气相色谱法测定农产品中有机磷农药残留量

苏文贵，祝春梅，孙立荣

（1.奇台县公共检验检测中心，新疆奇台 831800；2.奇台县农业技术推广中心，新疆奇台 831800）

有机磷农药是一种广谱类化学杀虫剂，广泛应用于农业生产过程中[1]，能够有效提高农作物产量，但如果使用不当，则会造成食用农产品中农药残留，从而影响到消费者健康[2]，同时也会造成环境污染等一系列问题[3]。目前，常用于农药残留检测的方法主要有气相色谱法[4-6]、液相色谱法[7]、液相色谱-质谱联用[8]和气相-质谱联用[9]等方法，其中气相色谱法因其选择性高、灵敏度高、操作简单等特点而广泛使用[10]。近年来，气相色谱技术取得了飞速发展，能够支持多通道检测与分析[11]，气相色谱法测定农产品中有机磷农药残留的原理简单来说是以高纯氮气作为流动相，被测物质通过高温气化进入特定的毛细管填充柱，被测物质中不同的化合物理化性质不同，与毛细管制柱中的填充物相互作用，各组分在毛细管柱中的流动速度不同，从而实现多种混合物的分离，根据有机磷标准物质的保留时间确定被测物质中相应的化合物，利用火焰光度检测器（Flame Photometric Detector，FPD），根据出峰高度及峰面积进行定量分析。基于此，本研究通过气相色谱技术对奇台县常见农产品中有机磷农药残留进行检测，进而对其进行质量监控，为农产品健康绿色生产提供技术支持。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

乙腈（分析纯）；丙酮（色谱纯）；氯化钠（分析纯）；马拉硫磷、乐果、二嗪磷、特丁硫磷、磷胺、杀螟硫磷、倍硫磷、毒死蜱和杀扑磷农药标准品均购自北京德威钠生物科技有限公司。

1.2 仪器与设备

GC-2014C气相色谱仪，配制自动进样器及火焰光度检测器（FPD），日本岛津仪器有限公司；快速混匀器，江苏金怡仪器科技有限公司；电子天平，上海菁海仪器有限公司；氮吹仪，上海析安谱实验科技股份有限公司；内切式匀浆机，广州仪科实验室技术有限公司。

1.3 试验方法

1.3.1 标准工作液制备

取出冷藏的马拉硫磷、乐果、二嗪磷、特丁硫磷、磷胺、杀螟硫磷、倍硫磷、毒死蜱和杀扑磷农药标准品，将9种标准品安培瓶在室温环境中静置20 min，摇匀后分别准确移取1 mL标准品定容至10 mL容量瓶中，摇匀，得到10 μg/mL混标储备液，在10 μg/mL混标储备液基础上进行逐级稀释，浓度由高到低，最终配制出浓度为0.2 μg/mL、0.4 μg/mL、0.6 μg/mL、0.8 μg/mL 和 1.0 μg/mL 的混合标准曲线系列溶液。

1.3.2 样品前处理

分别将苹果、西葫芦、平菇等样品粉碎处理，准确称取各样品25.0 g于烧杯中，加入50.0 mL乙腈，在匀浆机上高速匀浆2 min，用滤纸过滤到装有5～7 g氯化钠的100 mL具塞量筒中，盖上塞子剧烈摇晃1 min，在室温下静置30 min分层后，备用。

1.3.3 样品净化

准确移取上层清液10.00 mL于试管中，上氮吹仪吹干（不宜吹太干），然后加入2 mL丙酮，在快速混匀器上充分混匀1 min，用约3 mL丙酮分3次冲洗，最后定容至5.0 mL，快速混匀器充分混匀，用2 mL注射器吸取充分混匀的溶液1 mL，过膜，移入气相色谱进样瓶中，用于气相色谱分析。

1.3.4 色谱条件

色谱柱：DB-1毛细管色谱柱（30 mm× 0.25 mm×0.25 μm）。气化室温度：220 ℃，不分流进样，进样量1 μg/mL；程序升温：初始温度90 ℃，保持2.0 min，以8 ℃/min升至150 ℃，保持2.0 min，以8 ℃/min升至250 ℃，保持8.0 min；流速：1.38 mL/min；进样量：1 μL；检测器温度：250 ℃，尾吹气流量为3 mL/min。

2 结果与分析

2.1 定性分析

在相同气相色谱条件下单独对9种有机磷农药标准溶液进行检测，记录每种有机磷农药的色谱峰保留时间，以此为对这9种有机磷农药检测的定性依据。再采用丙酮对上述混合标准物进行稀释，使得各成分浓度均为1.0 μg/mL，制备标准工作液，按照1.3.4所述的色谱条件进行检测，结果如图1所示，由于磷胺有顺、反两种异构体，且磷胺一般都是2种异构体的混合物，所以磷胺分别在16.967 min和18.846 min出现2个色谱峰，本次定性实验中9种有机磷农药的保留时间相差较大，各组分得到很好的分离，有利于进行定性分析，也适用于利用混合标准溶液进行定性分析。

图1 有机磷农药混合标准品色谱图

2.2 定量分析

在上述所建立的方法基础上，采用标准曲线法对9种有机磷农药残留量进行定量分析。分别配制9种有机磷农药的标准溶液，确定进样浓度范围为 0.01 ～ 1.00 μg/mL，浓度点分别为 0.2 μg/mL、0.4 μg/mL、0.6 μg/mL、0.8 μg/mL 和 1.0 μg/mL， 并进行气相色谱检测，以目标检测物色谱峰面积及其对应标准物浓度为依据，绘制标准曲线，见表1。研究发现，在0.01～1.00 μg/mL浓度范围内，待测物线性关系良好（0.990 6～0.999 6），能够较好满足检测需求。

表1 待测农药的线性方程及相关系数

2.3 加标回收试验与精密度检测

加标回收率可以反映样品在整个实验流程中的损失程度，回收率越高，证明被测组分的损失少，实验分析结果就更接近真实值。农药残留检测过程常用样品加标回收进行质量控制。为了对该方法的回收效率及精密度进行验证，选择已测定的不含这9种目标有机磷农药残留的蔬菜样本黄瓜为背景，分别加入9种有机磷农药残留浓度为0.4 μg/mL、0.6 μg/mL的工作液，充分混匀后按照本试验建立的方法进行检测，每个浓度重复测定6次，并计算各待测样本的回收率及精密度，结果见表2。9种有机磷农药的加标回收率为70.1%～117.1%，精密度为0.5～3.6，回收率与精密度均符合痕量检测分析的相关要求，能满足对于农药残留检测的需求。

表2 待测农药的加标回收率与相对偏差表

2.4 样品检测

根据市场需求，采用本研究所确立的检测方法，对奇台县常见的水果、蔬菜、食用菌等农产品进行9种有机磷农药残留量检测，并进行定性与定量分析，结果显示，所检测的农产品无有机磷农药残留，在今后的研究中将加大样本量进行检测，并对试验条件进行进一步优化。

3 结论

采用气相色谱法测定有机磷农药残留，需要注意几个方面：①样品前处理后应在冷冻环境中密封保存运输，减少水分蒸发或引起变质；②提取过程需在通风橱中进行，以减少有机溶剂对实验人员造成危害；③氮吹浓缩不能吹太干，吹太干会导致回收率大幅降低，影响检测结果。

本研究以奇台县常见农产品为对象，采用气相色谱法对9种有机磷农药残留进行测定，该方法在农药残留量检测方面具有精密度好、回收率高的特点，农药检测结果良好，满意度高，适用于水果、蔬菜、食用菌中这9种有机磷农药残留的检测，能够有效提高检测的效率，其他农产品也可参照该方法进行检测。