rate 20 L/h. The yield under the optimal conditions was 5.32% DPPH and ABTS radicals scavenging rate were improved with the increasing concentration of extraction. Compared to the control group， SOD， GSH-Px and CAT activities were decreased significantly and MDA content was increased significantly in mice serum and liver in the aging model group. Compared to the aging model group， SOD， GSH-Px and CAT activities were increased significantly and MDA content was decreased significantly in mice serum and liver in extract treatment group.

Keywords： Gynura formosanaKitam; supercritical CO₂; radicals scavenging; antioxidant enzymes; malondialdehyde （MDA）

DOI： 10.3969/j.issn.1000-2561.2020.07.023

白背天葵（Gynura formosanaKitam）为菊科三七草属植物，又名白凤菜、白背三七，福建漳州地区称其为“片仔癀草”，在福建、广东、海南等地多有分布。白背天葵营养丰富，味道鲜美，是一种保健药膳和珍稀蔬菜，有“最佳保健药膳蔬菜”之称^[1]，且全草可入药。近年来，很多学者对白背天葵中的活性成分进行了研究，发现白背天葵多酚类化合物为其提取物中重要的有效成分之一，它具有广泛的生物活性，如具有抗炎^[2]、抗氧化、抗癌、防治心脑血管疾病等作用^[3]。

传统的植物多酚多采用有机溶剂等进行提取^[4]，容易导致有机溶剂的残留。作为一种新型提取分离技术，超临界CO₂萃取技术具有无溶剂残留、萃取能力强、萃取温度低、效率高等特点，正逐渐被应用到植物多酚的提取中^[4]。响应面分析法（response surface methodology，RSM）作为一种有效的加工工艺优化方法，目前已被广泛应用于提取工艺方面，其具有试验周期短，求得的回归方程精度高等优点^[5]。本文通过超临界CO₂萃取技术对白背天葵的多酚进行提取，并应用响应面分析法对工艺进行优化，同时通过体内外试验考察了白背天葵多酚对自由基的清除作用及在小鼠体内的抗氧化作用，旨在为进一步开发利用白背天葵多酚化合物提供科学依据。

1  材料与方法

1.1材料

1.1.1  材料与试剂  白背天葵，种植于龙岩学院植物房内，取其茎叶部分于60 ℃烘干后，粉碎、过60目筛，备用。

50只雄性昆明小鼠，购于上海斯莱克实验动物公司，许可证号SCXK（沪）2017-0005，体质量28～30 g，饲养温度（22±1）℃，光周期12 L∶12D，标准饲料喂养，自由饮水^[6]。

没食子酸（149-91-7），阿拉丁试剂公司;D-半乳糖（D-gal），美国Sigma公司;Vc对照品（A-4544），美国Fluka公司;超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、过氧化氢酶（CAT）、丙二醛（MDA）、总蛋白定量试剂盒，南京建成生物科技有限公司。

1.1.2  仪器与设备  UV-1800紫外-可见分光光度计，日本SHIMADZU公司;Bio-TekELX800酶标仪，美国宝特公司;HA121-50-01型超临界CO₂萃取仪，江苏南通华安超临界萃取有限公司。

1.2方法

1.2.1  白背天葵多酚的测定  参照文献[7-9]的方法测定多酚含量。根据标准曲线，依下述公式计算多酚的提取得率：

式中，C为标准曲线中对应多酚的质量浓度（mg/mL）;V为样液的体积（mL）;a为稀释倍数;W为白背天葵的质量（g）。

1.2.2  单因素试验  分别对超临界萃取压力、萃取温度、萃取时间、CO₂流量和夹带剂浓度进行单因素试验，以白背天葵多酚的提取得率为指标，确定各因素的最佳选择范围。

1.2.3  超临界CO₂萃取工艺优化  在单因素的基础上，运用Design Expert 8.0.6软件进行响应面优化试验，选择萃取压力（X₁）、萃取时间（X₂）、萃取温度（X₃）、CO₂流量（X₄）4因素作为自变量，以白背天葵多酚的提取得率为响应值，设计4因素3水平的响应面试验。

1.2.4  体外抗氧化指标测定  参照文献[10]的方法测定白背天葵多酚清除DPPH及ABTS自由基的活性，以抗坏血酸为对照。

1.2.5  体内抗氧化指标测定  试验小鼠随机分为5组，每组10只，即空白组、衰老模型组、多酚提取物低、中、高剂量组（每日给药剂量分别为150、300、600 mg/kg的多酚提取物），空白组与模型组灌胃等量生理盐水;衰老组与提取物各组每日皮下注射0.2 mg/g的D-半乳糖（10 μL/g），空白組则每日皮下注射等量的生理盐水。连续给药30 d，于试验给药末次，禁食15 h，摘眼球采血，后处死小鼠取出肝脏匀浆。按各试剂盒说明书操作，测血清及肝组织中的超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、过氧化氢酶（CAT）活性和丙二醛（MDA）含量。

1.3数据处理

每项试验至少重复3次，试验结果以平均值±标准差表示，采用SPSS 22.0软件进行单因素方差分析，采用Design Expert 8.0.6软件进行数据分析，采用Origin 8.0软件完成绘图。

2  结果与分析

2.1单因素试验

2.1.1  萃取压力的选择  在萃取温度为40 ℃、萃取时间为1.5 h、CO₂流量为15 L/h和夹带剂浓度为90%乙醇的条件下，以白背天葵多酚提取得率为指标，考察当萃取压力为20、25、30、35、40、45 MPa时对白背天葵多酚提取得率的影响。由图1可知，当萃取压力在20～35 MPa之间时，多酚提取得率随着压力的升高而升高;萃取压力超过35 MPa后，提取得率稍有下降。其原因可能是压力增大，使得超临界CO₂流体的密度增加，从而增加了溶质与溶剂之间的传质效率，使得超临界CO₂流体的溶解能力增强，萃取更充分。但当继续增大压力，超临界CO₂流体的黏度增加，减小了溶质与溶剂之间的传质效率，多酚溶出困难，提取得率下降。此外压力增大也不利于安全^[11]，因此选择萃取压力范围为30～40 MPa。

2.1.2  萃取时间的选择  在萃取温度为40 ℃、萃取压力为30 MPa、CO₂流量为15 L/h和夹带剂浓度为90%乙醇的条件下，以白背天葵多酚提取得率为指标，考察当萃取时间为1、1.5、2、2.5、3、3.5 h时对白背天葵多酚提取得率的影响。由图2可知，随着萃取时间的延长，多酚提取得率增加，但当大于2 h后，提取得率增加缓慢。其原因为随着时间的延长，超临界CO₂流体与溶质接触越来越充分，提取得率增加，但当达到一定时间后，多酚在超临界CO₂流体中溶出达到平衡，提取得率增加缓慢，且会增加生产成本^[12]。因此选择萃取时间范围为1.5～2.5 h。

2.1.3  萃取温度的选择  在萃取时间为1.5 h、萃取压力为30 MPa、CO₂流量为15 L/h和夹带剂浓度为90%乙醇的条件下，以白背天葵多酚提取得率为指标，考察当萃取温度为 30、35、40、45、50、55 ℃时对白背天葵多酚提取得率的影响。由图3可知，随着温度的升高，多酚提取得率呈现先升高后下降的趋势。其原因为温度升高增加了溶质的扩散系数，使得溶质更易溶出，提取得率升高，但温度升高又降低了超临界CO₂流体的密度，导致其溶解能力降低，提取得率下降^[13]。因此选择萃取温度范围为35～45 ℃。

2.1.4  CO₂流量的选择  在萃取温度为40 ℃、萃取时间为1.5 h、萃取压力为30 MPa和夹带剂浓度为90%乙醇的条件下，以白背天葵多酚提取得率为指标，考察当CO₂流量为5、10、15、20、25、30 L/h时，对白背天葵多酚提取得率的影响。由图4可知，随着CO₂流量的增加，多酚提取得率呈现先升高后下降的趋势。其原因为增加了CO₂流量，即增加了溶剂与溶质的接触面积，从而促进了超临界CO₂流体的溶解能力，提高了提取得率，但继续增大流量使得流体与溶质接触不充分，提取得率下降，同时增加了生产成本^[14]。因此选择CO₂流量范围为15～25 L/h。

2.1.5  夹带剂浓度的选择  在萃取温度为40 ℃、萃取时间为1.5 h、萃取压力为30 MPa和CO₂流量为15 L/h的条件下，以白背天葵多酚提取得率为指标，考察当夹带剂浓度为75%、80%、85%、90%、95%、100%时，对白背天葵多酚提取得率的影响。由图5可知，随着夹带剂浓度的增加，多酚提取得率逐渐增加，当浓度达到100%（无水乙醇）时，提取得率达到最大值。其原因可能为

夹带剂含水量越大，溶质越易吸水膨胀，从而影响超临界CO₂流体对溶质的渗入，影响提取得率^[15]。因此选择无水乙醇作为夹带剂。

2.2响应面试验

2.2.1  试验设计与结果  进行4因素3水平的Box-Benhnken 中心组合试验设计，考察萃取压力（X₁）、萃取時间（X₂）、萃取温度（X₃）和CO₂流量（X₄）对白背天葵多酚提取得率（Y）的影响，试验设计及结果见表1。

对表1数据进行多元回归拟合分析，得到的回归方程为

Y=5.31+0.052 X₁+0.12X₂+0.023X₃+0.082X₄- 0.041 X₁X₂-0.048X₁X₃-0.015X₁X₄+0.0073X₂X₃+ 0.070X₂X₄+0.089X₃X₄-0.38X₁²-0.39X₂²- 0.24X₃²- 0.54X₄²

对回归方程进行显著性检验分析，结果如表2所示。结果显示，该模型极显著（P<0.01），相关系数R²=0.9983，校正决定系数R_adj=0.9965，失拟

项不显著（P=0.1646>0.05）。说明该回归方程拟合度较好，模型试验误差小，因此，可以用该方程对白背天葵多酚提取得率进行准确预测和分析。模型的X₁、X₂、X₄、X₂X₄、X₃X₄、X₁²、X₂²、X₃²、X₄²为极显著（P<0.01），X_3、X₁X₂、X₁X₃为显著（P< 0.05）。通过F值可知，各单因素对白背天葵多酚提取得率影响的大小依次为X₂>X₄>X₁>X₃;交互项对提取得率影响的大小依次为X₃X₄>X₂X₄>X₁X₃>X₁X₂>X₁X₄>X₂X₃。

注：*表示差异显著（P<0.05）;**表示差异极显著（P<0.01）。

Note： * means significant difference （P<0.05）; ** means extremely significant difference （P<0.01）.

2.2.2  響应面分析  由图6可知，萃取温度和CO₂流量、萃取时间和CO₂流量交互作用最为显著，萃取压力和萃取温度、萃取压力和萃取时间次之，萃取压力和CO₂流量、萃取时间和萃取温度不显著，这与模型中F值分析结果相一致。

2.2.3  验证试验  通过响应面回归方程，得到白背天葵多酚提取的最佳条件为萃取压力35.25 MPa、萃取时间2.10 h、萃取温度40.27 ℃、CO₂流量20.29 L/h，在此条件下模型预测白背天葵多酚提取得率为5.3238%。为方便实际操作，修正后的条件为萃取压力35 MPa、萃取时间2 h、萃取温度40 ℃、CO₂流量20 L/h，此条件下多酚提取得率为5.32%，与理论值接近，RSD为0.45%。证明该回归模型是可靠的。

2.3白背天葵多酚的抗氧化活性

2.3.1  白背天葵多酚对DPPH自由基的清除作用  如图7所示，维生素C和白背天葵多酚对DPPH 自由基的清除均呈现剂量依赖性，其清除率随着

浓度的增加而增加，当白背天葵多酚的浓度达到200 μg/mL时，对DPPH自由基的清除率达到最大，为72.17%。

2.3.2  白背天葵多酚对ABTS自由基的清除作用  白背天葵多酚对ABTS自由基的清除效果见图8，与清除DPPH自由基相似，其清除ABTS自由基的作用也随着浓度的增加而增加，当白背天葵多酚的浓度达到200 μg/mL时，对ABTS自由基的清除率达到最大，为80.64%。

2.3.3  白背天葵多酚的体内抗氧化结果  如表3及表4所示，模型组小鼠血清的SOD、CAT活性及小鼠肝组织中SOD、GSH-Px、CAT活性及MDA含量与空白组相比具有极显著性差异，模型组小

鼠血清的GSH-Px活性及MDA含量与空白组相比具有显著性差异，说明小鼠造模成功^[16]。当灌胃低剂量（150 mg/kg）的白背天葵多酚时，小鼠血清的SOD活性与模型组相比具有极显著性差异，GSH-Px活性及MDA含量与模型组相比具有显著性差异，但CAT活性无显著性差异;当灌胃高剂量（600 mg/kg）的白背天葵多酚时，小鼠血清的SOD、GSH-Px、CAT活性及MDA含量与模型组相比均具有极显著性差异（表3）;同样，当灌胃高剂量的白背天葵多酚时，小鼠肝组织的SOD、GSH-Px、CAT活性及MDA含量与模型组相比也具有极显著性差异（表4）。表明白背天葵多酚提取物具有显著提高体内抗氧化酶活性的作用^[17]。

注：^*表示与空白组比较差异显著（P<0.05）;^**表示与空白组比较差异极显著（P<0.01）;^#表示与模型组比较差异显著（P<0.05）;^##表示与模型组比较差异极显著（P<0.01）

Note：^*means significant difference （P<0.05） vs control;^**means extremely significant difference （P<0.01） vs control;^#means significant difference （P<0.05） vs model;^##means extremely significant difference （P<0.01） vs model.

注：^*表示与空白组比较差异显著（P<0.05）;^**表示与空白组比较差异极显著（P<0.01）;^#表示与模型组比较差异显著（P<0.05）;^##表示与模型组比较差异极显著（P<0.01）

Note：^*means significant difference （P<0.05） vs control;^**means extremely significant difference （P<0.01） vs control.^#means significant difference （P<0.05 vs model）;^##means extremely significant difference （P<0.01） vs model.

3  討论

本研究采用超临界CO₂萃取技术，通过响应面法进行白背天葵多酚的提取工艺优化，并确定了最佳提取工艺，为进一步综合开发利用白背天葵奠定了基础。王萍等^[18]采用有机溶剂法对陕产枇杷核多酚进行提取，其平均提取得率为1.527%;高林晓等^[19]采用超声波法对刺三加根多酚进行提取，其提取得率为1.34%。本研究采

用超临界CO₂法提取的多酚提取得率为5.32%，显著高于有机溶剂法和超声波法，可能原因为CO₂流体的扩散系数介于液体和气体之间，所以使得溶质与溶剂之间有较好的传质效率，提取得更加充分。另外，使用超临界CO₂提取，既能保证提取过程中多酚的活性不受影响，还易于除去过多的提取溶剂，不会对多酚提取物产生溶剂污染，最大程度地保存了多酚的生物活性，为评价其活性奠定了良好的基础。

过量的自由基易对核酸、蛋白质等机体内重要分子造成损伤。很多研究表明植物多酚作为一种天然抗氧化剂，能够清除自由基，减少其对人体的伤害。邓俊琳等^[20]研究发现，余甘子多酚对ABTS自由基、DPPH自由基具有较强的清除作用。魏园园等^[21]通过体外试验证实，橡子果仁纯多酚清除DPPH自由基、ABTS自由基的能力与Vc相当。本研究结果表明白背天葵多酚对DPPH自由基、ABTS自由基均具有较好的清除效果，且呈剂量依赖效应。

MDA的含量常用来表示细胞的受损程度及机体内脂质过氧化水平，其可与脂质进行交联反应，损伤细胞DNA的结构。杨宽等^[22]研究表明，茶多酚能降低高脂血症大鼠肝组织中的MDA含量，减少脂质过氧化对肝脏的损害。本研究结果发现，白背天葵多酚能够显著减少大鼠血清与肝组织中MDA的生成量，显著降低脂质过氧化物的產生。

机体主要通过SOD、GSH-Px及CAT等抗氧化酶来抵抗过量自由基对其造成的伤害，其中SOD可清除机体内的超氧阴离子自由基;GSH-Px可使还原型谷胱甘肽转化为氧化型谷胱甘肽，使有毒的自由基转化为无毒的羟基;CAT能够分解H₂O₂，从而可有效地保护机体发生过氧化反应。王飞霞等^[23]研究表明，豆芽多酚可提高果蝇体内SOD及GSH-Px活力。本研究中体内抗氧化结果表明，白背天葵多酚能增加小鼠血清和肝脏组织的SOD、GSH-Px、CAT活性。

综上所述，白背天葵多酚可提高机体内的抗氧化酶活性，清除自由基，最终增强机体的抗氧化功能^[24]。白背天葵多酚是天然植物提取物，因此将其开发成天然的自由基清除剂或抗氧化剂对于保护机体健康、预防疾病均具有重要意义。今后我们将对白背天葵多酚的理化性质、结构组成和活性机理进行深入研究。

参考文献

[1] 林燕燕， 罗秀针， 曹林枝， 等. 超声下白凤菜总黄酮的优化提取及其体外抑菌活性研究[J]. 右江民族医学院学报， 2017， 39（2）： 90-93.

[2] 马景蕃， 刘喜明， 陈晶晶， 等. 白背天葵不同提取部位抗炎活性及机制研究[J]. 安徽农业大学学报， 2018， 45（2）： 309-315.

[3] 臧  涛， 向  东. 响应面优化蓝药睡莲总酚水提工艺的研究[J]. 热带作物学报， 2017， 38（12）： 2360-2365.

[4] 宗建军， 廖传华. 超临界二氧化碳萃取葡萄籽油工艺优化[J]. 化工进展， 2018， 37（2）： 485-491.

[5] Kaur G， Kumar V， Goyal A，et al. Optimization of nutritional beverage developed from radish， sugarcane and herbal extract using response surface methodology[J]. Nutrition and Food Science， 2018， 48（10）： 733-743.

• 吴朝波， 段瑞军， 王  蕾， 等. 对11种热带滨海植物Cd富集能力的初步评价[J]. 海南大学学报（自然科学版）， 2015， 33（3）： 234-240. 
• Conde T， Mussatto S I. Isolation of polyphenols from spent coffee grounds and silverskin by mild hydrothermal pretreatment[J]. Preparative Biochemistry and Biotech nology ， 2016， 46（4）： 406- 409.
• Goszcz K， Duthie G G， Stewart D， et al. Bioactive polyphenols and cardiovascular disease： chemical antagonists， pharmacological agents or xenobiotics that drive an adaptive response？[J]. British Journal of Pharmacology， 2017， 174（11）： 1209-1225.
• Zhou X， Xin Q， Wang Y， et al. Total flavonoids of astragalus plays a cardioprotective role in viral myocarditis[J]. Acta Cardiologica Sinica， 2016， 32（1）： 81-88.
• Mare?ek V， Miky?ka A， Hampel D， et al. ABTS and DPPH methods as a tool for studying antioxidant capacity of spring barley and malt[J]. Journal of Cereal Science， 2017， 73： 40-45.
• 张  杨， 刘  闯. 响应面优化超临界法萃取绿豆皮黄酮工艺[J]. 食品研究与开发， 2017， 38（22）： 56-60.
• Anguebes F， Abatal M， Bassam A， et al. Esteri?cation optimization of crude African palm olein using response surface methodology and heterogeneous acid catalysis[J]. Energies， 2018， 11（1）： 157.
• Bai X L， Yue T L， Yuan Y H， et al. Optimization of microwave‐assisted extraction of polyphenols from apple pomace using response surface methodology and HPLC analysis[J]. Journal of Separation Science， 2010， 33（23-24）： 3751-3758.
• Zheng X， Wang X， Lan Y， et al. Application of response surface methodology to optimize microwave-assisted extraction of silymarin from milk thistle seeds[J]. Separation and Purification Technology， 2009， 70（1）： 34-40.
• Huang W， Li Z， Niu H， et al. Optimization of operating parameters for supercritical carbon dioxide extraction of lycopene by response surface methodology[J]. Journal of Food Engineering， 2008， 89（3）： 298-302. 

[16] Zhao F， Li X H. Ultrasonic-assisted enzymatic extraction of silymarin from theSilybum marianum seed shell and evaluation of its antioxidant activity in vitro[J]. EXCLI Journal， 2015， 14： 861-874.

[17] Liu C H， Wang C H， Xu Z L，et al. Isolation， chemical characterization and antioxidant activities of two polysaccharides from the gel and the skin of Aloe barbadensisMiller irrigated with sea water[J]. Process Biochemistry， 2007， 42（6）： 961-970.

[18] 王  萍， 賴普辉， 李  辉， 等. 响应面法优化陕产枇杷核多酚的提取及体外抗氧化活性研究[J]. 化学与生物工程， 2019， 36（7）： 22-28.

[19] 高林晓， 郭  蒙， 郭茂鸿， 等. 正交试验设计优化刺三加根中总多酚的提取工艺研究[J]. 食品研究与开发， 2019， 40（13）： 57-62.

[20] 邓俊琳， 李晚谊， 于丽娟， 等. 干燥温度对醇提余甘子多酚含量及其抗氧化活性的影响[J]. 食品工业科技， 2019， 40（24）： 57-61.

[21] 魏园园， 刘  琪， 梁宗瑶， 等. 栓皮栎橡子果仁多酚抗氧化与抑菌活性研究[J]. 食品工业科技， 2019， 40（20）： 42-48.

[22] 杨  宽， 钱卫东， 秦  蓓. 茶多酚对高脂血症大鼠血脂代谢和肝组织MDA、T-SOD含量的影响[J]. 中国油脂， 2019， 44（1）： 70-73， 96.

[23] 王飞霞， 杨晓华， 张华峰， 等. 3种豆芽中异黄酮、多酚的体外抗氧化活性及其对果蝇SOD、GSH-Px活力的影响[J]. 中国食品学报， 2018， 18（11）： 57-64.

[24] Ma J， Guo C， Pan Y，et al. Antioxidant and anti-inflammatory activities of ethyl acetate extract ofGynura formosana（Kitam） leaves[J]. Experimental and Therapeutic Medicine， 2017， 14（3）： 2303-2309.