血清sLOX-1、cTnI及CK-MB检测在缺氧缺血性脑病诊断中的价值

张 婷，徐水亮

鄂东医疗集团黄石市中心医院/湖北理工学院附属医院检验科，湖北黄石 435000

缺氧缺血性脑病是指围生期新生儿窒息所引起的脑缺氧缺血性损伤，是新生儿神经系统异常和死亡的主要因素[1]。缺氧缺血性脑病在新生儿中的发病率为0.2%～0.4%，并且患儿的预后较差，病死率较高[2]。目前，对缺氧缺血性脑病的临床诊断主要依靠影像学诊断结果、患儿的临床表现及病史综合进行判断，缺乏客观、准确且有效的血清生化标志物[3]。可溶性血凝素样氧化低密度脂蛋白受体-1(sLOX-1)主要由血管内皮细胞和自然杀伤细胞分泌产生，具有诱导平滑肌细胞凋亡和促进炎性反应等功能，是心血管疾病诊断和治疗的新兴生物标志物[4-5]。心肌肌钙蛋白I(cTnI)主要分布于心肌，当心肌出现损伤时被大量分泌至血液中，是心肌损伤的临床诊断标志物，在急性心肌梗死和心力衰竭等心血管疾病的临床诊断中具有一定价值[6-7]。肌酸激酶同工酶(CK-MB)主要存在于心肌，参与肌酸的代谢调节，心肌损伤时迅速释放入血，是反映急性心肌梗死和心力衰竭的典型生化标志物[8-9]。目前，缺氧缺血性脑病新生儿的血清学诊断标志物仍然较少，本研究通过检测血清sLOX-1、cTnI及CK-MB水平，旨在分析它们在缺氧缺血性脑病新生儿中的水平及其与新生儿神经行为测评(NBNA)评分的关系，现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选择2017年2月至2019年10月本院诊治的120例缺氧缺血性脑病新生儿纳入观察组，纳入标准：(1)出生后24 h内发生缺氧缺血性脑病；(2)符合中华医学会儿科学分会制订的新生儿缺氧缺血性脑病诊断标准[10]；(3)无贫血和呼吸道阻塞性疾病；(4)脑部CT结果显示有低密度灶改变。排除标准：(1)存在遗传代谢性疾病；(2)心肺功能异常；(3)合并其他类型脑部疾病；(4)治疗期间转院；(5)治疗期间死亡，以及治疗结束出院后失访。120例缺氧缺血性脑病患儿中男67例，女53例；新生儿为其母亲首胎98例，非首胎22例；出生时孕周37～43周，平均(39.88±2.61)周；患儿出生体质量为2 190～4 310 g，平均(3 033.79±836.37)g。参考新生儿缺氧缺血性脑病分度标准[11]，将120例患儿进一步分为轻度组(65例)、中度组(38例)和重度组(17例)。选择同期在本院妇产科出生的120例健康新生儿作为对照组，其中男69例，女51例；新生儿为其母亲首胎95例，非首胎25例；出生时孕周为37～42周，平均(39.15±2.13)周；出生体质量2 235～4 408 g，平均(3 089.46±853.83)g。观察组与对照组的性别比例、首胎比例和出生孕周等一般资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。临床研究开展前均与新生儿家属签署知情同意书，且经本院医学伦理委员会审核通过。

1.2方法 对照组新生儿于出生后立即采集3 mL静脉血，而观察组新生儿则分别于出生后1、2、7 d采集3 mL静脉血。静脉血采集后均在室温下静置30 min，5 000 r/min离心30 min，离心半径12 cm，吸取上清液至另一洁净离心管中，—80 ℃冻存。采用酶联免疫吸附试验法检测血清sLOX-1、cTnI和CK-MB水平。sLOX-1检测试剂盒购自上海恒斐生物科技有限公司，生产批号：E13567，cTnI检测试剂盒购自武汉菲恩生物科技有限公司，生产批号：EH0348，CK-MB检测试剂盒购自苏州瑞诺德生物科技有限公司，生产批号：ML0447。

1.3观察指标 于喂养1 h后检测各组新生儿的NBNA评分[12]，主要包括行为能力评估(6项)、原始反射评估(3项)、主动肌张力评估(4项)和被动肌张力评估(4项)，总分<35分为脑损伤，35～36分为可疑脑损伤，>36分为正常。比较对照组(出生后1 d)和观察组(出生后1 d)的血清sLOX-1、cTnI和CK-MB水平，比较轻度组、中度组和重度组在出生后1、2、7 d的血清sLOX-1、cTnI、CK-MB水平及NBNA评分。

2 结 果

2.1对照组与观察组的血清sLOX-1、cTnI和CK-MB水平比较 观察组血清sLOX-1、cTnI和CK-MB水平明显高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 对照组与观察组的血清sLOX-1、cTnI和CK-MB水平比较

2.2不同程度缺氧缺血性脑病患儿血清sLOX-1、cTnI、CK-MB水平及NBNA评分动态变化 出生后1、2、7 d，重度组血清sLOX-1、cTnI和CK-MB水平明显高于中度组和轻度组，而NBNA评分明显低于中度组和轻度组，差异有统计学意义(P<0.05)。出生后1、2、7 d，中度组血清sLOX-1、cTnI和CK-MB水平明显高于轻度组，而NBNA评分明显低于轻度组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

2.3血清sLOX-1、cTnI和CK-MB水平与NBNA评分的相关性分析 血清sLOX-1、cTnI、CK-MB水平与NBNA评分均呈负相关(r=-0.907、-0.855、-0.835，P<0.05)，见图1。

2.4血清sLOX-1、cTnI和CK-MB水平对缺氧缺血性脑病新生儿的诊断价值 血清sLOX-1、cTnI和CK-MB水平联合检测的诊断价值明显高于各项指标单独检测，见表3。

表2 不同程度缺氧缺血性脑病患儿血清sLOX-1、cTnI、CK-MB水平及NBNA评分动态变化

组别nCK-MB(ng/mL)1 d2 d7 dNBNA评分(分)1 d2 d7 d轻度组656.81±2.208.62±2.786.02±1.9434.76±5.7032.57±5.3436.69±6.01中度组3818.69±5.66*20.48±6.21*19.43±5.89*29.77±5.62*27.61±5.21*31.42±5.93*重度组1743.85±8.18*#47.05±7.07*#45.72±8.70*#5.26±1.46*#4.34±1.21*#22.42±6.23*#F14.73713.11116.33418.01918.4895.365P<0.001<0.001<0.001 <0.001<0.001<0.001

注：A为血清sLOX-1水平与NBNA评分的相关性分析；B为血清cTnI水平与NBNA评分的相关性分析；C为血清CK-MB水平与NBNA评分的相关性分析。

表3 血清sLOX-1、cTnI和CK-MB水平对缺氧缺血性脑病新生儿的诊断价值

3 讨 论

缺氧缺血性脑病主要由脑部缺氧缺血所致，目前普遍认为细胞代谢紊乱、免疫功能失调、炎性反应、氧化应激反应和围生期缺血再灌注等是缺氧缺血性脑病的主要发病机制[13-14]，因此，缺氧缺血性脑病是多因素作用的结果。缺氧缺血性脑病的发病过程较为复杂，病死率高且后遗症多[15]，因此，寻找与缺氧缺血性脑病发病密切相关的血清标志物，并将其应用于缺氧缺血性脑病患儿的诊断和治疗中具有重要的临床意义。

本研究发现，缺氧缺血性脑病患儿血清sLOX-1水平明显升高，并且随患儿病情严重程度增加其血清sLOX-1水平也随之升高，表明sLOX-1水平升高与缺氧缺血性脑病的发生及病情严重程度关系密切。分析其原因可能是由于在缺氧缺血性脑病发病过程中存在严重的氧化应激反应，氧化应激过程中产生大量的氧自由基并使低密度脂蛋白发生氧化作用。KATTOOR等[16]的研究报道显示，sLOX-1能够结合氧化型的低密度脂蛋白。STANKOVA等[17]的研究结果显示，sLOX-1与低密度脂蛋白结合会导致低密度脂蛋白的大量降解，从而产生脂质代谢紊乱，因此，缺氧缺血性脑病患儿血清sLOX-1水平升高是一种反馈调节机制，sLOX-1能够中和氧化应激产生的氧化型低密度脂蛋白，减少氧化型低密度脂蛋白对心脑血管造成的损伤，同时sLOX-1水平异常升高会促进低密度脂蛋白的异常降解，导致患儿容易发生脂质代谢紊乱，致使病情加剧[18]。进一步研究发现，血清sLOX-1水平与NBNA评分呈负相关，表明sLOX-1水平升高可能引起患儿的神经功能损伤。分析其原因可能是由于sLOX-1水平升高与氧化应激的发生密切相关，氧化应激产生的过氧化物分子及超氧化物分子具有较强的氧化性，会对细胞膜上的受体蛋白造成氧化损伤，从而抑制神经元细胞的增殖和损伤修复等过程，导致神经元细胞大量死亡进而引起患儿出现神经功能损伤[19]。

本研究结果也表明，cTnI也与缺氧缺血性脑病的发生及病情严重程度关系密切。分析其原因可能是由于cTnI参与炎性反应的发生，ZHANG等[20]的研究报道显示，cTnI能够活化肿瘤坏死因子-α(TNF-α)信号通路，由于TNF-α信号通路下游靶基因为白细胞介素和肿瘤生长因子等，因此在缺氧缺血性脑病患儿血清cTnI水平升高会活化TNF-α信号通路，进而促进炎性反应的发生。白细胞介素和肿瘤生长因子等作用于组织细胞，并引起组织细胞损伤，导致局部组织坏死。随着血清cTnI水平升高，心脑血管组织坏死程度也随之增加，患儿病情逐渐加剧[21]。同时GU等[22]的研究发现，cTnI水平异常升高会抑制腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)信号通路的活化，因此，在缺氧缺血性脑病患儿中血清cTnI水平异常升高会抑制AMPK信号通路，引起患儿神经元细胞糖代谢异常，进而导致神经元细胞损伤和凋亡，使患儿病情加剧。本研究进一步分析发现，cTnI水平升高也会引起患儿的神经功能损伤。分析其原因可能是由于cTnI水平升高会促进炎症因子的释放，导致患儿脑部炎性反应的发生。已有研究结果显示，脑部炎性反应的发生与神经元坏死之间存在正相关性[23]，因此，缺氧缺血性脑病患儿的脑部炎性反应会促进神经元细胞凋亡，导致患儿的神经功能损伤。

同时，本研究发现CK-MB参与缺氧缺血性脑病的发病过程，与患儿病情严重程度关系密切，并且与患儿的神经功能损伤密切相关。分析其原因可能是由于脑组织发生缺氧缺血性损伤时，CK-MB大量释放至脑部内环境中。EL-MENYAR等[24]的研究结果显示，CK-MB能够插入到神经元细胞膜上，并促进神经元细胞的损伤，同时抑制神经元的自我修复和再生功能，因此，缺氧缺血性脑病患儿血清CK-MB水平升高会促进脑部损伤。同时，已有研究结果显示，CK-MB能够抑制细胞内的脂质代谢和糖代谢过程[25]，因此，缺氧缺血性脑病患儿血清CK-MB水平升高会抑制神经元细胞的脂质代谢和糖代谢过程，使神经元细胞的增殖和修复功能下降，导致患儿病情加剧。同时，LI等[26]的研究结果显示，CK-MB是丝氨酸-苏氨酸激酶(AKT)信号通路的下游靶基因，缺氧缺血性脑病发病过程中可能诱导AKT信号通路的活化，进而促进CK-MB的表达，使患儿血清CK-MB水平升高。

本研究结果还显示，血清sLOX-1、cTnI和CK-MB联合诊断缺氧缺血性脑病新生儿的价值较高，ROC曲线下面积为0.879，灵敏度和特异度分别为87.26%和83.79%，明显优于sLOX-1、cTnI和CK-MB单独检测的价值。提示检测新生儿血清sLOX-1、cTnI和CK-MB水平可作为诊断缺氧缺血性脑病的重要生化标志物。

综上所述，缺氧缺血性脑病新生儿血清sLOX-1、cTnI和CK-MB水平异常升高，并且随患儿病情加剧逐渐升高。血清sLOX-1、cTnI和CK-MB水平与NBNA评分均呈负相关，在缺氧缺血性脑病的诊断和治疗中具有一定临床价值。