山东省种鸡场禽白血病流行病学调查

文│邢林林 李玉杰 徐聪 姜秀云 陈静（山东省动物疫病预防与控制中心）

李佳璇（青岛农业大学海都学院）

禽白血病（Avian Leukosis）是由禽白血病病毒（ALV）引起的禽类的多种传染性肿瘤疾病的统称，在我国禽类养殖场中广泛流行，给家禽业造成了较大的经济损失。根据其宿主范围以及各病毒之间的干扰情况，ALV分为A、B、C、D、E和J等亚群，其中常见的外源性病毒是ALV-A和ALV-B，ALV-J最早是在19世纪80年代后期，从英国的商品肉鸡中分离出来的，也是商品鸡群中最常分离到的病毒。

外源性ALV主要有两种传播方式：经蛋的垂直传播以及通过直接接触或间接接触的水平传播，在流行病学上垂直传播是禽白血病主要传播方式，并能产生免疫耐受，接着排毒并通过种蛋产生垂直传播。自2008年以来，我国逐步建立了全国禽白血病净化项目，在《国家中长期动物疫病防治规划（2012——2020年）》中，将禽白血病列为重点净化疫病，经过多年的实施，ALV发病率明显降低，ALV感染得到有效控制，J亚群尤为明显。然而，Yawen Zhang等通过对吉林省、辽宁省、天津市、河北省、山东省、江苏省以及其他省份的采样发现，2018年以来山东8个养殖场均出现ALV感染。

本研究利用商品化的ALV抗原检测试剂盒，对山东省内7个种禽场的ALV进行流行病学调查，统计分析ALV的阳性率、感染程度等，探讨山东省ALV净化情况，为制定禽白血病的防治措施奠定基础。

一、材料与方法

2019年12月至2020年1月，对山东省内7个种禽场进行血清及蛋清的随机抽检，抽样不小于以下方式计算数量，具体根据养殖场现况调整。

种鸡群抗体检测采样数量：采集血清。生产公鸡存栏100只以下，100%采样；生产公鸡100只以上，按照发现疫情公式计算（置信度95%，预期流行率3%），将采样数量按照存栏比例分配到不同栋舍后随机抽样；其他鸡只按照发现疫情公式计算采样数量（置信度95%，预期流行率3%），将采样数量按照存栏比例分配到不同群体和栋舍后随机抽样。

禽白血病P27抗原检测采样数量：采集蛋清。根据养殖场产蛋鸡具体存栏量及产蛋情况，根据种鸡存栏量，按照预期合格率公式计算采样数量（置信度95%，预期合格率90%，相对误差10%），将采样数量按照存栏比例分配到不同群体和栋舍后随机抽样。

检测试剂。禽白血病病毒抗体检测试剂盒购自IDEXX公司，用于鸡血清中ALV-A/B亚群的抗体检测；禽白血病病毒J亚群抗体检测试剂盒购自IDEXX公司，用于鸡血清中ALV-J亚群的抗体检测；禽白血病病毒ELISA抗原检测试剂盒购自哈尔滨国生生物科技股份有限公司，用于检测蛋清中p27蛋白。

检测方法。各检测项目的具体操作过程按照试剂盒说明书进行。

二、结果

1.山东省种鸡场ALV检测情况。此次禽白血病流行病学调查针对7个种鸡场，分布于6个地市，共采集1298份血清和1000份蛋清，对于1298份血清样品进行ALV-A/B和ALV-J亚群的抗体检测，对于1000份蛋清进行p27抗原检测。结果显示，A/B亚群抗体阳性率为6.39%，其中有6个种鸡场A/B亚群抗体阳性，占85.71%（6/7）；J亚群抗体阳性率为19.80%，7个种鸡场ALV的J亚群抗体均呈阳性；p27抗原阳性率为0.10%，其中有1个种鸡场p27抗原阳性，占20.00%（1/5），其余种鸡场均未检出。具体检测结果见表1。

2.各种鸡场ALV-A/B及ALV-J亚群感染情况。由表1可知，禽白血病A/B亚群抗体阳性率各种鸡场存在差异，总阳性率为6.39%，被感染种鸡场占比较高，7个种鸡场，最高阳性率为36.73%，最低未检出。禽白血病J亚群抗体阳性率各种鸡场也存在差异，总阳性率为19.8%，且7个鸡场均有不同程度的检出，7个种鸡场最高阳性率为52.00%，最低为1.00%。因此山东省内禽白血病A/B亚群和J亚群感染较普遍，且J亚群感染高于A/B亚群。

3.各种鸡场禽白血病p27抗原检测结果。由表1可知，禽白血病p27抗原总阳性率为0.10%，5个种鸡场，最高阳性率为1.00%，最低未检出，未检出的种鸡场占比较高。由此可知，采样的种蛋ALV感染率较低，几乎无感染，ALV净化效果较好。

三、讨论与结论

目前，在我国鸡群中，ALV感染比较常见，该病会导致免疫抑制、生长迟缓、产蛋率下降等情况出现，给我国家禽业造成较大经济损失，因而必须对ALV采取较严格的净化措施。目前，对于ALV净化主要是通过对待检鸡群进行病毒分离或者通过检测不同样品中p27抗原确定阳性个体进而淘汰。

此次流行病学调查显示，7个种鸡场的ALV-A/B亚群和ALV-J亚群抗体阳性率分别为6.39%和19.80%，ALV-J亚群抗体水平明显高于ALV-A/B亚群抗体水平，因此山东省内ALV感染以J亚群为主，而ALV-J的致病性和传染性要比其他亚群ALV强得多，这就提醒我们要加强禽白血病的监测力度，持续推进检疫净化。p27抗原检测阳性率仅为0.10%，且仅有一个种鸡场出现一例阳性，根据净化标准，这说明山东省内ALV净化效果较好。

但与此同时，我们可以看到其与相应的ALV-A/B亚群和ALV-J亚群抗体检测水平相矛盾，可能是由以下几点原因导致：第一，检测方法问题。此次检测使用IDEXX的抗体检测试剂盒，工作原理是酶联免疫吸附试验法，该方法在临床上有一定的假阳性率，且无法保证试剂的准确性。因此，目前原种鸡场禽白血病净化评估标准为禽白血病p27抗原检测阳性率，若全为阴性，则判定为达到禽白血病净化状态，若阳性率高于1%，则判定为未达到净化状态，若阳性率介于0～1%，则需通过病毒分离鉴定是否有阳性出现。第二，血清样品和种蛋样品来源不同。血清样品与种蛋样品有可能来自不同栋舍，血液样品通过随机抽样在不同栋舍按一定比例进行采集，而种蛋可能是来自某一确定已净化ALV的栋舍，导致此检测结果的出现。

因此，在采样时应有专人现场采样或现场监督采样，随机抽检，保证采集样品的有效性，能够反应整体感染情况。并且在实施种禽场禽白血病净化后应定时抽检、随机抽检，以保证净化效果。

禽白血病的净化是一个复杂的过程，涉及多方主体，养殖场、市场等应互相配合、互相监督，共同促进ALV净化。在实施净化过程中，最重要的一点就是要做到在每个世代尽最大可能检出和淘汰外源性ALV检测阳性的带毒鸡，并且不同检测方法灵敏度不同适用情况不同，在净化过程中需采取不同检测方法，增加检测次数，从而提高检出率，最大程度缩短净化周期。

表1 山东种鸡场禽白血病流行病学调查结果