血清膜联蛋白A2与口腔鳞癌病人放化疗敏感性及预后的关系

2022-09-22 08:24曾雅婕蒋柳宏赵波李轶
安徽医药 2022年10期
关键词:中位数放化疗血清

曾雅婕,蒋柳宏,赵波,李轶

口腔鳞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)作为多发性口腔恶性肿瘤,其发病率约占90%以上,占全身恶性肿瘤的1.5%~5.6%[1]。OSCC在舌、牙龈、颊、腭、上颌窦等部位多发,具有高发病率与高死亡率,易发生颈部淋巴结转移,5年生存率低于50%,晚期病人存活率低于30%,而影响OSCC治疗效果及预后的因素尚不明确[2-3]。膜联蛋白A2(Annexin A2,ANXA2)是一种跨膜蛋白,参与DNA损伤修复、调节细胞凋亡及生长因子信号传导等生理过程,同时还与多种恶性肿瘤的发生、发展密切相关[4-5]。有多个研究发现ANXA2在癌症病人组织和血清中高表达,并可作为预后检测指标,而关于ANXA2在OSCC血清中表达情况研究较少[6]。因此,本研究旨在探讨中晚期OSCC病人血清ANXA2表达及与放化疗敏感性和预后的关系,为OSCC寻找新的预后检测指标。

1 资料与方法

1.1 一般资料采用优效性检验计算确定样本量,取α=0.05为检验水准,把握度取80%,结合既往文献及研究,SPASS软件确定每组需样本量68例。选取2013年2月至2015年2月广州中医药大学第一附属医院收治的81例中晚期OSCC病人,排除13例不符合条件病人,以68例中晚期OSCC病人作为研究对象,同时选取68例体检健康者作为对照组。纳入标准:(1)经组织病理学确诊为中晚期OSCC病人(标准:①肿瘤细胞具有鳞状细胞的特点,有角化,形成角化珠;②具有细胞间桥;③肿瘤细胞有明显的异型性,可见核分裂象;④肿瘤细胞呈蟹足状浸润性生长,与正常组织之间没有界限);(2)手术不耐受病人;(3)病人或其近亲属知情同意,本研究符合《世界医学协会赫尔辛基宣言》相关要求。排除标准:(1)预计生存期低于3个月者;(2)入组前有放化疗史者;(3)合并其他恶性肿瘤者;(4)合并糖尿病、高血压等慢性代谢障碍疾病者;(5)血小板凝集障碍者;(6)合并类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮等自身免疫障碍疾病者;(7)放化疗禁忌证者;(8)依从性差者。

1.2 放化疗方法采用直线加速器放疗,放疗60~66 Gy,每次剂量1.8~2.0 Gy,1次/天,5次/周,连续放疗6周。在放疗基础上给予顺铂(江苏豪森药业股份有限公司,批号H20010743,规格20 mg/20 mL)75 mg/m2,连续2 d,加入到250 mL 0.9%生理盐水中,静脉滴注1 h,氟尿嘧啶(通化茂祥制药有限公司,批号H22023469,规格0.25 g/10 mL)1 000 mg/m2,连续5 d,加入到500 mL 0.9%生理盐水中,静脉滴注,3周1个疗程,化疗2个疗程。治疗后出现恶心、呕吐48例,白细胞降低65例,放射线皮疹32例。

1.3 检测方法采集受试者静脉血3 mL,室温静止30 min,3 200 r/min离心10 min,取上清,-80℃冻存待检。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清ANXA2水平,试剂盒购自美国R&D公司,具体步骤如下:(1)设置标准品孔、待测样品孔与空白孔,相应孔中加标准品、待测样品,空白孔不加,37℃孵育30 min;(2)洗板:弃液,吸水纸上拍干,加洗涤液静止1 min,弃液,吸水纸上拍干,重复洗涤3次;(3)加酶标工作液:各孔加酶标工作液,空白孔除外,37℃孵育30 min;(4)洗板:弃液,吸水纸上拍干,加洗涤液静止1 min,弃液,吸水纸上拍干,重复洗涤3次;(5)显色:各孔加入显色剂A与显色剂B,混匀,37℃避光显色10 min;(6)终止:各孔加终止液终止反应;(6)测定:450 nm波长测定OD值,绘制标准曲线,计算待检样品浓度。

1.4 疗效评定标准疗效评定参照世界卫生组织(WHO)实体瘤疗效评价标准[7],完全缓解(CR):肿瘤病灶完全消失,持续4周以上无复发;部分缓解(PR):各病灶最大直径与垂直直径乘积消退≥50%;稳定(SD):各病灶最大直径与垂直直径乘积消退<50%或增大≤25%;进展(PD):各病灶最大直径与垂直直径乘积增大>25%或有新病灶出现,总有效率=(完全缓解+部分缓解)/总例数×100%。

1.5 统计学方法本研究所得的实验数据均采用SPSS 20.0,其中符合正态分布的计量资料用描述,并用t检验;计数资料用例(%)描述,并用χ2检验;OSCC病人血清ANXA2低表达与高表达的生存曲线采用Kaplan-Meier法衡量,得到各组5年中位数生存时间并比较。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组受试者临床资料比较两组性别、年龄以及BMI比较差异无统计学意义(P>0.05),见表1。

表1 中晚期口腔磷癌(OSCC)病人68例与体检健康者68例临床资料比较

2.2 两组病人血清ANXA2水平比较研究组病人血清ANXA2水平(28.15±6.24)μg/L明显高于对照组(13.92±4.18)μg/L(t=15.62,P<0.05)。

2.3 ANXA2表达与临床病理参数关系以OSCC病人血清ANXA2表达中位数(27.62)为界值将OSCC病人分为ANXA2高表达组和ANXA2低表达组。血清ANXA2表达与病人年龄、性别、肿瘤大小无关(P>0.05),与病人TNM分期、分化程度、淋巴结转移、远处转移相关(P<0.05),见表2。

表2 口腔磷癌(OSCC)病人68例血清膜联蛋白A2(ANXA2)表达与临床病理参数关系/例

2.4 ANXA2表达与放化疗疗效关系ANXA2高表达组病人放化疗总有效率为54.84%(17/31),ANXA2低表达组病人总有效率为78.38%(29/37),两组病人放化疗总有效率比较差异有统计学意义(P<0.05),见表3。

表3 膜联蛋白A2(ANXA2)表达与放化疗疗效关系

2.5 OSCC病人血清ANXA2表达与预后关系OSCC病人血清ANXA2低表达病人随访5年中位数生存时间为(37.00±5.28)个月,高表达组5年中位数生存时间为(28.00±3.89)个月,两组病人预后5年中位数生存时间比较差异有统计学意义(t=7.87,P<0.001)。

3 讨论

OSCC是世界十大恶性肿瘤疾病之一,全球每年约有500 000新增病例,OSCC高发于45~75岁人群,并随着人口老龄化加剧,其发病率呈明显升高趋势[8-9]。目前研究认为咀嚼槟榔、吸烟酗酒、不良修复体刺激及人乳头瘤病毒感染等是OSCC致病因素[10]。随着手术治疗、放化疗技术及检测技术不断进步,OSCC死亡率有所下降,但OSCC早期病人预后良好,5年生存率可达85%以上,但多数病人确诊已为中晚期,预后较差,严重影响病人生活质量及生命健康[11]。因此,本研究希望通过对OSCC病人血清ANXA2水平检测及与放化疗敏感性关系分析,为OSCC治疗和预后提供新的检测指标。

ANXA2属于跨膜蛋白A家族重要成员之一,是一种外分泌钙磷脂结合蛋白,主要分布于细胞膜与细胞浆中,可在单核细胞、内皮细胞及多种肿瘤细胞中表达,并能释放入血在外周血中检测到。ANXA2在多种肿瘤组织、血清中异常升高,并与肿瘤侵袭、迁移、分化及药物抵抗等存在密切联系,可用于早期诊断多种恶性肿瘤及评估预后的参考指标[12]。研究发现,ANXA2在肝细胞癌组织中高表达,并与肿瘤长径、浸润转移相关,参与肝细胞癌发生、发展[13]。有研究证实ANXA2在乳腺癌血清中表达上调,其表达上调是整体生存率差和远处无转移生存预后的独立指标[14]。本研究结果显示,研究组病人血清ANXA2水平明显高于对照组,Zhang等[15]临床研究显示相较于良性口腔疾病组和健康对照组,OSCC病人ANXA2水平明显升高,与本研究结果相一致,进一步表明ANXA2在OSCC中呈高表达水平,推测与疾病发生发展关系密切。结果还显示OSCC病 人血 清ANXA2表 达与TNM分期、分 化程度、淋巴结转移、远处转移相关,而与年龄、性别、肿瘤大小无关,同于洋等[16]研究结果基本相似,提示ANXA2参与OSCC疾病发生、发展。有研究发现ANXA2沉默可抑制血管生成,而血管生成是肿瘤发生的重要因素,细胞表面上的ANXA2可与血管产生抑制因子特异性结合,使纤维蛋白溶解酶与ANXA2结合受阻,无法形成纤溶酶,影响血管生成,ANXA2还能将基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)前体活化,而MMP-2和MMP-9可降解细胞基质,促进肿瘤细胞侵袭与迁移[17-18]。本研究中ANXA2表达与肿瘤大小无关,可能是由于样本量较少,造成结果偏倚所致。进一步通过对ANXA2不同表达水平OSCC病人放化疗敏感性分析显示,ANXA2高表达组病人放疗总有效率为54.84%,明显低于ANXA2低表达组病人总有效率的78.38%,与Chen等[19]研究结果相似,提示血清ANXA2高表达OSCC病人对放化疗敏感性低,放化疗效果差。有研究报道癌症病人进行放射治疗者,ANXA2可进入细胞核内以减轻放射对DNA损伤,起到保护DNA作用,而ANXA2如何保护DNA机制尚不清楚[20]。最后通过生存曲线分析显示,OSCC病人血清ANXA2低表达病人5年中位数生存时间与高表达组比较差异有统计学意义,与Liu等[21]研究结果基本相似,提示OSCC病人的ANXA2水平越高,则生存时间越短,预后较差,其可作为预测OSCC预后潜在生物学指标。

综上所述,中晚期OSCC病人血清ANXA2高表达,并与TNM分期、分化程度、淋巴结转移、远处转移相关,且ANXA2高表达者的放化疗敏感性低,生存时间短。但本研究可能因所选研究对象及随访时间有限,可能对研究结果产生一定误差,在之后进一步对OSCC机制研究中会着重改进。

猜你喜欢
中位数放化疗血清
全程营养护理管理在食管癌同步放化疗患者中的应用
中医饮食干预在改善肿瘤联合放化疗患者营养不良的应用效果观察
乳腺癌根治术患者放化疗前后甲状腺功能变化情况及其临床意义
血清免疫球蛋白测定的临床意义
数据的数字特征教学设计
Meigs综合征伴血清CA-125水平升高1例
慢性肾脏病患者血清HIF-1α的表达及临床意义
慢性鼻-鼻窦炎患者血清IgE、IL-5及HMGB1的表达及其临床意义
局部进展期直肠癌手术前后放化疗的疗效对比
中位数教学设计