沈阳市首起黑天鹅H5N6高致病性禽流感疫情诊断与应急处置

齐景文，吴 靖，依颖新，杨蕴力，吴佳宁，曾庆南，宋如斌，李 祺

（沈阳市动植物及产品检验监测中心，辽宁沈阳110031）

高致病性禽流感是由A型流感病毒引起的鸡的急性、热性、高度接触性传染病，被世界动物卫生组织定为A类传染病，被我国定为一类传染病。自1996年我国首次发现高致病性禽流感以来，H5亚型禽流感病毒传播和流行区域逐渐扩大。随着病毒不断变异升级，疫情趋于复杂化，严重影响我国禽业养殖及畜产品安全。H5N6亚型禽流感病毒是H5N1和H6N6禽流感病毒重配整合形成的流感病毒，对水禽有较高致病力。2013年之前，家禽感染的禽流感病毒类型多以H5N1禽流感病毒为主，2013年出现家禽感染H5N6亚型禽流感，2014年发现首例人感染H5N6亚型禽流感病例[1-2]。

2021年4月8日，沈阳市动植物及产品检验监测中心（简称中心）接到和平区市场监管事务服务与行政执法中心报告，在和平区长白街河堤西路的长白岛森林公园有10只黑天鹅、1只大雁死亡。中心组织专家组前去调查处置和现场采样。4月9日，经市级和省级动物实验室检测，诊断病症疑似H5亚型高致病性禽流感。4月10日，经国家禽流感参考实验室病毒分离鉴定，确定病症为H5N6亚型高致病性禽流感。紧急流行病学调查发现，此次禽流感病毒很可能由迁徙候鸟引入，公园鸟类未及时开展免疫，鸟类体内抗体水平低是疫情暴发的内源因素。

1 流行病学调查

1.1 地理位置勘查

长白岛森林公园位于浑河南堤（东经：123°22′45.31″，北纬：41°44′48.73″），占地面积10 000 m2。疫点位置卫星图见图1。由图1可知，公园紧邻浑河，浑河水面宽阔、两岸植被丰富，森林覆盖度80%，是迁徙野鸟的落脚点，也是过冬野鸟栖居地。公园属于景区，游客较多，周围8 km范围内没有家禽养殖场和活禽交易市场，近1年内未从外地引入活禽。

1.2 动物养殖情况

森林公园内养殖观赏鸟类8种，共280只，其中，黑天鹅117只、白天鹅7只、赤麻鸭29只、珍珠鸡9只、孔雀15只、鸵鸟10只等。除禽类外，还有羊驼4只、驼羊2只、鹿12只、骆驼4只、矮马6只、牦牛2只、羊15只、猴子25只等。今年未进行禽流感免疫。

2 发病经过

4月6日，个别黑天鹅出现打蔫现象，当天有3只黑天鹅死亡，7日有2只黑天鹅死亡。截至目前，共死亡黑天鹅10只、大雁1只。

3 临床剖检结果

共剖检黑天鹅2只，黑天鹅肝脏、胰脏剖检情况见图2、图3。由图2可知，剖检可见黑天鹅肝脏病变明显，肝脏肿大、两侧大小不一致、表面呈黄白色、内部有纤维化病变。由图3可知，黑天鹅气管充血、胰脏表面有坏死灶、直肠大面积出血。其他器官未见明显变化。

4 实验室检测结果

4.1 样品采集

采集死亡黑天鹅组织脏器（心、脑、肺、脾）2份及其生活环境样品（粪便、土壤、饲料、饮水）15份。病毒采样管冷藏保存，2 h内送至沈阳市动植物及产品检验监测中心实验室。

4.2 实验室检测

采用荧光定量PCR方法进行禽流感通用型及H5亚型、H7亚型、H9亚型病毒核酸检测[3]。采用kingfisher核酸自动提取仪和ABI7500实时荧光定量PCR仪检测。核酸检测试剂盒购自郑州中道生物技术有限公司，反应体系及参数参照试剂盒说明设置。

4.3 禽流感核酸检测统计（见表1）

禽流感通用型核酸检测阳性4份，其中组织2份，粪便2份。经分型检测，H5亚型流感核酸检测阳性3份，组织1份、粪便2份；H7、H9亚型流感核酸检测均为阴性。高度疑似禽流感H5亚型禽流感。

4.4 病例确诊

经国家禽流感参考实验室进行病毒分离鉴定，最终确定为H5N6亚型高致病性禽流感疫情。

5 疫源分析

每年春秋两季，有大批候鸟进行有规律的迁徙，往返于繁殖区和越冬区，候鸟会在途经地选择水源充足，植被覆盖度较高的地点采食休息，留下粪便。长白岛森林公园所处的浑河南堤是俄罗斯西伯利亚迁徙野鸟的落脚点，也是过冬野鸟的栖居地。野鸟体内常携带禽流感病毒，推测本次疫情由迁徙野鸟带毒传入的可能性最大。近几年暴发多起家禽及野生鸟类高致病性禽流感疫情。这些地区多数位于候鸟迁徙路线上，且H5N6亚型禽流感病毒更易感染野生水禽，由野生水禽携带跨区域传播[4-5]。

比对疫情发生时间与空间，本次H5N6亚型禽流感疫情出现在春季，与野生鸟类迁徙时间一致；疫点处于候鸟迁徙路线上，空间上一致[6]。此外，疫点、疫区和受威胁区周边3 km范围内，家禽养殖量极少，没有活禽交易市场。因此，家禽感染风险低，疫情扩散风险极低，说明本次疫情的发生应该与野生鸟类迁徙密切相关。

6 疫情处置

划定长白岛森林公园为疫点，疫点向外周围3 km范围内划为疫区，以疫区边缘向外延伸5 km为受威胁区。

按照《高致病性禽流感疫情应急实施方案》（2020年版）,在4月12日启动Ⅳ级疫情响应，对公园内饲养的所有禽类进行扑杀无害化处理，颁布封锁令。疫情封锁期间疫点、疫区内的观鸟通道禁止任何人员、车辆进出；设置多处消毒点和警示标识，对进出人员、车辆、物品等严格消毒，禁止载有畜禽等易感动物的车辆进出；在疫区、受威胁区禁止交易禽类及相关产品；继续加强疫点管制和消毒工作；加强对疫区和受威胁区内野生禽类巡查，发现异常立即按照国家规定进行上报及处置；依法做好疫区封锁、隔离、管控等工作，依法维护景区管理制度及秩序。

7 结论

本次疫情是沈阳市首起黑天鹅H5N6亚型高致病性禽流感疫情。疫情发生后，沈阳市政府及相关机构迅速采取封锁、消毒、扑杀、紧急免疫等应急处置措施，使疫情得到有效控制，避免疫情扩散。结合现场勘察排查和风险评估，推测这次疫情由携带病毒的迁徙野鸟传入。本次疫情警示，在野鸟迁徙季节，要切实加强禽流感监测和强制免疫工作，高度重视动物园及其附近场所珍稀禽类的免疫，以降低疫情发生风险。