山竹壳色素的不同提取方法比较

2020-09-30 07:54徐洪宇赵烊藏梁朱丽荣
食品工业 2020年9期
关键词:山竹酶法色素

徐洪宇,赵烊,藏梁,朱丽荣*

1. 吉林化工学院生物与食品工程学院(吉林 132022);2. 重庆市第九人民医院药剂科(重庆 400700)

山竹(Garcinia Mangostana)为藤黄科(Guttiferae)藤黄属(Garcinia),是热带常绿乔木,别名莽吉柿、凤果,莽吉柿、倒捻子、山竺、山竹子[1]。山竹果实(Mangosteen)为热带五大名果之一,具有解热清凉、化解脂肪、润肤降火等功效[2]。山竹可食用部分仅占鲜重的30%左右,食用山竹果肉后,剩余的山竹壳,大多作为废弃物处理,既浪费资源又污染环境。

近年来关于山竹壳的研究,主要集中在含量较高的山竹壳色素的提取、稳定性及应用上。山竹壳色素是一种醇溶性色素,耐日光及耐热性强,适宜于偏酸性、中性和弱碱性条件下使用,有较强的耐氧化性和一定耐热性,各种金属离子对其影响较小[3-6]。山竹壳色素具有较强的抗氧化[7-8]及抑菌活性[3,8],可将其应用在饮料和白酒的着色上[9]及锦纶[10]、真丝[11]、羊毛[12]和棉织物[13-14]的染色上。山竹壳色素的提取工艺优化方面,主要采用微波辅助法提取[15-16]和超声波辅助法提取[17-18],关于研究不同提取方法对山竹壳色素提取效果,研究报道较少。

此次试验选取溶剂浸提法、超声波辅助法、微波辅助法和复合酶法共4种提取方法,在前期单因素的基础上,利用正交试验优化各提取工艺,比较并筛选出提取效果最好的方法,为山竹壳色素在食品、医药保健品、纺织等领域的开发利用提供理论基础。

1 试验方法

1.1 材料与仪器

山竹壳(山竹壳洗净,烘箱烘干,粉碎机粉碎,80目过筛备用)。无水乙醇(天津市大茂化学试剂厂);盐酸、植物复合酶(北京盛世嘉明科技开发有限公司);磷酸氢二钠(南京化学试剂股份有限公司);磷酸二氢钠(南京化学试剂股份有限公司)。

FA1004A分析天平(广州沪瑞明仪器有限公司);HH-S8A恒温水浴锅(上海仪器表有限责任公司);PHS-W系列pH计(上海理达仪器厂);KQ3200DE型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);美的微波炉(佛山美的微波电器制造有限公司);旋转蒸发器:RE-52B型(上海亚荣生化仪器厂);UNICUV-2102PCS紫外可见分光光度计(上海谱振生物科技有限公司)。

1.2 色素提取工艺

山竹壳粉→70%乙醇提取→过滤→稀释滤液→在478 nm下测吸光度

1.3 溶液浸提法提取的正交试验设计

采用L9(33)正交试验,在前期单因素试验的基础上,考察提取温度、提取时间、料液比对山竹壳色素提取效果的影响因素,试验设计的因素和水平见表1。

表1 溶液浸提法提取试验的因素及水平

1.4 超声波辅助法提取的正交试验设计

采用L9(33)正交试验,在前期单因素试验的基础上,考察提取温度、提取时间、料液比对山竹壳色素提取效果的影响因素,试验设计的因素和水平见表2。

表2 超声波辅助法提取试验的因素及水平

1.5 微波辅助法提取的正交试验设计

用L9(33)正交试验,在前期单因素试验的基础上,考察提取功率、提取时间、料液比对山竹壳色素提取效果的影响因素,试验设计的因素和水平见表3。

表3 微波辅助法提取试验的因素及水平

1.6 复合酶辅助浸提法提取的正交试验设计

用L9(33)正交试验,在前期单因素试验的基础上,考察提取温度、提取时间、料液比对山竹壳色素提取效果的影响因素,试验设计的因素和水平见表4。

表4 复合酶法提取试验的因素及水平

2 结果与分析

2.1 溶液浸提法提取的正交试验结果

溶液浸提法是利用不同物质在溶剂中的溶解度不同,从而实现物质分离的一种操作,属于萃取的一种。根据所提取物的组分的不同,利用相似相溶的原理,分离得到山竹壳色素。在单因素的基础上,通过正交试验设计对工艺进行优化,结果见表5和表6。由表5可知,溶液浸提法提取山竹壳色素的最优条件为A2B2C2;通过极差R值大小得出,对山竹壳色素提取效果影响最大的因素为A(提取温度),其次是B(提取时间),最后是C(料液比)。表6中,浸提温度对浸提效果的影响达到显著水平(p<0.05),料液比和浸提时间对浸提效果的影响不显著(p>0.05)。因此,最优提取工艺条件为提取温度70 ℃,提取时间70 min,料液比1∶30(g/mL)。

2.2 超声波辅助法提取的正交试验结果

超声波辅助法提取主要是利用超声波振动与媒质之间引起热作用、机械作用和空化作用,从而促进细胞溶胀、强化传质速率、提高细胞壁的通透性,甚至在瞬间造成细胞壁及整个生物体破裂[19],从而促进提取成分的溶出,提高提取效率。超声波辅助法提取的正交试验数据处理结果见表7和表8。由表7可知,提取山竹壳色素的最优条件为A2B2C3;3个因素的极差分析得到RA>RB>RC,即对山竹壳色素提取效果影响最大的因素为A(提取温度),其次是B(提取时间),最后是C(料液比)。由表8可知,提取温度和提取时间对提取效果的影响达到显著水平(p<0.05),料液比的影响不显著(p>0.05)。最优提取工艺条件为提取温度60 ℃,提取时间50 min,料液比1∶40(g/mL)。

表5 溶液浸提法正交试验设计与结果

表6 溶液浸提法正交试验方差分析

表7 超声波辅助法正交试验设计与结果

表8 超声波辅助法正交试验方差分析

2.3 微波辅助法提取的正交试验结果

微波辅助法主要利用热效应破壁的原理,提高提取效率。采用微波辅助法提取山竹壳色素,结果见表9和表10。表9中,由极差分析可知,各因素对山竹色素提取效果的影响为B(提取时间)>A(提取功率)>C(料液比)。由表10可知,提取温度和提取功率对提取效果的影响达到显著水平(p<0.05),料液比对浸提效果的影响不显著(p>0.05)。微波辅助法提取山竹壳色素的最优条件为A2B2C3,即提取功率900 W,提取时间40 s,料液比1∶40(g/mL)。

表9 微波辅助法正交试验设计与结果

表10 微波辅助法正交试验方差分析

2.4 复合酶法提取的正交试验结果

植物复合酶是由纤维素酶、半纤维素酶、淀粉酶等组成的混合酶系,可使细胞壁在酶的作用下软化、膨胀和崩溃等,进而改变细胞壁的通透性,从而提高目标物质的提取效率。试验采用复合酶法,对山竹壳色素进行提取,通过正交试验对工艺进行优化,结果见表11和表12。由表11中极差分析可知,对竹壳色素提取效果影响最大的因素为A(提取温度),其次是B(提取时间),C(料液比)影响最小。由表12可知,提取温度对提取效果的影响达到显著水平(p<0.05),料液比和提取时间对提取效果的影响不显著(p>0.05)。植物复合酶法提取山竹壳色素的最优条件为A2B3C3,即提取温度30 ℃,提取时间100 min,料液比1∶35(g/mL)。

2.5 最佳工艺条件的验证

分别选择上述溶剂浸提法、超声波辅助法、微波辅助法及复合酶法共4种方法,对山竹壳色素提取的最优条件进行3次验证,结果见表13。4种不同提取方法存在显著性差异(p<0.05),其中超声波辅助法提取的山竹壳色素吸光度最大,为0.811。

表11 复合酶法正交试验设计与结果

表12 复合酶法正交试验方差分析

表13 山竹壳色素在最佳工艺条件下的提取结果

3 结论

此次试验选择溶剂浸提法、超声波辅助法、微波辅助法及复合酶法共4种方法,对山竹壳色素提取效果进行研究。在前期单因素的基础上,利用正交试验设计分别得到了每种提取方法的最优提取条件,得到以下结果:

1) 溶剂浸提法的最佳提取工艺为提取温度70 ℃,提取时间70 min,料液比1∶35(g/mL)。

2) 超声波辅助法的最佳提取工艺为提取温度60℃,提取时间50 min,料液比1∶40(g/mL)。

3) 微波辅助法的最佳提取工艺为提取功率900 W,提取时间40 s,料液比1∶40(g/mL)。

4) 复合酶法的最佳提取工艺为提取温度30 ℃,提取时间100 min,料液比1∶40(g/mL)。

5) 4种提取方法中,超声波辅助法提取效果最好,其次为微波辅助法,溶剂浸提法提取效果最差。

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