不同胎龄新生儿和早产儿视网膜病变患儿血管内皮生长因子水平变化分析

郭涛 孟靓靓 陈晓云 陈燕 张承芳

1潍坊市妇幼保健院眼耳鼻喉科 261011；2济宁市第一人民医院新生儿科 272000；3泰安市中心医院儿科 271000；4新泰市人民医院儿童保健科 271200

早产儿视网膜病变（retinopathy of prematurity，ROP）是常见于低出生体质量、胎龄小早产儿的一种视网膜血管增生性疾病，病理改变以病理性新生血管形成、视网膜血管发育不良等为主，可对新生儿视功能造成损伤，降低其生存质量，并增加家庭、社会负担［1-2］。妊娠16周，胎儿视网膜中的血管开始进行发育，小胶质细胞、星形胶质细胞分泌VEGF，促进视网膜血管发育，早产儿出生时，视网膜血管发育尚未完成，视网膜无血管区存在缺氧现象，可诱导VEGF 水平上升［3］。另外，早产儿出生后多需予以供氧，视网膜组织氧气增多，可导致VEGF 异常分泌，增加ROP 风险［4］。此次研究分别对不同胎龄早产儿、ROP 患儿实施血清VEGF 检测，旨在前瞻性研究早产儿、ROP 患儿与VEGF 之间的关联性，现报道研究如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 于2018 年9 月至2019 年9 月在潍坊市妇幼保健院出生的＜32周早产儿中随机选取60例设为A组，男31 例（51.67%），女29 例（48.33%）；胎龄范围为29～31周，胎龄（30.21±0.35）周。于同期在潍坊市妇幼保健院出生的32～36 周早产儿中随机选取60 例设为B 组，男32 例（53.33%），女28 例（46.67%）；胎龄范围为32～36 周，胎龄（34.10±1.23）周。于同期在潍坊市妇幼保健院出生的足月儿中随机选取60 例设为C 组，男29 例（48.33%），女31 例（51.67%）；胎龄范围为37～41 周，胎龄（39.01±0.53）周。于同期在本院出生且存在ROP的患儿中随机选取60例设为D组，男32 例（53.33%），女28 例（46.67%）；胎龄范围为30～36周，胎龄（33.02±1.35）周。此次研究已通过潍坊市妇幼保健院医学伦理委员会审批，且入选新生儿性别、年龄比较差异均无统计学意义（均P＞0.05），可对比研究。

1.2 纳入与排除标准（1）纳入标准：早产儿均为出生时胎龄＜37周；ROP经《中国早产儿视网膜病变筛查指南（2014 年）》［5］确诊；家属同意参与研究并配合进行签字。（2）排除标准：合并其他眼底疾病者；存在其他先天性疾病者；相关医学信息不全者；家属依从性差无法配合完成研究者。

1.3 方法 于出生第1周、第3周、第5周时，分别予以4 组新生儿采集0.5 ml 外周静脉血液标本，进行30～60 min静置凝固后，予以2 000 r/min×15 min 离心处理，分离血清，保存于-20℃环境中。VEGF试剂盒由上海森雄科技实业有限公司提供，酶标仪（Well Scan MK2）购自芬兰雷勃公司。通过双抗夹心ABC-ELISA 法对VEGF 水平进行测定，检测步骤参考按照仪器、试剂说明书进行。

1.4 观察指标（1）4组新生儿VEGF水平。（2）A、B、D组有无吸氧新生儿VEGF 水平。（3）早产儿与ROP 患儿相同纠正胎龄VEGF 水平。对A 组、B 组、D 组纠正胎龄进行计算，A 组与B 组均视为早产儿，D 组视为ROP 患儿，对比其VEGF水平。吸氧情况依照新生儿实际情况进行选择。

1.5 统计学方法 研究数据以SPSS20.0 处理，VEGF水平计量资料符合正态分布以均数±标准差（）表示，组间比较采用t检验；计数资料采用n（%）表示，组间比较采用χ2检验，计量资料组间比较采用重复测量方差分析，两组间比较采用SNK-q检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 4组新生儿VEGF水平比较 出生第1周、第3周、第5 周时，D 组VEGF 水平均较A 组、B 组、C 组高，且A 组、B组均较C 组高，A 组较B 组高，差异均有统计学意义（均P＜0.05），具体见表1。

表1 4组新生儿VEGF水平比较（，ng/L）

表1 4组新生儿VEGF水平比较（，ng/L）

注：经SNK-q 检验，与C 组比较，aP＜0.05；与B 组比较，bP＜0.05；与A组比较，cP＜0.05

2.2 各组有无吸氧新生儿VEGF 水平比较 出生第1 周、第3 周、第5 周时，A 组、C 组有无吸氧新生儿的VEGF水平比较差异均无统计学意义（均P＞0.05）；B 组吸氧新生儿VEGF 水平均较未吸氧者低，差异均有统计学意义（均P＜0.05），见表2～4。

表2 A组吸氧与未吸氧新生儿VEGF水平比较（，ng/L）

表2 A组吸氧与未吸氧新生儿VEGF水平比较（，ng/L）

注：经重复测量方差分析得出，F时间=1.641，P时间=0.584；F组间=6.264，P组间=0.067；F交互=0.264，P交互=0.510

表3 B组吸氧与未吸氧新生儿VEGF水平比较（，ng/L）

表3 B组吸氧与未吸氧新生儿VEGF水平比较（，ng/L）

注：经重复测量方差分析得出，F时间=0.264，P时间=0.487；F组间=3.841，P组间=0.095；F交互=2.064，P交互=0.822

2.3 早产儿与ROP 患儿相同纠正胎龄VEGF 水平比较 ROP 患儿各纠正胎龄VEGF 水平均较早产儿高，差异均有统计学意义（均P＜0.05），详见表5。

3 讨论

ROP 是早产儿眼部疾病的一种，在我国发病率约为15.0%～20.0%，相较于足月儿，早产儿视网膜血管的发育状况尚不成熟，在多种因素共同作用下，可致使视网膜血管异常增生，引发ROP，增加儿童致盲风险［6-7］。近年来，大量临床研究表明［8-9］，关于ROP 的发生，临床研究认为分两个阶段：其一为出生后矫正胎龄30 周以后，此阶段，新生儿视网膜未正常发育，娩出后视网膜于高氧分压环境中暴露，低氧诱导的VEGF 水平下降，视网膜生长进程缓慢，此阶段新生儿出生后视网膜可继续生长，一般无须予以治疗。其二为矫正胎龄31～42 周，此阶段，新生儿视网膜发育对氧气的需求量增大，而未血管化的视网膜处于缺氧状况，VEGF 水平上调，促进视网膜血管大量生长，进入玻璃体腔，进而对患儿视力造成影响。因此，对于ROP，尽早筛查并予以干预对减轻新生儿视功能损害意义重大。

表4 C组吸氧与未吸氧新生儿VEGF水平比较（，ng/L）

表4 C组吸氧与未吸氧新生儿VEGF水平比较（，ng/L）

注：经重复测量方差分析得出，F时间=0.341，P时间=0.474；F组间=5.975，P组间=0.066；F交互=3.541，P交互=0.206

在ROP发生、发展的过程中，视网膜新生血管发挥主导作用。孕16 周后，胎儿视网膜血管开始从视盘生长向前部，孕32 周达到鼻侧的视网膜锯齿缘，足月时才会达到颞侧的锯齿缘处，并完成视网膜血管化。而早产儿出生时，视网膜血管化尚未完成，存在视网膜无血管区，且此区域处于缺氧状态，可对VEGF 产生诱导作用，使其水平上升。因此，VEGF 在ROP 发展中有重要作用，VEGF 是血管形成、发育的必要物质之一，可对血管内皮细胞的分裂、增殖进行促进，使血管通透性增加，其水平异常上升可致使ROP风险增大。本次研究对不同胎龄新生儿、ROP 患儿展开VEGF 水平检测，结果显示：出生第1周、第3周、第5周时，D组VEGF水平均较A组、B组、C组高，且A组、B组均较C组高，A组较B 组高，差异均有统计学意义（均P＜0.05），提示与早产儿、足月儿对比，ROP 患儿VEGF 水平较高，且新生儿胎龄越低，VEGF 水平越高。妊娠后期，胎儿组织器官发育速度加大，VEGF需维持在较高的水平，胎儿娩出后，其生长发育逐渐完善，VEGF水平随之降低。另外，研究表明，ROP早期阶段，在高氧环境影响下，VEGF生产被抑制，致使视网膜血管无法正常生长，无血管化区、毛细血管化区形成，视网膜组织缺氧，对病理性VEGF 产生刺激作用，使其表达上调，进一步促进病理性新生血管形成［10］。

同时，出生第1周、第3周、第5周时，A组、C组有无吸氧新生儿VEGF水平比较差异均无统计学意义（均P＞0.05）；B组吸氧新生儿均较未吸氧者低，差异均有统计学意义（均P＜0.05），提示＜32周、足月儿有无吸氧者VEGF水平无明显差异，而32～36 周早产儿吸氧新生儿VEGF 水平较未吸氧者低。相关研究表明，视网膜中VEGF的生成主要通过氧气进行调节［11］。本次研究中，仅32～36周早产儿吸氧、未吸氧者的VEGF 水平存在差异，因此尚无法证实吸氧对血清VEGF的影响作用，且早产儿若合并窒息、贫血、呼吸窘迫综合征等也可能致使血清VEGF 出现异常表达。ROP 患儿各纠正胎龄VEGF 水平均较早产儿高，差异均有统计学意义（均P＜0.05），提示早产儿血清VEGF 水平异常上升可能会致使ROP 风险增大，对于早产儿，临床上可积极予以血清VEGF水平动态监测，以便于及时发现ROP。大量临床研究认为，处于发病第一阶段时，ROP患儿血清VEGF水平下降，第二阶段时，ROP患儿血清VEGF水平上升［12-13］。ROP最早于纠正胎龄32 周时出现，早期准确筛查并予以干预可使此病的发展得到有效控制，减轻对患儿视功能的损害［14］。Vanderveen 等［15］研究发现，出生后4～6 周，ROP 患儿血清VEGF 水平较无ROP 的早产儿高，与本文的研究结果相似，进一步表明，ROP 患儿存在血清VEGF 水平异常上升的现象，对早产儿实施ROP筛查时，可予以其血清VEGF检测。

综上所述，相较于无ROP 的早产儿，ROP 患儿血清VEGF 水平显著上升，早产儿胎龄越小，VEGF 水平越高，吸氧对早产儿血清VEGF 水平的影响尚不明确。但此次研究存在样本量小、未予以长期随访等不足，可能会致使数据离散度增大，致使偏差结果出现，需展开进一步研究，以探讨早产儿、ROP患儿血清VEGF水平的变化情况及相关性。

表5 早产儿与ROP患儿相同纠正胎龄VEGF水平比较（，ng/L）

表5 早产儿与ROP患儿相同纠正胎龄VEGF水平比较（，ng/L）

注：括号内为例数，仅有1 例者未纳入t 检验；经重复测量方差分析得出，F时间=2.645，P时间=0.085；F组间=8.574，P组间=0.057；F交互=4.991，P交互=0.076

利益冲突：作者已申明文章无相关利益冲突。