酶抑制率法测定蔬菜中农药残留试验分析

何 欢

（湖南省农药检定所，湖南 长沙 410000）

1 材料与方法

1.1 试验材料

本文所提试验将使用大型菜市场供应原料为试验基础材料，采集时间为2021年8月，其中蔬菜样品按类别可分为叶菜类、芸薹属类、豆类、瓜类、茄果类和根茎类等6大类，共19个蔬菜品种。其中叶菜类包含7个品种、芸薹属类和豆类均为3个品种、瓜类、茄果类和根茎类均为2个品种，共计检测份数为3800份（单位：批次），其中叶菜类共1400份，占总份数36.8%；芸薹属类和豆类均为600份，均占总份数的15.8%；瓜类、茄果类和根茎类蔬菜均为400份，均占总份数的10.5%。

本试验所使用的仪器与试剂有：DY-3500Plus食品速测仪、电子天平，检测试剂有提取试剂、乙酯胆碱酯酶、二硫代二硝基苯甲酸显色剂、碘化硫代乙酰胆碱底物。

1.2 试验方法

样品处理：将从市场购买回来的蔬菜样品进行预处理，擦净表面泥土，用取样器取1厘米左右的方碎片，用电子天平称取叶菜类2克，非叶菜类4克。将称取好的样品放入取样瓶中，加入20毫升缓冲液，振荡1～2分钟，倒出提取液，静置2分钟待测。

检测：对照测试，在专用反应瓶中加入3毫升缓冲液，再加入50微升显色剂和50微升酶液，混匀，37℃下放置30分钟后加入50微升底物，摇匀并立即倒入比色皿中，放入测试通道，按仪器“对照”键测试3分钟的吸光度变化值ΔA。样品测试，在专用反应瓶中加入3毫升样品提取缓冲液，再加入50微升显色剂和50微升酶液，混匀，37℃下放置30分钟后加入50微升底物，摇匀并立即倒入比色皿中，放入测试通道，按仪器“对照”键测试3分钟的吸光度变化值ΔA。

检测结果：在410纳米波长下测试吸光度的变化，计算出抑制率就可判断农药的残留情况。

试验检测结果依据主要以添加酶制剂下酶被抑制的程度来表示。

上式中：ΔA表示对照组下缓冲液反应3分钟吸光度下的变化值；ΔA表示试验样品溶液反应3分钟后酶吸光度的变化值。当检测结果得出提取液对添加酶的抑制率≥70%时，即代表检测样品蔬菜中存在含有高剂量的有机磷或者氨基甲酸酯类的农药残留超标。对首次检测结果出现阳性的蔬菜进行重检，以保证检测蔬菜得出结果的真实性，两次检测仍呈阳性需用气相色谱法进一步检测分析。

2 结果与分析

2.1 不同品种蔬菜的农药残留检测试验结果

在本试验蔬菜农药残留检测样品中，共检测出农药残留份数为226份，总超标率为5.9%，详细检测结果如表l所示。

从上表1中检测数据结果的整体上看，可以得出以豆类蔬菜农药残留超标率最多，超标份数可以达到总样品份数的2.8%；以根茎类蔬菜农药残留份数最少，超标份数仅占检测份数的0.2%。从检测样品整体角度上看，样品中豇豆、荷兰豆、四季豆、辣椒的农药残留超标率相对较高，其余试验检测样品农药残留偏低。

表1 不同品种蔬菜农药残留检测结果

2.2 不同检测类型蔬菜农药残留超标率比较

由表2中数据可知，蔬菜检测样品中农药残留超标率从高到低排序为，豆类＞叶菜类＞芸薹属类＞茄果类＞瓜类＞根茎类。造成该现象的主要原因在于蔬菜本身的生长环境与抗虫害的能力。以豆类蔬菜为例，生长环境耐热性强，不耐低温。在少雨干旱高温的季节，很容易受到地面虫害的侵蚀，主要以锈病、病毒病、荚螟、红蜘蛛、蚜虫等为主的病虫害比较严重。一方面，农户为保障蔬菜不遭到破坏，会经常喷洒农药来杀死害虫或阻止害虫产卵等，另一方面，用药多凭习惯和经验，缺乏科学的使用方法。在用量上有可能超量使用，没有遵循超过农药安全间隔期之后采摘，从而导致蔬菜农药超标现象偏高。

表2 不同种类蔬菜农药残留超标率的统计结果

3 结论与讨论

经上述试验数据能够得出，现阶段蔬菜流通环节中售卖的蔬菜仍有一部分蔬菜存在农药残留超标的现象，特别是豆类蔬菜农药残留超标率最高。因此在当地相关部门加强监管的同时，商户应了解蔬菜产地及生产用药情况，加强采购蔬菜的安全食用性，以降低残留农药对人自身的伤害。

同时，经上述所提试验及其数据，本文将出现该现象的主要原因进行总结并得出一下几点结论。

第一，经上述试验结果可以得出，市场中农药残留超标的蔬菜均以豆类、叶菜类蔬菜为主。其常见侵蚀昆虫有黄曲条跳甲、夜蛾科、小菜蛾以及烟粉虱等。为消灭上述害虫农户们会通过使用过量用药和多次施药的方式，进行消杀害虫的操作，而超标准、超范围的使用农药会影响蔬菜农药消解，如农户在使用如氧乐果和克百威等杀虫剂之后，蔬菜未超过农药的安全间隔期就采摘上市，就会导致上市蔬菜出现农药残留超标的现象。

第二，经上述试验结果证明，上市蔬菜中残留较低的蔬菜有，番茄、黄瓜。生长环境下存在的害虫较少且害虫只会以这些植物的叶片为食，喷洒农药时也会着重喷洒蔬菜的叶片而不是果实部分，因此上市的茄果类蔬菜和瓜类蔬菜农药残留较低。

第三，上述蔬菜叶菜类含有天然色素，需要延长静置时间，减少干扰。因此在上述检测中检测结果会容易出现假阳性（检测结果为农药残留超标），对此在处理上述蔬菜样品时应当采取浸泡法来获得蔬菜上的农药残留，延长提取静置时间。从而降低次生物质和叶绿素对酶制剂检测的（干扰。另外，需要重点注意若检测试剂存放到冰箱中，在取出使用时需要解冻至规定操作温度及添加酶制剂中酶的最佳活性温度，而且酶液不易反复进行解冻操作，否则会直接影响酶的活性降低，影响试验的精准性。