刺梨及其活性成分对2型糖尿病小鼠糖脂代谢的影响

陈 超，谭书明，王 画，杨 笙，代晓桐

（贵州大学酿酒与食品工程学院，贵州省农畜产品贮藏与加工重点实验室，贵州 贵阳 550025）

2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus，T2DM）是一类由于摄入过多高糖高脂食品、缺乏运动导致的胰岛素抵抗和胰岛B细胞功能缺陷的代谢性疾病。据国际糖尿病联盟报道，自2015年以来全球患糖尿病的人数已达到4.25亿，预测到2045年将达到7亿，其中我国患者已达1.1亿，居世界首位。目前一些降血糖药物可能引起不同的副作用，如二甲双胍、瑞格列奈会造成恶心、呕吐，阿卡波糖会造成胃疼等，从植物中提取天然降血糖活性成分代替人工合成同类物质，可提高安全性，降低副作用。

刺梨（Tratt）广泛分布于西南地区，其中以贵州为主，是一种蔷薇科野生植物。刺梨中含有丰富的黄酮和多糖。黄酮、多糖具有抗氧化、降血糖、降血脂等功能活性；孔晓妮等研究发现翻白草总黄酮能通过磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶（phosphatidylinositol 3-kinase/protein kinase，PI3K/Akt）途径改善T2DM小鼠糖脂代谢紊乱和胰岛素抵抗；杨玉玲等研究发现洋甘菊总黄酮能降低T2DM小鼠血糖水平、促进胰岛素分泌、改善糖耐量异常；王生亚等研究发现青稞多糖能改善T2DM小鼠氧化应激、修复胰腺组织损伤；郎茜等研究发现杜仲叶多糖能改善T2DM大鼠胰岛素分泌不足、氧化应激并降低高血糖因子（Caspase-3、p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 mitogen-activated protein kinase，p38 MAPK））在肝脏中表达。本课题组前期研究发现刺梨原汁对改善糖脂代谢紊乱的效果良好，但刺梨中的活性成分对糖脂代谢影响的研究鲜有涉及，故本研究进一步探讨刺梨干粉（Tratt，RRT）、刺梨总多糖提取物（Tratt olysaccharide extraction，RPS）、刺梨总黄酮提取物（Tratt flavonoid extraction，RF）对T2DM小鼠糖脂代谢的影响。

1 材料与方法

1.1 动物、材料与试剂

60 只体质量为（20±2）g的健康雄性昆明小鼠由长沙市天勤生物技术有限公司提供，生产许可证号：SCXK（湘）2019-0014。小鼠饲养在通风良好、室温（23±2）℃、相对湿度45%～65%、12 h/12 h明暗交换的环境中，自由摄食饮水。

刺梨品种为‘贵农5号’，采摘于2020年9月上旬、贮存于-80 ℃环境，实验所用刺梨均为同一型号、同一批次，购自于贵州宏财聚农投资有限公司。

链脲佐菌素（streptozotocin，STZ） 美国Sigma公司；盐酸二甲双胍（纯度97%） 上海麦克林生化科技有限公司；纤维素酶（活力＞400 U/mg） 北京恒远博泰生物科技有限公司；总蛋白定量测试盒、甘油三酯（triacylglycerol，TG）测定试剂盒、总胆固醇（total cholesterol，TC）测定试剂盒、高密度脂蛋白胆固醇（high-density lipoprotein cholesterol，HDL-C）测定试剂盒、低密度脂蛋白胆固醇（low-density lipoprotein cholesterol，LDL-C）测定试剂盒、丙二醛（malondialdehyde，MDA）测定试剂盒、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）测定试剂盒、过氧化氢酶（catalase，CAT）测定试剂盒 南京建成生物科技有限公司；肝糖原测定试剂盒、葡萄糖激酶（glucokinase，GK）酶联免疫试剂盒、过氧化物酶体增殖物激活受体-γ（peroxisome proliferators-activated receptor-γ，PPAR-γ）酶联免疫试剂盒 上海侨杜生物科技有限公司。

1.2 仪器与设备

SpectraMax190连续波长多功能酶标仪 美国Molecular Devices公司；H1-16KR高速冷冻离心机 湖南可成仪器设备有限公司；DY89-II电动玻璃匀浆机 宁波新芝生物科技股份有限公司；YD-202组织切片机 浙江金华益迪医疗设备厂；LGJ-10真空冷冻干燥机 北京松源华兴科技发展有限公司；UV9000S紫外分光光度计上海元析仪器有限公司；RE-52AA旋转蒸发器 上海亚荣生化仪器厂；研磨仪 德国Janke & Kunkel公司；恒流泵 苏州辰傲电子科技有限公司。

1.3 方法

1.3.1 RRT、RPS、RF的制备

RRT：称取适量刺梨真空冻干72 h，高速研磨成干粉待用。

RPS：参考文献[5,20-23]的方法，取适量RRT按照料液比1∶15溶于超纯水，按RRT质量加入0.25%纤维素酶反应1 h后放入超声设备，功率300 W、温度50 ℃提取40 min，抽滤得澄清滤液，旋转蒸发干后加入无水乙醇，醇沉液置于4 ℃冰箱静置12 h后，4 ℃、8 000 r/min离心10 min，保留沉淀，沉淀加入超纯水配成6 mg/mL溶液；预处理D101大孔树脂后，称取适量大孔树脂装柱，将粗多糖水溶液按1.5 mL/min流速进样，加入超纯水洗涤至洗涤液无色为吸附完毕，加入体积分数70%乙醇溶液按照1.5 mL/min洗脱并收集洗脱液，经旋转蒸发、冻干得RPS待用。多糖标准曲线参考叶润等的方法绘制，标准曲线方程为＝0.252 5+0.014 9（＝0.997 1），经标准曲线方程计算得RPS中多糖质量分数为71%。

RF：参考文献[25-29]的方法，取适量RRT按照料液比1∶13溶于体积分数70%乙醇溶液中，按RRT质量加入0.25%纤维素酶反应1 h后放入超声设备，功率300 W、温度50 ℃提取40 min，抽滤得澄清滤液，滤液旋转蒸发冻干得黄酮粗提物；预处理AB-8大孔树脂，将适量大孔树脂填充到层析柱中，黄酮粗提物按照2.5 mg/mL溶于超纯水并微波5 min保证充分溶解，抽滤，滤液按1.5 mL/min流速进样，加入超纯水洗涤直至洗涤液透明无色为吸附完毕，将体积分数70%乙醇溶液按1.5 mL/min流速进样洗脱并收集洗脱液，旋转蒸发冻干得RF待用。黄酮标准曲线绘制参考周艺等的方法。经过测定，芦丁标准曲线方程为＝0.183 7+0.005（＝0.999 1），经标准曲线方程计算得RF中黄酮质量分数为51%。

1.3.2 动物分组与处理

动物实验经贵州大学动物实验伦理委员会批准（编号：EAE-GZU-2020-P010），符合动物实验伦理。基础饲料适应性饲喂1 周后，根据小鼠体质量随机分为空白组（＝8）和高脂高糖组（＝52），空白组喂普通饲料，高脂高糖组采用表1配方喂养4 周后，除空白组外，其余各组12 h禁食不禁水后注射50 mg/kgSTZ，每3 d注射1 次，注射3 次造模结束，造模期间自由饮食饮水，造模10 d后，禁食12 h剪尾采血，测定空腹血糖值（fasting blood glucose，FBG），高于11.1 mmol/L视为造模成功。造模成功后的小鼠分为5 组（＝8），分别为模型组、阳性组（灌胃200 mg/kg盐酸二甲双胍）、RRT组（灌胃400 mg/kgRRT）、RPS组（灌胃200 mg/kgRPS）、RF组（灌胃200 mg/kgRF）。将盐酸二甲双胍、RRT、RPS、RF按照纯度换算成净质量，分别溶于生理盐水配制灌胃溶液，根据小鼠体质量调整灌胃剂量，每日同时间灌胃，模型组与空白组灌胃等量生理盐水。空白组给予基础饲料，其他组给予高脂高糖饲料。实验期间小鼠自由饮食饮水，每周记录进食量、饮水量和体质量，干预周期28 d。

表1 高脂高糖饲料配方Table 1 Formulation of high-fat and high-sugar diet

第29天，小鼠禁食不禁水12 h，摘眼球取血于离心管中，3 500 r/min、4 ℃离心15 min，吸取上层血清置入新离心管中转入-80 ℃冰箱中待测。小鼠脱颈处死，迅速解剖去除肝脏、肾脏、脾、白色脂肪及棕色脂肪并准确称质量；白色脂肪位于腹膜内、肠系膜上、附睾周围及皮下，呈白色。棕色脂肪位于肩胛下、主动脉周围、纵膈及颈部组织，为暗红色小颗粒。用生理盐水洗去肝脏污血并将其等切分为6 份，5 份锡纸包裹放入液氮并迅速转入-80 ℃冰箱待测，1 份装入固定液中用于病理学观察。

1.3.3 指标测定

1.3.3.1 FBG的测定

分别在灌胃结束后的第0、7、14、21、28天，禁食不禁水6 h，剪尾采血，并使用血糖仪测定空腹FBG。

1.3.3.2 口服糖耐量测定

灌胃28 d后禁食不禁水12 h，6 组小鼠均按照2.00 g/kg剂量灌胃葡萄糖溶液，剪尾取血测量0、0.5、1 h和2 h时的血糖浓度。血糖曲线下面积（area under curve，AUC）根据公式（1）计算。

式中：、、和是灌胃葡萄糖溶液后0、0.5、1 h和2 h的血糖浓度/（mmol/L）。

1.3.3.3 脏器指数的测定

脏器指数根据公式（2）计算。

式中：为小鼠脏器质量/g；为小鼠体质量/g。

1.3.3.4 理化指标测定

血清中的TC、TG、LDL-C、HDL-C及肝脏中的MDA、CAT、SOD、肝糖原、GK、PPAR-γ水平测定均按照试剂盒说明书进行。

1.3.3.5 肝脏组织切片分析

解剖摘取各组小鼠肝脏，经质量分数4%多聚甲醛溶液固定，固定状态良好后，进行修剪、脱水、包埋、切片、染色、封片制作切片，苏木精-伊红（hematoxylineosin，HE）染色，光学显微镜下放大200 倍观察肝脏组织结构，按表2五级分法进行肝脏病变程度分析，分数越高代表病变程度越高。

表2 肝脏病理观察评分标准Table 2 Scoring criteria for liver pathological observation

1.4 数据统计与分析

使用SPSS 22.0软件进行数据统计与分析，结果以平均值±标准差表示，组间分析比较用单因素方差分析，并采用Duncan法进行组间两两比较，＜0.05表示差异显著。

2 结果与分析

2.1 RRT、RPS、RT对T2DM小鼠体质量、进食量、饮水量的影响

由表3可知，干预28 d后，空白组与模型组体质量差异显著（＜0.05），说明T2DM导致小鼠体质量下降。经阳性药物和样品干预后，阳性组体质量与第0天接近，维持稳定，与模型组差异显著（＜0.05）；RRT组、RPS组体质量下降趋势相比模型组有所减缓，RF组小鼠在第28天时体质量显著高于模型组（＜0.05）。结果表明，RRT、RPS、RF均能改善T2DM小鼠体质量下降现象，效果依次为RF＞阳性药物＞RPS＞RRT。

表3 各组小鼠实验28 d期间内初体质量、末体质量及体质量变化（n＝8）Table 3 Initial and final body mass of mice from each group and changes in body mass of mice over the 28-day experimental period (n = 8)

由图1可知，空白组进食量、饮水量均在正常范围；与空白组比，模型组进食量、饮水量显著增加82.6%和196.6%（＜0.05）。经阳性药物和样品干预后，与模型组比，阳性组进食量、饮水量分别显著下降30.9%和44.7%（＜0.05），RRT组、RPS组、RF组进食量分别显著下降10.2%、20.7%、25.8%，饮水量分别显著下降11.3%、24.2%、42.5%（＜0.05）。结果说明RRT、RPS、RF均可显著改善T2DM小鼠多饮多食现象（＜0.05），阳性药物、RPS和RF改善进食量效果相近，阳性药物和RF改善饮水量效果相近，总体效果依次为阳性药物＞RF＞RPS＞RRT。

图1 各组小鼠进食量（A）和饮水量（B）的变化（n＝8）Fig. 1 Changes in food (A) and water (B) intake of mice in each group (n = 8)

2.2 RRT、RPS、RF对T2DM小鼠脏器指数的影响

由表4可知，模型组肝脏指数显著高于空白组（＜0.05），经阳性药物和样品干预后，与模型组相比，阳性组肝脏指数显著下降19.5%（＜0.05），RRT组、RPS组、RF组肝脏指数分别显著下降15.0%、15.1%、22.0%（＜0.05），说明RRT、RPS、RF均能降低肝脏指数。糖尿病肾病是糖尿病中常见的微血管并发症，肾脏指数对评价糖尿病具有一定参考价值。与空白组比，模型组肾脏指数显著上升（＜0.05），经阳性药物和样品干预后，与模型组比，阳性药物组、RRT组、RPS组、RF组肾脏指数明显下降，其中RRT组、RF组与模型组差异显著（＜0.05）。与空白组比，模型组脾脏指数显著上升（＜0.05）。经阳性药物和样品干预后，与模型组比，阳性组、RRT组脾脏指数明显下降，RPS组、RF组脾脏指数显著下降（＜0.05）。结果表明，RRT、RPS、RF能够抑制机体脏器增大；这与Gao Yue等研究糙米酚类物质对T2DM小鼠肝脏指数影响和陆敏涛等研究花椒麻素对T2DM小鼠脏器指数影响的结果相一致。

表4 各组小鼠脏器指数（n＝8）Table 4 Organ indices of mice in each group (n = 8)

2.3 RRT、RPS、RF对T2DM小鼠血清TC、TG、LDL-C、HDL-C浓度的影响

由表5可知，与空白组比，模型组血清TC、TG、LDL-C水平显著升高（＜0.05），HDL-C水平显著下降（＜0.05），说明T2DM导致小鼠血脂代谢紊乱。经阳性药物和样品干预后，与模型组相比，阳性组TC、TG、LDL-C水平分别显著下降39.8%、28.5%、41.1%（＜0.05），HDL-C水平显著增加49.7%（＜0.05）；RRT组、RPS组、RF组TC水平分别显著下降17.0%、21.4%、33.4%（＜0.05）；RRT组、RPS组TG水平分别下降21.2%、11.9%，RF组TG水平显著下降46.4%（＜0.05）；RRT组LDL-C水平下降14.3%，RPS组、RF组LDL-C水平分别显著下降26.8%、33.9%（＜0.05）；RRT组、RPS组、RF组HDL-C水平分别显著上升25.9%、51.7%、56.5%（＜0.05）。结果表明，RRT、RPS、RF均能改善T2DM小鼠血脂代谢紊乱、维持血脂水平稳定，RF总体效果与阳性药物相近。

表5 各组小鼠血清相关指标变化（n＝8）Table 5 Changes in serum lipid indices of mice in each group (n = 8)

2.4 RRT、RPS、RF对T2DM小鼠脂肪分化因子PPAR-γ含量和脂肪质量的影响

由图2A可知，与空白组相比，模型组小鼠PPAR-γ含量显著增加86.3%（＜0.05）。经阳性药物和样品干预后，与模型组比，阳性组PPAR-γ含量显著降低31.5%（＜0.05），RRT组降低12%，RPS组、RF组分别显著降低17.2%和33%（＜0.05）。

由图2B可知，与空白组相比，模型组小鼠白色脂肪质量显著增加28%（＜0.05）。经阳性药物和样品干预后，与模型组比，阳性组白色脂肪质量显著下降40.3%（＜0.05），RRT组、RPS组分别下降2.5%、18.3%，RF组显著下降34.8%（＜0.05）。与空白组比，模型组棕色脂肪质量显著降低68.1%（＜0.05）。经阳性药物和样品干预后，与模型组相比，阳性组棕色脂肪质量显著增加113.1%（＜0.05），RRT组增加27.84%，RPS组、RF组分别显著增加82.9%和144.3%（＜0.05）。

图2 各组小鼠肝脏PPAR-γ含量变化（A）和白色脂肪、棕色脂肪质量（B）（n＝8）Fig. 2 Changes of PPAR-γ contents in the liver (A) and white fat and brown fat contents (B) of mice in each group (n = 8)

以上结果说明，T2DM小鼠肝脏中PPAR-γ含量增加，导致小鼠体内白色脂肪堆积；RRT、RPS、RF能抑制脂肪合成因子PPAR-γ在肝脏中的表达从而减少白色脂肪堆积，并增加棕色脂肪的质量，总体效果依次为RF＞阳性药物＞RPS＞RRT。这与管巧丽、史纪芳等研究发现活化AMPK可通过抑制PPAR-γ途径调控3T3-L1脂肪细胞中脂滴蓄积以及Wang Lei等研究发现刺梨总多糖对白色脂肪堆积具有改善作用的结果相一致。

2.5 RRT、RPS、RF对T2DM小鼠FBG的影响

由图3可知，空白组在干预期间FBG持续稳定，且在正常范围（3.9～6.1 mmol/L）；模型组第28天 FBG相比第0天增加23.64%，达到24.44 mmol/L。阳性组FBG前14 d缓慢增长后下降，第28天降到11.63 mmol/L，RRT组、RPS组FBG变化趋势和阳性药物组相似，第28天分别降到14.53 mmol/L和13.03 mmol/L；RF组FBG呈稳定下降趋势，第28天降到11.13 mmol/L。结果表明，RRT、RPS、RF虽未能将FBG降到正常范围，但相比模型组均明显降低。这与安玉红等研究发现刺梨果酒降低T2DM小鼠FBG的结果相一致。

图3 各组小鼠28 d实验期间空腹FBG变化（n＝8）Fig. 3 Changes in fasting blood glucose levels of mice in each group during the 28-day experimental period (n = 8)

2.6 RRT、RPS、RF对糖尿病小鼠口服糖耐量的影响

由图4A可知，灌胃葡萄糖溶液后，空白组血糖浓度在0.5 h内短暂上升后迅速下降，2 h时已恢复至初始值。模型组血糖浓度持续升高，1 h后才缓慢下降，2 h时未恢复到初始值；阳性组血糖浓度变化趋势与空白组相似，2 h时与初始值仅相差14.1%；RRT组血糖浓度变化趋势与模型组相似，2 h时未恢复到初始值；RPS组、RF组血糖浓度变化趋势均与阳性药物组相似，2 h后血糖浓度与初始值相近。结果表明，阳性药物、RPS、RF改善糖耐量效果相近，明显优于RRT。

由图4B可知，与空白组相比，模型组AUC显著上升305.4%（＜0.05）；与模型组比，阳性组AUC显著下降46.4%（＜0.05），RRT组下降7.6%，与模型组差异不显著（＞0.05），RPS组、RF组AUC分别显著下降39.9%和30.6%（＜0.05），均与阳性药物组差异不显著（＞0.05）。结果表明，改善糖耐量异常能力依次为阳性药物＞RPS＞RF＞RRT。

图4 治疗期间各组小鼠糖耐量（A）和AUC（B）的变化（n＝8）Fig. 4 Glucose tolerance (A) and area under the blood glucose-time curve (AUC) (B) of mice in each group during experimental period (n = 8)

2.7 RRT、RPS、RF对小鼠肝脏GK活力和肝糖原含量的影响

当机体内血糖水平过高时，GK能促进葡萄糖分解、肝糖原合成、调节血糖水平。由图5A可知，与空白组相比，模型组GK活力显著下降42.8%（＜0.05），经阳性药物和样品干预后，与模型组相比，阳性组GK活力显著增加43.2%（＜0.05），RRT组增加12.2%，RPS组、RF组分别显著增加32.1%和47.1%（＜0.05）。结果表明，RRT、RPS、RF均能上调肝脏GK活力，阳性药物、RPS和RF效果均显著优于RRT，RF效果最佳。这与刘丹奇等研究发现红茶、枸杞、桑叶多糖能提高T2DM小鼠肝脏GK活力的结果相一致。

T2DM会造成小鼠糖异生增多、GK活力降低，导致肝糖原含量下降。由图5B可知，相比空白组，模型组肝糖原含量显著下降67.5%（＜0.05），经阳性药物和样品干预后，与模型组相比，阳性组肝糖原含量显著增加159%（＜0.05），RRT组、RPS组、RF组分别显著增加30.2%、45.6%、135.4%（＜0.05）。RF和阳性药物效果相近，且显著优于RRT、RPS。结果表明，RF、RPS、RRT均能改善糖尿病肝糖原含量减少现象，RF效果最佳。这与Liu Kang、Wang Yudan等的研究结果相一致。

图5 各组小鼠肝脏GK活力（A）和肝糖原含量（B）的变化（n＝8）Fig. 5 GK activity (A) and liver glycogen content in the liver (B) of mice in each group (n = 8)

2.8 RRT、RPS、RF对小鼠肝脏氧化应激、损伤的影响

T2DM会导致MDA、有毒过氧化物在肝脏中大量堆积和SOD活力降低，从而引发肝脏应激损伤和胰岛B细胞损伤。由表6可知，与空白组相比，模型组MDA含量显著增加82.4%（＜0.05）。经阳性药物和样品干预后，与模型组相比，阳性组MDA含量显著降低32.9%（＜0.05）；RRT组、RPS组、RF组分别显著下降18.7%、17.1%、46.2%（＜0.05）。RF效果优于阳性药物且显著优于RRT、RPS。

表6 RRT、RPS、RF对小鼠肝脏MDA、CAT、SOD水平的影响（n＝8）Table 6 Effects of RRT, RPS, and RF on the levels of MDA, CAT, and SOD in the liver of mice (n = 8)

与空白组相比，模型组CAT活力显著下降49.7%（＜0.05）。经阳性药物和样品干预后，与模型组相比，阳性药物组CAT活力显著增加43.3%（＜0.05），RRT组、RPS组、RF组CAT活力分别增加10.3%、33.4%、59.1%。RF效果优于阳性药物、RPS且显著优于RRT。

与空白组相比，模型组SOD活力显著下降69.5%（＜0.05），经阳性药物和样品干预后，与模型组相比，阳性药物组SOD活力显著增加103.6%（＜0.05），RRT组、RPS组、RF组分别显著增加37.4%、73.2%、132.7%（＜0.05）。RF效果显著高于阳性药物、RRT、RPS（＜0.05）。结果表明，RRT、RPS、RF均能抗氧化应激、修复肝脏细胞，RF效果最佳。这与董华强等研究发现多穗黄酮根皮苷能改善T2DM小鼠氧化应激的结果相一致。

2.9 肝脏病理学分析结果

由图6和表7可知，空白组肝脏排列整齐，未发生脂肪变性、水肿和发炎。模型组肝细胞排列紊乱、高度水肿、胞体变大、胞质疏松、大量肝细胞脂肪变性、胞质中可见大小不一的圆形空泡，轻微发炎。经阳性药物和样品干预后，阳性组肝细胞排列尚整齐，肝细胞轻微空泡变性，胞体中度肿胀，未发炎；RRT组肝细胞排列尚整齐，胞质中可见大小不一的圆形空泡，大量肝细胞脂肪变性、中度水肿、未发炎；RPS组肝细胞排列尚整齐，中度水肿，肝细胞轻微脂肪变性，胞质中可见大小不一的圆形空泡，未发炎；RF组肝细胞排列尚整齐，少量细胞发生气球样变，胞体轻微肿胀，胞质空泡化，未发生脂肪变性和发炎。

图6 小鼠肝脏病理学分析Fig. 6 Liver pathological analysis of mice

表7 各组小鼠肝脏病变程度（n＝8）Table 7 Degree of liver lesions in each group of mice (n = 8)

3 讨 论

本实验采用高脂高糖饲料联合STZ建立T2DM模型，探究RRT、RPS、RF对T2DM小鼠糖脂代谢紊乱的影响。“三多一少”为糖尿病典型症状。经样品干预后，RRT组、RPS组、RF组“三多一少”现象均明显改善，其中RF对体质量减轻、进食量增多、饮水量增多改善效果强于RRT、RPS。脏器指数对衡量机体健康尤为重要，它是机体内某脏器质量与机体总质量的比值，脏器指数过大或过小都会影响机体健康，RRT、RPS、RF均能改善肝脏指数、肾脏指数、脾脏指数增大现象。

T2DM患者通常患有不同程度的脂代谢紊乱，高血脂是引起胰岛素分泌异常或胰岛素受体抵抗的原因之一，TC、TG、LDL-C含量升高，HDL-C含量减少是血脂升高、动脉粥样硬化的主要原因。RRT对TC、HDL-C改善效果显著（＜0.05），RPS对TC、LDL-C、HDL-C改善效果显著（＜0.05），RF对TC、TG、LDL-C、HDL-C改善效果均显著（＜0.05）；说明RF改善脂代谢紊乱能力优于RPS、RRT。PPAR-γ主要表达于脂肪组织和免疫系统，与机体免疫、脂肪细胞分化、胰岛素抵抗均有关系；研究发现T2DM小鼠肝脏组织中PPAR-γ表达量均会增加，导致白色脂肪堆积和血脂水平升高。本研究结果表明，RRT、RPS、RF均对PPAR-γ表达有抑制作用，RF抑制效果优于阳性药物，RRT、RPS抑制效果显著低于阳性药物（＜0.05）。白色脂肪组织是机体内储存过剩能量的重要场所，棕色脂肪在机体内负责分解白色脂肪并加快机体新陈代谢。RRT、RPS、RF均能通过抑制PPAR-γ的分化从而降低白色脂肪堆积、增加棕色脂肪含量，总体治疗效果依次为RF＞阳性药物＞RPS＞RRT。

T2DM是一种慢性内分泌疾病，血糖水平升高是该疾病最主要的特征；发病后患者的血糖指标长期处于异常导致人体器官组织损伤，若不及时改善会导致各种并发症。目前国际糖尿病诊断标准为正常人FBG在3.3～6.1 mmol/L之间，若大于11.1 mmol/L则视为血糖超标，故FBG是重要的检测指标之一。结果显示，第8天时RRT组、RPS组、RF组相比模型组FBG明显下降，其中RF效果最佳。糖耐量是指机体对血糖的调节能力，当机体突然摄入大量葡萄糖时，机体快速分泌胰岛素、合成肝糖原使体内血糖下降到正常水平。糖耐量异常是指机体口服大量葡萄糖后胰岛B细胞无法迅速做出反应，口服糖2 h后血糖浓度依然未降到正常范围。阳性药物组、RRT组、RPS组、RF组相比模型组AUC分别下降46.4%、7.6%、39.9%、30.6%，干预效果依次为阳性药物＞RPS＞RF＞RRT。

GK是机体内调节血糖代谢的关键酶，主要在人体肝脏和胰腺中表达，可作为葡萄糖传感器感知葡萄糖浓度的变化、促进葡萄糖分解和肝糖原合成、维持机体血糖平衡。T2DM患者肝脏GK活性降低、肝糖原含量减少、激素分泌异常导致血糖水平失衡，血糖升高，故激活GK能促使血糖含量减少、肝糖原含量增多。RRT、RPS、RF组相比模型组GK活力分别增加12.2%、32.1%、47.1%，肝糖原含量分别增加30.2%、45.6%、135.4%。RF效果均最佳，说明RF是刺梨激活GK、促进肝糖原合成的主要活性成分。

植物提取物在降血糖同时具有强抗氧化活性。MDA由生物体内自由基作用在脂质中发生过氧反应产生，具有细胞毒性从而导致胰岛B细胞损伤。SOD能够有效清除超氧阴离子自由基，减少肝脏细胞损伤。CAT是一种过氧化物分解酶，可将有毒过氧化物还原为无毒羟基化合物从而保护肝脏细胞。机体内源性抗氧化防御机制和DNA修复系统不堪重负时会导致胰岛B细胞功能障碍，故减少氧化应激能改善糖代谢紊乱。阳性药物、RRT、RPS、RF均能减少肝脏中MDA含量，RF效果最佳。阳性药物、RPS和RF增加CAT活力效果相近且均显著优于RRT，RF效果最佳。阳性药物、RRT、RPS和RF对增加SOD活力效果均有显著差异（＜0.05），干预效果依次为RF＞阳性药物＞RPS＞RRT。肝脏病理观察结果表明，阳性药物、RRT、RPS、RF均能改善肝细胞排列紊乱、水肿、发炎现象，阳性药物、RPS、RF对肝脏脂肪变性改善效果明显优于RRT。

综上，RRT、RPS、RF能通过降低进食量、饮水量、调节脏器指数、调节血糖血脂、抑制PPAR-γ分化、减少白色脂肪堆积、提高GK活力、增加肝糖原含量、修复肝脏氧化损伤、改善肝细胞水肿和脂肪变性等从而改善T2DM小鼠糖脂代谢紊乱。RPS、RF总体效果优于RRT，RF对糖脂代谢紊乱、氧化应激改善效果优于RPS，RPS对糖耐量异常改善效果优于RF。以上结果表明，RPS、RF可能作为有效改善T2DM的功能成分，下一步应继续研究RPS、RF调节糖脂代谢紊乱的具体作用机制。