不同产地大皂角药材薄层色谱研究

王升匀，陈锡赟，胡志平，赵鸿宾

(黔南民族医学高等专科学校，贵州 都匀 558013)

大皂角为豆科植物皂荚GleditsiasinensisLam.的干燥成熟果实[1]。在全国大部分地区均有分布，资源十分丰富，具有祛痰开窍、散结消肿等功效，经炮制后可降低其毒副作用，常用于临床用药，为贵州民间治疗头风头痛、痈肿便毒、疮癣疥癞等疾病的常用中药[2]。大皂角具有较大的药用价值，但不同产地的药材质量参差不齐，难以鉴别，本文旨在通过TLC方法，按照2015版《中国药典》四部通则研究的方法为大皂角药材质量标准提供参考依据。

1 材料

1.1 实验药材

大皂角药材经黔南民族医学高等专科学校王传明副教授鉴定为大皂角为豆科植物皂荚GleditsiasinensisLam.的干燥成熟果实。

1.2 仪器与试剂

LX-05多功能能粉碎机(上海江信科技有限公司)；GoodSee-20E薄层色谱成像系统(上海科哲生化科技有限公司)；BSA224S电子天平(赛多利斯科学仪器有限公司)；TS-Ⅱ双喷头超细喷雾器(上海科哲生化科技有限公司)；SP-Ⅱ电动点样器(上海科哲生化科技有限公司)；GZX-9070电热鼓风干燥箱(上海博讯实业有限公司医疗设备厂)；SX-2.5-R型箱式电阻炉(天津市泰斯特仪器有限公司)；WFH-203B三用紫外分析仪(上海精科实业有限公司)；HH-6恒温水浴锅(常州澳华仪器有限公司)。

表1 药材来源一览表

对照药材(贵州迪达生物科技，dzyc0229)；甲醇、正丁醇、乙酸乙酯、三氯甲烷、石油醚等均为色谱纯，氨水、冰醋酸、无水乙醇为分析纯，水为纯化水。

2 方法与结果

2.1 供试品溶液的制备

取大皂角1 g，精密加入甲醇10 mL，超声处理30 min，取出放凉，滤过，滤液蒸干，残渣加水10 mL使其溶解，用乙酸乙酯振摇提取2次，每次10 mL，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1 mL使溶解，得供试品溶液。

2.2 对照药材溶液的制备

取大皂角对照药材1 g，方法同“2.1”项下供试品溶液制备，得对照药材溶液。

2.3 薄层色谱条件考察

2.3.1 不同展开系统的考察 吸取供试品溶液及对照药材溶液各10 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，分别在三氯甲烷-甲醇-水-冰醋酸(18∶ 1∶0.6∶0.2)、石油醚-乙酸乙酯(85∶15)、正丁醇-无水乙醇-氨水(10∶2∶5)3种展开系统中分别进行展开，待展开完全后，喷以10%硫酸乙醇溶液显色，结果如图3所示，在三氯甲烷-甲醇-水-冰醋酸(18∶1∶0.6∶0.2)系统中的展开效果较好，斑点较为清晰且分离度好。大皂角不同展开系统比较色谱见图1。

A B C

2.3.2 不同检视波长的考察 吸取供试品溶液及对照药材溶液各10 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，在三氯甲烷-甲醇-水-冰醋酸(18∶1∶0.6∶0.2)展开剂中展开，待其展开的完全后，取出，喷以10%硫酸乙醇进行显色，在白光、254 nm、365 nm三种检视光中进行检视，其中以365 nm的检视光为佳，斑点较为清晰，在254 nm的检视光下虽有部分斑点，但是并不完全；白光下则无明显斑点。大皂角不同检视波长比较色谱见图2。

A B C

2.3.3 不同硅胶板的考察 吸取供试品溶液及对照药材溶液各10 μL，分别各点于硅胶G薄层板、硅胶GF254薄层板、硅胶H薄层板上，在三氯甲烷-甲醇-水-冰醋酸(18∶1∶0.6∶0.2)展开剂中展开，待其展开的完全后，取出，喷以10%硫酸乙醇进行显色，在365 nm检视光中进行检视，结果可以看出以硅胶G板为载体为佳，其各成分主斑点显示清晰，分离度高。大皂角不同硅胶板考察色谱见图3。

A B C

2.3.4 不同显色剂考察 吸取供试品溶液及对照药材溶液各10 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，在三氯甲烷-甲醇-水-冰醋酸(18∶1∶0.6∶0.2)展开系统中分别进行展开，待展开完全后，分别喷以10%硫酸乙醇溶液、1%三氯化铝乙醇液、10%磷钼酸乙醇溶液进行显色，在365 nm光下进行检视，结果显示以10%硫酸乙醇溶液为显色剂为佳，显色比较完全且斑点清晰。大皂角不同显色剂考察色谱见图4。

A：10%硫酸乙醇溶液；B：1%三氯化铝乙醇溶液；C：10%磷钼酸乙醇溶液

2.3.5 不同产地大皂角的薄层鉴别 照薄层色谱法(2015版《中国药典》四部通则0502)试验，吸取供试品溶液及对照药材溶液各10 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水-冰醋酸(18∶1∶0.6∶0.2)的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光下(365 nm)下检视，结果如图7、8、9所示，在三氯甲烷-甲醇-水-冰醋酸(18∶1∶0.6∶0.2)下层溶液的展开系统中展开，待其展开完全后，取出，喷以10%硫酸乙醇溶液进行显色，在365 nm紫外光下进行检视，大皂角溶液与对照药材溶液在薄层板的相应位置有大小与颜色相同的斑点。不同产地大皂角薄层色谱见图5。

3 讨论

大皂角中主要是含有三萜皂苷类成分，在临床应用非常广泛，具有开窍、祛痰、通便功效，主要用于猝然昏迷、口噤不开、喉中痰壅、支气管哮喘、便秘、颈淋巴结结核。通过实验研究发现用硅胶G板为载体，展开剂为三氯甲烷-甲醇-水-冰醋酸(18∶1∶0.6∶0.2)，10%硫酸乙醇溶液为显色剂；在365 nm紫外光下进行检视，大皂角溶液与对照药材溶液在薄层板的相应位置有大小与颜色相同的斑点，并且斑点清晰且分离度好。本实验为大皂角的质量标准提供了有利的数据支持。

(1=DZJ01；2=DZJ02；3=DZJ03；4=DZJ04；5=DZJ05；6=DZJ06；7=DZJ07；8=DZJ08；9=DZJ09；10=DZJ10；C=对照品药材)