糕点中防腐剂的测定方法及使用现状

□ 杨亚瑞 河南华测检测技术有限公司

本文使用高效液相色谱法对测定分析糕点中的防腐剂（苯甲酸、山梨酸），主要依据GB 5009.28—2016《食品安全国家标准食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定》中的第一法液相色谱法，并对此方法进行精简和优化，对糕点中的苯甲酸、山梨酸进行检测分析[1]。

1 实验过程

1.1 溶液的配制

苯甲酸、山梨酸混合标准系列工作溶液的配制：分别准确称取苯甲酸和山梨酸标准品固体粉末各0.100 0 g（精确到0.000 1 g），用水溶解定容至10.0 mL，浓度为10 000 mg/L；取浓度为10 000 mg/L的标准储备液1 mL稀释至10 mL，得到浓度为1 000 mg/L的混合标准储备液。用储备液配制浓度为1.00、2.00、5.00、10.00、20.00、50.00 mg/L 与100.0 mg/L的混合标准系列工作溶液。

乙酸锌溶液（220 g/L）的配制：准确称取220 g乙酸锌溶于少量超纯水中，再加入30 mL冰乙酸，加水定容至1 000 mL，备用。

亚铁氰化钾溶液（106 g/L）的配制：准确称取106 g亚铁氰化钾，加入适量水溶解，再加水定容至1 000 mL，备用。

乙酸铵溶液（0.02 mol/L）的配制：准确称取1.54 g乙酸铵固体，加水溶解，再加入200 μL乙酸，转移至1 000 mL容量瓶中，定容，再经0.22 μm水相微孔滤膜过滤后备用[2]。

1.2 主要设备

实验过程中使用的主要仪器以及其型号、厂家信息等。其它设备：10 mL容量瓶、50 mL容量瓶、1 000 mL容量瓶；1mL一次性注射器若干；50 mL离心管、配套离心管盖若干；2 mL液相进样瓶、配套瓶盖若干。

1.3 样品来源

样品来源于公司各个地市、县市、区域客户送检的各种糕点。

1.4 分析步骤

1.4.1 样品制备

本实验中所用的样品均为固体样品，参照国抽细则和测试标准中对制样的要求对样品进行制备。

1.4.2 样品提取

准确称取1 g（精确到0.001 g）破碎后的样品于50 mL塑料离心管中，加水20 mL，摇匀后，使用移液枪准确加入乙酸锌溶液（220 g/L）、亚铁氰化钾溶液（106 g/L）各 2.5 mL，加盖、涡旋混匀后超声提取30 min，冷却后使用高速离心机离心2 min，取上清液过0.22 μm水相针式滤膜至2 mL的液相色谱样品瓶中，等待液相色谱测定。

1.4.3 定性分析

将2.00 mg/L的苯甲酸和山梨酸单一标准溶液分别进行测试，在230 nm波长下进行检测分析，得到相对应的色谱图，从而确定苯甲酸和山梨酸的保留时间，通过保留时间对其进行定性分析，必要时可利用光谱图进一步进行定性。

1.4.4 标准曲线的绘制

将混合标准系列工作溶液分别注入液相色谱仪中，测定相应的峰面积，以混合标准系列工作溶液的质量浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。

1.4.5 试样溶液的测定

将试样溶液注入液相色谱仪中，得到相应的峰面积，根据标准曲线计算出待测液中苯甲酸、山梨酸的质量浓度。

1.4.6 回收率的测定方法

选择一个已知苯甲酸和山梨酸含量的糕点样品，按照样品测定过程进行低、中、高浓度加标测试，计算该方法回收率。

2 结果分析

2.1 确定苯甲酸、山梨酸的保留时间

由2.00 mg/L苯甲酸、山梨酸标准溶液得到液相色谱图，由此确定苯甲酸的保留时间在5.322 min左右，山梨酸的保留时间在10.045 min左右。

2.2 测定结果分析

本试验通过对20批糕点样品进行测定分析，结果显示山梨酸的含量范围为0.100～0.300 g/kg,苯甲酸未检出。符合国家糕点中山梨酸含量＜1.0 g/kg,苯甲酸禁止添加的限量范围要求。对检出限、10倍检出限、限值3水平进行行加标回收测定，结果显示低、中、高浓度样品回收率为97%～100%，符合国标要求的95%～105%。

3 结语

综上所述：用高效液相色谱法测定糕点中的苯甲酸和山梨酸，目标化合物在分析条件下有着良好的分离度和峰型。在测试浓度范围内，标准曲线相关系数达到0.999以上，回收率在97%～100%，完全满足国家标准要求。通过对20个不同地区不同种类的糕点进行分析测试比较得出，苯甲酸含量均为未检出，山梨酸含量均低于国家标准规定的1.0 g/kg。由此说明食品生产企业基本能在标准规定添加范围内合理的使用防腐剂，从而保证食品的安全性和可靠性。随着国家市场对食品安全问题的大力管控和治理，相信在以后会有越来越多的人们加入到保卫食品安全的队伍中，会有更高效、更精密的检测手段和更规范的法律标准来捍卫人们舌尖上的安全。