猪场常见细菌病及其消毒效果调查

李君艳

（漯河市郾城区动物疫病预防控制中心，河南 漯河 462000）

近年来，随着生猪养殖量的不断增加，猪场常见多发的细菌病也日益引起关注。笔者对养殖场和兽医门诊进行流行病学调查时特意收集了1个养殖场连续4个月的36份临床病料，并对这些病料进行了一次集中的细菌学检测，现将该次调查方法、检测结果及心得体会陈述如下，以期为猪场细菌性疾病的防控和正确消毒提供参考。

1 调查材料

1.1 调查背景

漯河市某猪场占地面积为350亩（1亩≈667 m2），总建筑面积为32 000 m2，主要从事优良种猪的引进、繁育和销售工作。目前，该猪场年出栏生猪50 000头以上，其中商品猪有46 000头，优质种猪4 000头。

1.2 主要培养基及试剂

本次培养细菌所用的培养基主要有血液琼脂糖培养基、麦康凯培养基、沙门氏菌培养基、胰蛋白胨大豆琼脂等。所用试剂主要有琼脂粉、牛肉膏、蔗糖、乳糖、碳酸氢钠、甘油、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸、犊牛血清等。

1.3 主要仪器设备

恒温培养箱、二级生物安全柜、高压灭菌锅、恒温摇床、电子天平、恒温水浴锅、一次性无菌接种环等。

1.4 样品采集

所检测样品均采集于该猪场因病死亡的猪，其中有仔猪、保育猪和育肥猪。将采集的病料进行标记、编号并存放于-20 ℃冰箱，检测时提前3 h 将其从冰箱中取出，放在二级生物安全柜中解冻。

2 实验室检测

将样品在无菌条件下接种于血液琼脂培养基上，37 ℃条件下培养24 h，并用革兰氏染色法对菌落进行初步筛查和归类，将不同种属的细菌接种到不一样的培养基中：将眼观半透明状的疑似副猪嗜血杆菌的菌种接种到TSA培养基上，在厌氧条件下进行培养24 h；将疑似沙门氏菌的菌种接种到沙门氏菌培养基上；将疑似大肠杆菌的菌种接种到麦康凯培养基上；将疑似猪链球菌的菌种接种到血液培养基中。

3 生化鉴定

将上述单个菌落重新划板接种于所对应的培养基中进行菌种的纯化，和上述步骤一样，置于恒温培养箱24 h收菌，并将菌落保存于10%的甘油管中，放在4 ℃保存，备用。

4 试验和消毒药物调查结果

本次对采集的36 份样品集中进行细菌分离和鉴定，发现在麦康凯培养基上出现红色的菌落，判定为大肠杆菌；在沙门氏菌培养基上出现无色透明、光滑的、中心有黑色圆点的菌落，判定为沙门氏菌；在血液培养基上出现了2种菌落，一种是水滴状态的小菌落，没有溶血现象，判定为巴氏杆菌，另一种是灰白色，表面光滑，边缘整齐且有溶血现象的菌落为链球菌；在TSA培养基上出现了表面光滑，边缘整齐的椭圆形的小菌落，为副猪嗜血杆菌。

经对猪场流行病学调查发现，该猪场常用的消毒药物主要为季铵盐类消毒药，消毒方法包括喷雾、浸泡等。每周大清洁1次，清洁出的污物进行堆积发酵，清洁过后用消毒药对圈舍的地面、墙面和房顶进行喷雾消毒，对于常用的饲料运送车、铲子、衣物等进行浸泡消毒。经过为期3个月左右的时间，该场的病死猪数量大大减少。

5 分子生物学检测

用细菌分离和显微镜观察的方法并不能完全确定所看到的菌落就是所判定的结果。为了精准判定结果，对分离的菌落用PCR 的方法进行了鉴定，所用引物均来自每种细菌病对应的国家标准上的引物。经过PCR 鉴定后，其鉴定结果与显微镜观察判定结果一致。

6 讨论

通过对该猪场4 个月的病料进行收集和检测，发现该猪场近期大量的猪死亡并非是由于重大传染病引起的，而是一些常见多发的细菌病，如大肠杆菌、沙门氏菌、副猪嗜血杆菌、链球菌等。大肠杆菌主要引起仔猪黄痢和仔猪水肿病，其临床上主要表现为腹泻、呕吐、眼睑水肿、脱水等症状。猪链球菌病多发生于育肥猪，发病后猪常常表现为关节肿大或化脓，因此，一旦发生要及时排出关节内的脓液。本猪场副猪嗜血杆菌病的发病率相对较高，临床上常表现为呼吸困难、被毛紊乱，剖检可见纤维素性胸膜炎、纤维素性关节炎等，此病与猪瘟、蓝耳病常常合并感染，因此要格外注意。

经过本次对猪场的流行病学调查，笔者认为引起猪场细菌病流行的主要原因如下：一是猪场长期使用同一种抗生素对发病猪进行治疗，导致一些细菌产生很强的耐药性，以至于控制不住而使疫情蔓延。二是混合感染严重。在本次对病料进行细菌分离的时候发现，单纯性的细菌感染所占比例非常低，80%以上是混合感染。混合感染常常会因治疗一种病后控制不住另一种病，导致治疗不彻底，从而难以控制疾病的发生和蔓延。三是对消毒工作的认识不到位。该猪场技术人员专业知识储备有限，对猪场消毒工作认识不到位，经调查和谈话发现其对消毒工作几乎处于忽视的状态。

另外，笔者因长期从事动物疫病流行病学调查工作，结合工作实际发现漯河市该养猪场大肠杆菌等感染比较严重，此次对该猪场的消毒调查认为猪场在消毒方面存在几点误区：一是很多养殖户认为发病的时候再消毒可以有效防控疾病的发生，未发病的时候消毒没有必要；二是消毒前不做清洁工作，直接拿着消毒剂喷雾或者浸泡；三是消毒工作趋于形式，不能全覆盖式的消毒。