甲维盐·虫螨腈悬浮剂的高效液相色谱分析

李晓琼，王红英，张宏超，陈玉晶，贾 磊，郭 歌

(1.郑州兰博尔科技有限公司，河南 郑州 450009 ； 2.河南省化工研究所有限责任公司，河南 郑州 450052)

甲维盐，中文通用名甲氨基阿维菌素苯甲酸盐, 是以阿维菌素(微生物代谢产物)为原料，经过结构优化与修饰得到的一种高效杀螨、杀虫剂，对我国近期发生的草地贪夜蛾具有良好的效果。虫螨腈又名溴虫腈，是美国氰胺公司在对天然抗生素研究中发现的新型芳基吡咯腈类杀虫、杀螨剂，对甜菜夜蛾具有良好的防治效果[1-2]。甲维盐·虫螨腈悬浮剂是一种二元复配杀虫、杀螨制剂，综合了两种组分的优势：甲维盐安全广谱，用药量低，持效期长，不易产生抗药性；虫螨腈杀虫快速防效优异，且二者均能杀虫杀螨，复配制剂具有毒性低、杀虫广、用量低、速度快、持效长等优点，该复配制剂在十字花科蔬菜害虫的防治方面具有良好应用，尤其在甜菜夜蛾的防治方面，更是发挥着重要作用，因此，甲维盐·虫螨腈悬浮剂有效组分的检测就变得非常重要[3-4]。目前，两种有效组分单剂的检测方法已有报道，然而，对于这两种杀虫剂复配制剂进行同时检测的方法未见报道[5-6]。为了降低分析成本，提高分析效率，并通过多次试验找到了对该二元复配制剂中的有效组分甲维盐和虫螨腈进行同柱同条件下一次分析的方法[7-8]。该方法分离效果好，所得数据的准确度和精密度高，操作简单、快捷，可应用于甲维盐·虫螨腈制剂的快速分析，满足产品生产中质量的实时监控及成品分析。

1 实验部分

1.1 试剂及溶液

乙腈，色谱纯；甲醇，色谱纯；含氨水溶液，氨水(分析纯)：超纯水=1∶300(体积比)；虫螨腈标样，已知质量分数≥99.0%；甲维盐标样，已知质量分数≥99.0%，12%甲维盐·虫螨腈悬浮剂。

1.2 仪器和设备

高效液相色谱使用安捷伦1220(Agilent 1220)色谱仪，配置有可变波长紫外检测器和色谱工作站；色谱柱使用XDB C18柱(150 mm×4.6 mm，5 μm)；过滤器使用孔径为0.45 μm滤膜；称量设备使用精度为十万分之一克的梅特勒(AB135-S)电子天平；使用50 μL微量进样器和20 μL定量进样管。

1.3 液相色谱操作条件

流动相由甲醇、乙腈和含氨水溶液组成的混合溶剂构成，其体积比为甲醇∶乙腈∶含氨水溶液=42∶42∶16。溶剂在使用前经过滤膜过滤，然后脱气15 min。流动相流速控制在1.0 mL/min，柱温控制在室温(25 ℃)，检测波长选择245 nm，进样体积为20 μL，甲维盐B1b的保留时间11.5 min，甲维盐B1a的保留时间14.3 min，虫螨腈的保留时间4.4 min。甲维盐和虫螨腈高效液相色谱图见图1。

图1 12%甲维盐·虫螨腈SC的液相色谱图

1.4 测定方法

1.4.1标样溶液的配制

分别称取0.02 g(精确至0.000 1 g)甲维盐标样和0.1 g(精确至0.000 1 g)虫螨腈标样于100 mL容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至约80 mL，放入超声波中使标样完全溶解并脱气15 min，然后降至室温(25 ℃)并定容，摇匀待用。准确移取上述溶液5 mL于10 mL容量瓶中，用甲醇定容，摇匀待用。

1.4.2试样溶液的配制

称取甲维盐·虫螨腈制剂试样1 g(精确至0.000 1 g)加入到100 mL的容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至约80 mL，放入超声波中使试样完全溶解并脱气15 min，降至室温(25 ℃)并定容，摇匀待用。准确移取上述溶液5 mL于10 mL容量瓶中，用甲醇定容，摇匀待用。

1.4.3测定

在1.3所述色谱操作条件下，当仪器基线稳定后，取标样溶液连续进样，直至甲维盐或虫螨腈的标样相邻两次进样的峰面积相对变化<1.5%后，再按照标样、试样、试样和标样的顺序依次进样测定。

1.5 计算

把测得的两次标样溶液和两次试样溶液中甲维盐或虫螨腈的峰面积分别加权平均，然后按如下公式计算试样中甲维盐或虫螨腈的质量分数：

式中：A1为标样中甲维盐或虫螨腈峰面积的平均值；A2为试样中甲维盐或虫螨腈峰面积的平均值；m1为甲维盐或虫螨腈标样的质量，g；m2为甲维盐·虫螨腈试样的质量，g；P为标样中甲维盐或虫螨腈的质量分数，%。

2 结果与讨论

2.1 检测波长的选择

为了选择最佳检测波长，采用紫外分光光度计对甲维盐及虫螨腈标准溶液进行了全波长扫描，发现在波长245 nm左右，甲维盐和虫螨腈均有较好吸收，并参考已报道的甲维盐和虫螨腈检测波长，选择245 nm为样品分析的检测波长[9]。

2.2 流动相的选择

为了提高分离度和分析效率，考察了不同比例的甲醇、乙腈和含氨水溶液作为流动相时的分离和分析效果。当甲醇、乙腈和含氨水溶液以体积比为42∶42∶16的比例混合作为流动相，流速控制在1.0 mL/min时，对甲维盐·虫螨腈制剂进行测定，发现甲维盐和虫螨腈前后杂质都能得到很好的分离，峰形较好，保留时间相对较短，能够满足简单、快速分析的要求。同时结合甲维盐检测使用的流动相，最终选择了以甲醇、乙腈、含氨水溶液体积比为42∶42∶16的混合溶液为流动相[7]。

2.3 方法的线性相关性分析

利用标准曲线进一步考察线性相关性，为此分别称取不同质量的甲维盐和虫螨腈标准样品，加入到100 mL的容量瓶中，用甲醇将其溶解并定容至刻度，摇匀待用。准确移取上述溶液1、2、4、6、8、10 mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，得到不同浓度的甲维盐和虫螨腈标样溶液。在1.3所述的色谱条件下，当仪器基线稳定后，依次测定不同浓度下甲维盐和虫螨腈标样峰面积的值(见表1)，以甲维盐和虫螨腈标样的质量为横坐标，以甲维盐和虫螨腈标样的峰面积为纵坐标绘制回归曲线(见图2)。甲维盐的线性回归方程为y=1 190.9x+139.69，相关系数R2=0.999 9，n=5；虫螨腈的线性回归方程为y=1 254.8x+81.013，相关系数R2=0.999 9，n=5，所得回归曲线线性关系良好。

表1 方法的线性相关性测定结果

2.4 方法的精密度评价

图2 线性关系曲线

在1.3所述的色谱条件下，对同一含量样品进行不少于5次的平行测定，其测定结果如表2所示，甲维盐和虫螨腈的平均结果为2.31%、9.12%，其标准偏差分别为0.017和0.072，变异系数(CV)分别为0.74%和0.79%；该结果表明所选择分析方法的精密度良好。

表2 甲维盐和虫螨腈的精密度测定结果

2.5 方法的准确度评价

分析方法的准确度可以通过添加回收率的测定进行评价。为此，在已知含量的甲维盐·虫螨腈制剂样品中，分别加入特定质量的甲维盐和虫螨腈标准品并配成溶液，在相同的色谱条件下测定甲维盐和虫螨腈含量，计算回收率，其结果见表3。

表3 添加回收率测定结果

由表3可以看出，甲维盐的添加回收率为98.73%～101.27%，平均回收率为99.87%；虫螨腈的添加回收率在99.17%～100.83%，平均回收率为99.83%。该结果表明，所选择分析方法的准确度较高，能够满足定量分析的要求。

3 结论

使用XDB C18色谱柱(150 mm×4.6 mm，5 μm)，以甲醇、乙腈和含氨水溶液(体积比42∶42∶16)为流动相，以245 nm为紫外检测器检测波长，开发了同柱同条件下一次同时测定甲维盐·虫螨腈悬浮剂中有效组分含量的方法。分析与评价结果表明，该方法在测定范围内线性关系良好，分析数据的准确度和精密度均较高，具有简单、快速、准确等特点，能够满足甲维盐·虫螨腈悬浮剂产品的常规、快速定量分析。