输血前Rh血型抗原与不规则抗体的检测

2022-03-31 08:51赵学礼
安徽医专学报 2022年1期
关键词:悬液血型抗原

赵学礼 杜 喆

ABO血型系统是输血领域最广泛也是最重要的血型系统,Rh血型系统次之,但Rh血型系统却是最复杂的血型系统,具有抗原多态性和免疫原性[1-2]。Rh血型系统有50个抗原,目前研究发现与输血密切相关的主要有5种,分别是D、C、c、E、e等抗原,这5种抗原组合成18种不同的Rh血型分型。国家标准严格规定Rh系统的D抗原作为输血前常规检查,基本避免了Rh(D)阴性的患者输Rh(D)阳性的血,因为D抗原同型输血原则,所以近年来关于抗体D的报道逐渐减少[3]。由于Rh血型系统的C、c、E、e等抗原目前大多数采取随机输血原则,导致抗C、抗c、抗E、抗e等抗体产生的报道时有发生,因此临床输血Rh血型抗原的检测和同型输注应该引起重视以保证输血安全。为了解Rh血型抗原检测在输血中的重要性,选择3200例输血和备血的住院患者进行Rh抗原检测,另外对45例不规则抗体筛查试验阳性的输血患者进行不规则抗体鉴定。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集本医院2018年1月-2019年10月期间输血和备血的住院患者3200例,进行Rh抗原D、C、c、E、e的检测,年龄3~82岁,平均年龄(43.56±11.5)岁。另外收集本医院2018年1月-2020年7月不规则抗体筛查阳性的输血患者45例,进行不规则抗体鉴定,年龄4~78岁,平均年龄(46.7±12.3)岁。

1.2 纳入和排除标准 ①纳入标准:患者经检查确诊,均需要备血或具有临床输血治疗的指征;患者临床资料完整;患者精神状态正常,能够配合本研究;患者知情同意并签署知情同意书。②排除标准:门诊患者或患者临床资料不完整;患者2周内服用免疫抑制剂、激素类药物影响检查结果的判断;凝血功能障碍及伴发其他血液系统疾病的患者;严重心、肝、肾功能不全患者及恶性肿瘤患者。

1.3 试剂与仪器 本研究使用试剂和仪器包括不规则抗体鉴定细胞(上海血液生物医药责任有限公司),Rh血型分型微柱凝胶卡(江阴力博生物技术有限公司),抗人球蛋白检测卡(长春博讯生物技术有限公司),TD—3A型血型血清学用离心机(长春博研科学仪器有限责任公司),FYQ型免疫微柱孵育器(长春博研科学仪器有限责任公司)等。

1.4 方法

1.4.1 Rh抗原检测 ①红细胞悬液的制备:将待检者的血液样本按3000 rpm、2 min离心制备成红细胞样本,用加样枪在压积红细胞中层量取10 μL压积红细胞加入至1 mL生理盐水中,配置成0.8%~1%浓度的红细胞悬液,②取Rh血型分型检测卡(柱凝集法)一卡,进行标记,1~6孔中加入待检者0.8%~1%红细胞悬液50 μL,将微柱凝胶卡垂直竖立,轻敲混匀加样槽中的红细胞悬液。③即刻使用专用血清学离心机离心5 min。④离心结束后,取出观察判定结果,登记结果。

1.4.2 不规则抗体鉴定 将谱细胞(10套鉴定细胞)分别配置成浓度为0.8%~1%的红细胞悬液;抗人球蛋白检测卡的十个凝胶微管标号,每个微管用加样枪加50 μL配置的红细胞悬液,再将分离好的待检者血浆加入1到10孔微管,每孔50 μL;微柱凝胶卡放入免疫微柱孵育器孵育15 min,即刻使用专用血清学离心机离心5 min,读结果,对照红细胞血型抗体鉴定细胞反应格局表判定抗体。

1.5 统计学方法 应用SPSS 19.0统计学软件处理数据,所得计数资料[率(%)]做统计描述。

2 结 果

2.1 Rh血型系统D、C、c、E、e抗原表型分布情况分析 用血清学方法对3200例样本进行Rh血型系统D、C、c、E、e抗原检测。Rh血型CcEe抗原阳性率:C抗原阳性率90.00%,c抗原阳性率55.19%,E抗原阳性率46.19%,e抗原阳性率93%。见表1。

表1 3200例样本Rh血型系统抗原分布 例(%)

2.2 不规则抗体鉴定结果分析 对45例不规则抗体阳性的患者进行不规则抗体鉴定,Rh血型系统抗体检出率分别为:抗E(35.56%),抗D(8.89%),抗c(4.44%),抗Ec(8.89%),抗e(2.22%),其中抗E检出率最高。初步解释为人群Rh(E)血型抗原阴性率较高,随机输入含Rh(E)血型抗原的血可能性大容易产生抗体。结果见表2。

表2 不规则抗体鉴定分布情况分析 例(%)

3 讨 论

随着社会的迅猛发展,医疗技术的不断提升,输血技术在临床疾病治疗方面获得了广泛的应用和发展,尤其在急重症患者的急救和治疗方面发挥了极大的作用。血型抗体分天然抗体和免疫抗体,免疫抗体产生的特点是首次受到外界抗原刺激产生少量抗体,当再次碰到以往接触过的同种抗原时,机体针对该抗原产生比初次更为强烈和迅速的免疫反应,并产生大量的抗体[4-5]。Rh血型系统抗体属于免疫抗体,其主要通过输血或者妊娠刺激产生[6],临床上此系统抗体较容易引起输血反应或新生儿溶血病。目前越来越多的患者不规则抗体阳性引起交叉配血不合,说明输血前只常规进行ABO和RhD检测是不够的,还应对患者进行Rh血型抗原CcEe检测,施行Rh血型抗原相合输血原则。

本研究中,3200例住院患者Rh血型抗原阳性率分布如下:D抗原阳性率(99.56%),C抗原阳性率90.00%,c抗原阳性率55.19%,E抗原阳性率46.19%,e抗原阳性率93%。E、e、C、c四种抗原中E抗原阳性率最低为46.19%,c抗原阳性率略高于E抗原阳性率,为55.19%,这与阳志勇等[3]报道的基本一致。目前,D抗原已经是输血前常规检查,Rh(D)阴性患者基本都实行同型输注或自体输血,特别是反复输血的RhD阴性患者和需要输血的RhD阴性女性更重视RhD同型输注。E、e、C、c等抗原的阳性率明显低于D抗原阳性率,随机输血时更容易产生抗体,如果输血前只进行D抗原检测,那么终将会给输血带来困扰。目前,国内大多数医院对E抗原和c抗原都是采用随机输血原则,不对E和c等抗原进行特别甄别。本院统计的E抗原、c抗原阳性率大概都在50%左右,E抗原和c抗原阴性的患者随机输血时输入含有对应抗原的概率较大,邱芳等[7]报道E抗原和/或C抗原阴性患者随机输血输入对应抗原阳性血液概率是45.82%;文献报道[8],Rh血型系统中,抗原的强弱顺序依次为D、E、c等,可知E、c抗原阴性患者采用随机输血的方式时产生抗E和抗c的可能性很高[9],这与Gupta K P等[9]和阳志勇等[3]的报道一致。e抗原阳性率(93%)和C抗原阳性率(90%)都比E和c的阳性率高很多,关于其抗体的报道就比后者少。由此可得患者输血前应进行E、e、C、c等抗原检测,尤其是Rh(E),Rh(c)的同型输血更值得被关注。

本研究中45例患者不规则抗体鉴定结果中Rh系统的抗体有27例,占60%。这些患者主要分布在频繁输血的科室,由此可以初步判定多次随机输血的患者更容易产生Rh血型系统抗体。45例抗体中抗E占比最高,为35.56%,这证明患者随机输血时容易产生抗E抗体。如遇到Rh系统抗体阳性输血患者,配血的困难在于:①库存量需要足够大才有可能筛选出合适的血液,耗时、耗材、耗人力。②有些患者不规则抗体较弱交叉配血被遗漏,输血有风险。③对于紧急输血患者在没有提前告知的情况下将耽误输血时机。因为本市血站近几年血液供应持续紧张,输血科库存量少,盲目配血更不可取,所以输血前对患者和献血者进行Rh血型抗原检测,输血时Rh血型抗原相匹配输注,从源头上减少输血患者Rh血型系统抗体的产生显得更为重要。

综上分析,输血前进行Rh血型抗原检测具有重要意义。调查显示,目前已经有少数医院和血站把Rh血型抗原E、e、C、c等作为常规检测,由于经济和医疗水平限制,全面开展E、e、C、c抗原检测还需要些时间。抗E和抗c是引起输血溶血反应的重要原因,如果把E抗原和c抗原作为患者血型的常规检查,让Rh(E)、Rh(c)同型输血,将会减少抗E或抗c的产生,这在输血中也具有重大意义。随着医疗和经济水平发展,精准输血越来越被重视,Rh血型抗原检测会在更多的医院和血站开展,最终实现更科学、更安全的输血。

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