葡萄渣粉对高温期蛋鸡生产性能、血清生化指标和抗氧化能力的影响

周业飞，周梅仙，王祥雷

（1.南京晓庄学院食品科学学院，江苏南京 211171；2.南京市溧水区春神养鸡专业合作社，江苏南京 211299）

高温是引起蛋鸡机体应激的主要因素之一，可引起蛋鸡直肠温度升高、血浆肌酸激酶活性升高、血浆三碘甲状腺素水平降低等一系列生理代谢变化，严重影响蛋鸡采食量和饲料转化效率，降低产蛋率、产蛋量、蛋品质和蛋壳强度[1]。此外，高温还可导致蛋鸡血浆中丙二醛（MDA）水平升高，引起氧化应激，进而引起脂质过氧化和细胞膜氧化损伤，从而导致鸡蛋品质明显受损[2]。因此，如何避免和改善高温对蛋鸡的有害影响成为动物营养工作者重要的任务。在实际生产中，除了改善蛋鸡饲养管理环境，在蛋鸡日粮中添加维生素、植物提取物和益生菌等功能性饲料添加剂来部分减轻高温对蛋鸡的损伤也是常用策略。

葡萄渣粉（Grape Pomace Flour，GPF）是葡萄皮、籽、茎等提取加工后的副产品，富含酚类、黄酮类、花青素和儿茶素等有益成分，还含有白藜芦醇、木犀草素、槲皮素和山柰醇等高抗氧化物质，具有抗氧化、抑菌、抗肿瘤等作用[3-4]。研究发现，在肉鸡日粮中添加适量的GPF 可显著降低肉鸡脂质氧化，提高回肠有益菌群数量[5]。在蛋鸡日粮中添加白藜芦醇可显著提高蛋鸡的产蛋性能和抗氧化防御系统相关的酶活性[6]。因此，本研究旨在评价高温时蛋鸡日粮中添加GPF 对蛋鸡的产蛋性能、蛋品质和抗氧化能力产生的影响，为GPF 在蛋鸡养殖中应用及研究提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 试验设计与饲养管理 选取576 只58 周龄、平均产蛋率（84.13±1.56）%、平均体重（1.96±0.74）kg 商品代海兰褐蛋鸡，由南京市溧水区春神养鸡专业合作社提供。动物经过14 d 的适应期后，采用完全随机设计，将动物分为4 个处理组，每个处理12 个重复，每个重复12 只。对照组饲喂产蛋期基础日粮，试验组分别在基础日粮中添加1%、1.5% 和2% GPF（GPF 由南京泽朗生物科技有限公司加工制作，主要营养成分为干物质 35.49%，粗蛋白质 8.13%，粗灰分 9.61%，粗脂肪 7.29%，中性洗涤纤维 45.24%，酸性洗涤纤维 35.04%））。采用层叠笼饲养方式，每天日光灯照明16 h。每天08:00、17:00 各饲喂1 次，试验蛋鸡等量给食，自由采食、饮水。每天观察各组试验鸡采食、排粪、发病及死亡情况。试验期间温度变化范围为32～ 37℃，预试期2 周，正试试验期8 周。基础日粮组成及营养成分见表1，试验期日粮中不添加任何生长促进剂或抗生素。

表1 产蛋期蛋鸡基础日粮组成及营养成分

1.2 测定指标与方法

1.2.1 产蛋性能 在60～68 周试验期间每天定时捡蛋，以重复为单位，记录每天喂料量、产蛋数、蛋重、破软蛋数和死亡数，计算每重复产蛋率、平均蛋重、破软蛋率和死淘率，日产鸡蛋重量是通过平均鸡蛋重量乘以产蛋率计算。每隔7 d记录一次饲料消耗量并计算饲料转化率，饲料转化率以每产1 g 鸡蛋所消耗的饲料克数表示。

1.2.2 鸡蛋品质 分别在第64 周和第68 周，从每个试验处理随机收集36 个鸡蛋（每个重复3 个鸡蛋）测定鸡蛋质量指数来确定鸡蛋品质参数。蛋形指数和蛋壳强度分别用蛋形测定仪和蛋壳强度测定仪测定；用游标卡尺分别测量蛋壳厚度以及蛋黄高度和蛋黄直径，精确至0.02 mm，计算蛋黄系数，蛋黄系数=蛋黄高度/蛋黄直径×100%。将蛋清和蛋黄完全分离，将蛋黄放到滤纸上吸去多余蛋清后收集蛋黄称取重量，计算蛋黄相对重，蛋黄相对重=蛋黄重/全蛋重×100%；多功能蛋品质自动分析仪测定哈氏单位。

1.2.3 血清生化指标 分别在64 周和第68 周，每个处理随机选择24 只鸡（每个重复2 只），用消毒过的针头和注射器从翅静脉抽取血液，室温下4 000×g 离心10 min。收集血清-20℃保存，备用检测。采用全自动生化分析仪测定总蛋白含量、白蛋白、球蛋白、尿酸、总胆固醇和甘油三酯。按试剂盒（南京建成生物工程研究所）操作步骤进行测定。

1.2.4 抗氧化水平和活性 抗氧化水平指标包括血清谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性、总抗氧化能力（T-AOC）、谷胱甘肽S-转移酶（GST）、超氧化物歧化酶（SOD）活性、过氧化氢酶（CAT）和丙二醛（MDA）含量，并严格按照试剂盒（南京建成生物工程研究所）操作规程进行。

1.3 统计分析 数据处理和显著性分析采用SPSS 17.0 软件中ANOVA 模型进行单因素方差分析，采用LSD 法进行多重比较，数据以平均值±标准差表示。

2 结果与分析

2.1 日粮中添加GPF 对蛋鸡生产性能的影响 由表2 可见，在试验期的大部分时间里，蛋鸡表现出两喙张开，伸颈呼吸，饮水量增加，鸡群不够活跃等热应激的行为。试验处理组蛋鸡生产性能各项指标虽呈一定的变化趋势，但差异不显著。在试验1～4 周和5～8 周，1.5%和2% GPF 组的鸡蛋破损率显著低于对照组。

表2 日粮中添加GPF 对蛋鸡生产性能的影响

2.2 日粮中添加GPF 对鸡蛋品质的影响 从表3 中看出，在蛋鸡第64 周和第68 周时，1.5% 和2% GPF 组蛋壳强度和蛋黄系数显著高于对照组和1% GPF 组。在蛋鸡日粮中添加GPF 后虽然蛋形指数、蛋壳厚度、蛋黄相对重和哈氏单位在数值上呈增加趋势，但与对照组无显著差异。

表3 日粮中添加GPF 对鸡蛋品质的影响

2.3 葡萄渣粉对蛋鸡血清生化指标的影响 从表4 可看出，在蛋鸡第68 周时，与对照组和1% GPF 组相比，1.5%和2% GPF 组血清总蛋白、球蛋白、尿酸和总胆固醇显著降低。但各处理组血清白蛋白和甘油三酯差异不显著。

表4 日粮中添加GPF 对蛋鸡血清生化指标的影响

2.4 葡萄渣粉对蛋鸡血清抗氧化能力的影响 从表5 可看出，在蛋鸡第68 周时，GPF 组血清GSH-Px 和T-AOC活性均显著高于对照组；第64 周时，1.5%和2% GPF组血清T-AOC 显著高于对照组；第68 周，1.5%和2% GPF 组血清SOD 和CAT 活性显著高于对照组和1% GPF 组，血清MDA 水平显著低于对照组和1% GPF 组。各处理组间血清GST 活性差异不显著。

表5 日粮中添加葡萄渣粉对蛋鸡血清抗氧化能力的影响

3 讨 论

本研究中，高温期内，虽然在蛋鸡日粮中添加GPF 后蛋形指数、蛋壳厚度、蛋黄相对重和哈氏单位在数值无显著差异，但显著降低了鸡蛋的破损率，推测饲喂了GPF 后能通过调节蛋鸡体内代谢，提高血浆钙水平，增强蛋壳强度[7]，具体机制有待于进一步研究。本研究中蛋黄系数增加也进一步证实了饲喂GPF 提高了蛋鸡机体的营养物质代谢，有效促进了卵泡发育[8]。

本试验中，在蛋鸡日粮中添加GPF 可显著降低血清总蛋白和球蛋白水平，这与Magbolah 等[9]用白葡萄籽饲喂大鼠的试验结果相似。由于球蛋白含量降低，GPF 处理组蛋鸡血清总蛋白水平均较低。这些结果可能与GPF 中含有的白藜芦醇改善了免疫和抗炎反应有关，因为血清球蛋白水平的提高通常发生在对损害免疫系统的病原体和应激条件的反应中。从这个意义上说，Fu等[10]报道，使用白藜芦醇14 d 能显著提高仔猪的免疫和抗炎反应，白藜芦醇不仅可以作为疫苗佐剂来增强疫苗抗原的免疫反应，还可以作为饲料添加剂增强动物体液和细胞免疫反应。

高温期间，在蛋鸡日粮中使用GPF 后可以显著增强蛋鸡的抗氧化反应和降低血清中的氧化剂MDA 水平，这与Kara 等[11]在蛋鸡中试验结果报道相一致。众多学者研究表明，葡萄和葡萄产品（葡萄汁、葡萄酒和糖蜜等）及其副产品（葡萄果渣和种子等）的抗氧化特性可能与它们含有的酚类化合物有关，在体内可清除自由基，与金属离子形成螯合物，从而防止或减少单态氧的产生[12-13]。在饲喂GPF 后，蛋鸡血清中GSH-Px、T-AOC和SOD 活性显著性提高，表明机体抗氧化防御机制体系得到显著改善，这可能与存在多酚类物质（如白藜芦醇）有很大联系，其作用机理主要是清除体内自由基、过氧化氢等氧化剂，启动过氧化反应，减少过量O2浓度和抑制过氧化形成[14]。此外，增加血清抗氧化物水平有助于降低蛋黄脂质过氧化，因为大量过氧化反应会使抗氧化剂大量积累到蛋黄中，从而导致鸡蛋的味道发臭，降低鸡蛋的感官和营养质量。

4 结 论

本研究结果表明，在高温期间，在蛋鸡日粮中使用GPF 具有实际应用价值，不仅可以生产出品质更好的鸡蛋，而且可以刺激蛋鸡提高抗氧化防御体系，对动物健康具有保护作用；GPF 还可以降低鸡蛋的脂质过氧化，提高抗氧化水平，有助于改善鸡蛋质量。