药物体外抗轮状病毒方法研究进展

陈建雯 张鹤 刘韬 刘超

摘  要：目的  通过研究筛选近5年以来治疗小儿秋季腹泻体外有效的中药制剂和合成药物，总结治疗小儿秋季腹泻药物体外药效评价方法和药物，对临床治疗进行帮助指导。方法  查阅大量文献，对治疗小儿秋季腹泻的各种中药制剂和合成药物、轮状病毒疫苗体外药效评价方法进行归纳总结。结果  筛选汇总治疗小儿秋季腹泻药物体外药效评价更有效的方法。结论  为临床快速治疗小儿秋季腹泻、抑制轮状病毒感染提供有力参考依据。

关键词：秋季腹泻  轮状病毒  体外试验  中药制剂

中图分类号：R373           文献标识码：A 文章编号：1672-3791（2020）08（b）-0195-03

Research Progress of Drug Anti Rotavirus Methods in Vitro

CHEN Jianwen  ZHANG He  LIU Tao*  LIU Chao

（Honghe Health Vocational College， Mengzi， Yunnan Province， 661199 China）

Abstract： Purpose Through the research and selection of effective Chinese medicine and synthetic drugs in vitro for the treatment of children's autumn diarrhea in recent 5 years， the evaluation methods and drugs in vitro for the treatment of children's autumn diarrhea were summarized to help guide the clinical treatment. Method A large number of literatures were consulted to summarize the evaluation methods of various traditional Chinese medicine preparations and synthetic drugs for the treatment of children's autumn diarrhea in vitro. Result To select and summarize the more effective methods for the evaluation of the in vitro efficacy of the drugs in the treatment of children's autumn diarrhea. Conclusion To provide a strong reference for clinical rapid treatment of autumn diarrhea in children.

Key Words： Autumn diarrhea; Rotavirus; In vitro test; Traditional chinese medicine preparation

轮状病毒（Rotavirus，RV）是澳大利亚学者Bishop和他的同事1973年利用电镜法发现的，在电镜下呈车轮状，故叫轮状病毒，人轮状病毒（Human Ratavirus，HRV）是秋冬季嬰幼儿腹泻的主要病原体，每年全世界因RV感染而死亡的超过100万人，是婴幼儿急诊和死亡的第二大疾病，也是引起全世界范围内严重儿童急性腹泻的病原体之一，主要易感人群为6～14月龄的婴幼儿，是WHO和我国重点防治的疾病之一。由RV引起的腹泻占我国腹泻病的50%。目前，对RV肠炎尚无特异的治疗药物，主要是对症治疗。中药对腹泻的治疗有一定优势，RV属呼肠孤病毒科，其核心部分由11个基因组成的线形双股，核衣壳为双层多肽，根据内层壳衣中Vp6蛋白上抗原的差异，RV被分为A、B、C、D、E、F、G这7组，RV有很强的宿主局限性，感染人类的主要为A、B组。病毒感染的关键是病毒与靶细胞的结合，章蔷等人[1]研究表明在目前药物的研发过程中，研究影响因素试验是一项非常重要的任务，通过研究影响因素试验，有效地对药物性质与稳定性进行分析，在药物研发对确保药物治疗效果得到有效的保证。因此，该文通过对近5年国内外有关药物体外抗轮状病毒方法及效果进行研究，以期为临床治疗小儿秋季腹泻提供更有力的依据，对今后研究者提供有力的借鉴。

1  中药及其制剂体外抗轮状病毒研究

1.1 葛根芩连体外抗轮状病毒作用实验研究

王晓妍等人[2]研究葛根芩连汤含药血清体外抑制轮状病毒（RV）的作用及其机制。观察CPE及MTT法，从抑制病毒生物合成、直接灭活病毒、抗病毒吸附3个方面，测定葛根芩连汤含药血清对RV感染MA104细胞病变的作用。结果表明葛根芩连汤主要通过直接灭活轮状病毒以及抑制轮状病毒生物合成而发挥其抗病毒作用。杨蒙蒙等人[3]研究葛根芩连汤中有效部位总生物碱类体外干预对人轮状病毒（rotavirus，RV）的药理作用，结果表明葛根芩连汤中有效部位总生物碱类体外干预对人轮状病毒（rotavirus，RV）的药理作用。

1.2 秋泻灵合剂体外抗轮状病毒作用实验研究

李金松等人[4]研究秋泻灵和儿泻停颗粒体外传代细胞上抗轮状病毒的作用，结果表明秋泻灵和儿泻停在适宜浓度时对轮状病毒SA11有灭活作用，二者对阻止SA11轮状病毒入侵MA104细胞显示了一定的保护作用。

1.3 白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ体内外抗轮状病毒作用研究

周若夏等人[5]研究白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ对细胞的毒性及对RV生物合成、吸附的抑制作用，对RV的直接灭活作用，以利巴韦林为阳性对照药。结果显示白术内酯Ⅲ具有直接灭活RV的作用，TI值为8;体内研究中白术内酯Ⅲ中剂量组抗RV效果最佳。白术内酯Ⅲ在体内外均具有一定的抗RV作用，主要通过体外直接灭活RV而发挥作用。

1.4 五加减正气散含药血清体外抗轮状病毒作用研究

王伟等人[6]研究五加减正气散大鼠含药血清体外抗轮状病毒（RV）的作用。结果表明五加减正气散含药血清具有显著的抗病毒作用，其机制可能是抑制病毒进入细胞后的病毒生物合成作用。

1.5 参苓白术散含药血清体外抗轮状病毒的作用研究

王晓妍等人[7]研究参苓白术散含药血清体外抑制轮状病毒（RV）的作用及其机制。结果表明参苓白术散在体外有一定的抗轮状病毒作用，主要通过直接灭活轮状病毒以及抑制轮状病毒生物合成而发挥作用。

1.6 茜草藤提取物体外抗轮状病毒研究及新剂型应用研究

孙源源等人[8]研究表明茜草藤水提物可体外抑制轮状病毒在MA-104细胞中的增殖，轮状病毒可以引起轻微的细胞凋亡，茜草藤水提物可以促进病毒感染细胞的凋亡，终止病毒在其宿主的增殖。

2  合成药物体外抗轮状病毒研究

2.1 Jn219体外抗轮状病毒作用实验研究

有研究显示Jn219药物可以杀灭RV病毒并建立了乳鼠轮状病毒感染疗效模型。有研究显示抗轮状病毒（RV）LLR株G10血清型特异性单克隆抗体，作为单抗，可以用于G10血清型RV的分型检测或LLR毒株的鉴別。

2.2 lactdherin体外抗轮状病毒的作用研究

lactadherin是母乳中含有的一种脂肪小球膜表面糖蛋白lactadherin。有学者研究了lactadherin对RV感染性腹泻的体外实验，研究结果显示母乳能抑制RV感染MA-104细胞（绿猴肾细胞）。Lactadherin可以结合4种主要的人类RV株继而抑制它们感染宿主细胞。乳汁中的lactadherin可与轮状病毒交联，并且竞争性抑制轮状病毒结合到宿主小肠黏膜，对轮状病毒感染性腹泻可有预防和减轻病情的作用，lactadherin还可调节免疫系统、改变免疫细胞活性的作用，有利于轮状病毒感染性腹泻的预防和治疗。

2.3 止泻退热片体外抗轮状病毒的作用研究

有学者研究止泻退热片体外干预对人轮状病毒A组G3型 （RV709）株的药理作用。研究结果显示止泻退热片主要抑制人RV709株在MA104细胞内的生物合成发挥抗轮状病毒作用。

2.4 抗轮状病毒鸡卵黄IgY联合葡萄糖酸锌治疗婴幼儿轮状病毒性肠炎的临床疗效作用研究

姜琳等人[9]研究抗轮状病毒鸡卵黄IgY及葡萄糖酸锌颗粒。结果显示抗轮状病毒鸡卵黄IgY联合葡萄糖酸锌治疗轮状病毒性肠炎疗效确切，优于常规基础治疗，可有效改善患儿症状，促进肠道功能恢复。

2.5 P-VP8*IgY抗轮状病毒的体内保护作用研究

郭伦爱[10]研究利用轮状病毒的外壳刺突样蛋白VP8*基因片段插入到诺如病毒P颗粒的表面环形区域loop2，在大肠杆菌中稳定表达出嵌合VP8*的P-VP8*蛋白，经免疫来航鸡制备纯化出特异性P-VP8*IgY，结果表明P-VP8*lgY是一种有前景的抗诺如和轮状病毒的双价抗体药物制剂。未来有很好的研究前景。

3  展望

通过研究中药及其制剂以及合成药物、疫苗等对体外轮状病毒抑制作用，综合分析了近5年来中药及其制剂，化学合成药物、轮状病毒疫苗对小儿轮状病毒的体外抗病毒作用，发现他们各有优势，各有所长。通过研究中药及其制剂和合成药物均有很好的体外抗轮状病毒研究作用，对临床治疗小儿秋季腹泻具有指导性意义。

参考文献

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[2] 王晓妍，王伟，孙蓉，等.葛根芩连汤含药血清体外抗轮状病毒的实验研究[J].时珍国医国药，2017，28（7）：1607-1609.

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[7] 王晓妍，王伟，孙蓉，等.参苓白术散含药血清体外抗轮状病毒的实验研究[J].山东中医杂志，2018，37（1）：58-62.

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