牛结核病的疫病特点及防控策略

郝宝娟，臧 莉，王 辉，郑艳坤，李 丽，潘国峰

（1.天津市农业发展服务中心，天津 300061；2.天津市农业生态环境监测与农产品质量检测中心，天津 300221）

牛结核病是一种由牛型结核分枝杆菌引起的慢性人畜共患传染病，属于二类动物疫病。该病一年四季均可发生，病理变化以组织器官的结核结节性肉芽肿和钙化的坏死病灶为主要特征。牛结核病的发生与流行不仅危害养殖户的经济利益，而且可能带来与牛及其产品相关的职业染疫和食品安全等公共卫生安全风险。因此，做好牛结核病防治知识和管控意识宣传，逐步完善牛结核病防控体系至关重要。

1 牛结核病的病原

牛结核病的病原为牛型结核分枝杆菌，属于分枝杆菌科分枝杆菌属结核分枝杆菌复合物中的成员，它们在核苷酸水平上基本组成的同源性超过99.95%，有共线性的表现，无广泛的倒置、复制、置换等现象。牛型结核分枝杆菌具有大部分结核分枝杆菌不具备的TbD1 的基因位点，该区呈现为一个单核苷酸的多态性，可将其作为牛型结核分枝杆菌鉴定的重要靶标。牛型结核分枝杆菌以杆状居多，间有分枝状且不会产生芽孢、无法运动的革兰氏染色阳性菌。牛型结核分枝杆菌有蜡质膜，常用抗酸染色法进行鉴定。牛型结核分枝杆菌为需氧菌，对常用消毒药和高温的抵抗力较弱，生产中常用3%甲醛溶液、10%漂白粉或75%酒精等消毒液进行消毒。

2 牛结核病的流行病学

牛结核病的传播方式主要为接触传播，包括皮肤、消化道和呼吸道3 种传播途径。家畜中牛对该病最易感，尤其是奶牛，水牛、黄牛、牦牛次之，猪、马等家畜也可感染。除了家畜，猴、鹿等野生动物也可感染发病。人是易感染群体，可通过接触染疫动物、食用受污染的肉乳制品或吸入含菌气溶胶而感染发病。病原可通过乳汁、粪便等不同方式对外扩散，污染周围环境，导致疫病区域性传播。当饲养环境较差时，如潮湿阴暗等环境、粪便清理不及时、食用不良饲料等问题，也会引发牛结核病[1]。随着人们生活水平的不断提高，人们对牛肉乳等相关动物源食品的需求逐渐增加。由于牛结核病对人极具传染性，因此该病也引起了各国卫生部门的高度重视。随着医学研究的不断深入，人与动物交叉感染结核病的观点得到了证实。因此，在养牛业规模化发展的同时，应高度重视牛结核病的防疫工作，只有优先解决牛结核病，才能够降低人类感染结核病风险，为进一步对病毒进行分析和征服减轻障碍，保障人类的健康安全[2]。

3 牛结核病的临床症状

牛结核病的潜伏期一般约10 ～15 d，但也有特殊情况导致其潜伏期长达数月，甚至出现潜伏数年的情况。牛结核病本身属于一种慢性病，随着病程的延长，呼吸困难、咳嗽、体形消瘦等症状逐渐显现，由于患病牛的体温变化不明显，使得其早期症状相对隐匿。受病菌毒力差异、侵害器官不同以及个体抵抗力高低等因素的影响，患病牛的临床症状差异较大。对患病牛不同组织器官的侵蚀，也常被作为划分牛结核病种类的最重要依据，其中常见的有肺结核、淋巴结核、肠结核、乳房结核、脑结核等。患病部位形成多个结核结节是牛结核病的主要病理变化，尤其是肺部病变更为明显，在患病牛的腹膜与胸膜等部位，也会出现大小不一、白色珍珠样的结节，所以也将牛结核病称为“珍珠病”。

3.1 肺结核

肺结核在临床上最为常见，患病牛在发病初期常出现干咳症状与疲惫状态，尤其是在起立行为或吸入冷空气后更为明显；发病后期干咳症状加剧，逐步向湿咳症状转变，表现为呼吸急促且困难，伴有气喘现象。随着病程的延长，患病牛食欲逐日下降，消瘦、贫血、体温升高等症状越发明显，尤其是处于哺乳期的患病牛，其产奶量会逐渐下降。剖检患病牛可发现肺脏内有大量呈黄白色、形态大小不一的增生性结节，切开结节可见钙化或干酪样的坏死病变，肺脏组织坏死或软化溶解直至形成空洞。

3.2 淋巴结核

患病牛体内不同位置的淋巴结均可呈现极为明显的结核病变，特别是在股后淋巴结、肩前淋巴结发生病变后，前后跛行的症状表现明显；当纵隔淋巴结肿大时，瘤胃鼓气的症状表现明显。咽部淋巴结一旦呈现结核病变时，染疫牛因咽喉受到压迫导致声音出现改变，如呼吸声音变得粗厉等。

3.3 肠结核

病原菌会破坏患病牛的肠壁细胞，导致患病牛肠道功能逐步弱化，食欲不断下降。发病初期常出现便秘或者腹泻症状，患病后期则更多以腹泻为主，甚至可出现排泄物中掺杂脓汁或血的情况，常伴有强烈的腥臭味，后期脱水症状更加明显，尤其患病犊牛脱水更为严重。

3.4 乳房结核

患病牛主要表现为乳房炎症，产奶量与乳汁质量双重下降，发病初期变化尚不明显，但到发病后期，乳汁逐渐稀薄，甚至停止分泌。

3.5 脑结核

病原菌损害患病牛的脑细胞后，患病牛出现明显的震颤、不安、惊吓、兴奋等异常行为，也会出现颈部的局部僵硬，长年卧地无法站立等现象。随着病情的不断恶化，心律失常、痉挛、昏迷、呼吸急促等症状越发明显。

4 牛结核病的诊断

牛结核病的诊断方法有很多，为提高诊断方法的有效性和诊断结果的准确度，最好采取多种诊断方式进行综合判断。

4.1 临床诊断

牛结核病的初期症状不明显或症状不典型，随着病情的发展会逐渐出现消瘦、厌食、体弱、呼吸困难、咳嗽、淋巴结肿大等症状。在日常饲养管理过程中，如发现牛群出现上述临床症状时，应及时采样进行实验室诊断，对确诊牛进行果断处置。

4.2 实验室诊断

4.2.1 细菌分离鉴定 细菌分离培养鉴定是最早采用的诊断方法，主要是利用细菌分离与染色镜检法直接检测牛结核分枝杆菌。细菌分离鉴定具有操作简单的优势，但在检测过程中难以在第一时间直接区分致病菌和非典型的分枝杆菌，此外，这种方式存在培养细菌所需时间过长和影响细菌生长因素较多的问题。在细菌分离培养法中，可配套利用生化试验或PCR 检测法进行鉴定。在实际操作过程中，为避免因各种原因造成培养物污染，可利用豚鼠进行接种，再进行细菌分离与鉴定。

4.2.2 分子生物学技术 应用于牛结核病诊断的分子生物学方法有很多，包括DNA 图谱、DNA指纹技术、DNA 探针技术、PCR 检测法等，最常用的是PCR 检测法。PCR 检测法主要以检测目的基因片段和分析研究基因序列为主，PCR 检测法的优势突出，包括灵敏度高、检测速度快等，尤其是随着检测技术的不断优化，该方法的应用范围更广。在实际检测工作中，该项技术对操作人员的知识水平、仪器设备使用熟练度和自身操作规范程度等方面均具有极高的要求。此外，牛结核病还可采用DNA 探针法进行诊断，即先标记被分开的寡核苷酸，再将标记的片段与体外的扩增产物进行特异性杂交诊断。

4.2.3 免疫学诊断 结核菌素皮内变态反应试验是检测牛结核病的最标准方法，在实践操作中存在明显的优势。该方法采用皮内注射0.1 mL 的结核菌素，定期观察注射部位的变态反应情况，72 h 后观察结果。如果注射部位皮肤呈现红肿状态，并且整体的皮厚增加超过4 mm 时，则判定为牛结核病阳性；如果在注射结核菌素部位的皮肤没有红肿变化或皮厚差为2.0 mm 以下，则判定为牛结核病阴性；如果局部炎性反应不明显，皮厚差大于或等于2.0 mm、小于4.0 mm，则判定为疑似病例。针对疑似病例需要在30 d 后进行复检。

4.2.4 淋巴细胞转化技术 淋巴细胞转化试验属于新型技术，在实践操作中，需先将淋巴细胞从全血中分离，在复合物组织培养介质中培养细胞3 ～5 d，再用放射核酸技术检测细胞的增值水平。该方法对操作人员的专业技能要求更高，难以推广应用。

4.2.5 血清学技术 目前，实验室常用的血清学诊断技术主要包括固相抗体竞争夹心酶联法、固相抗体竞争试验、免疫印记法、斑点金免疫渗滤试验、荧光偏振检测法、免疫斑点测定法、酶联免疫吸附法等。

5 牛结核病的防控策略

由于牛结核病的危害较大，易造成巨大经济损失，因此做好预防工作至关重要，一旦发现疫情，要做到立即报告、及时诊断，对确诊疫情严格按照技术规范果断处置。

5.1 加强外防输入与内防检测的协同效应

对健康的牛群定期进行健康监测，强化风险意识和对疫病防控的重视。配种尽量采用人工授精技术取代本交，选用品质优良与来源可靠的奶牛精液，人工授精的操作行为要严格规范。对于外部引入的补充家畜，养殖户要提高安全警惕，严格依据“检疫—隔离—检疫—合群”的程序规范落实引种工作，隔离检疫确认无结核病菌携带后，再进行混群饲养。养殖场内的工作人员需定期进行体检，预防感染牛结核病病菌[3]。

5.2 污染牛群的净化

对污染的牛群要强化检测工作，对疑似患病牛与阳性牛及时做好隔离和剔除工作。对患病牛和阳性牛不准治疗，要严格按照《中华人民共和国动物防疫法》等国家现行的规定及时扑杀，施以无害化处理，防止疫病扩散。在检出并剔除患病牛、阳性牛后，需在30 ～40 d 后再进行1 次检测，其后每隔30 ～45 d 进行连续检测。按照国家相关的防控法规定，检测出阳性牛的牛群，须在半年内连续3 次检测均无阳性牛检出，则可判定为健康牛群。

5.3 规范执行兽医防疫制度

养殖牛场要建立完善的防疫制度并严格执行。一是合理划分养殖区域，养殖区域应符合生物安全要求，在牛场门口设置消毒池并定期更换消毒液，场内避免环境阴暗潮湿，夏季做好防蚊虫工作；二是饲养用具每隔5 ～10 d 消毒1 次；三是牛群运动场所应每月消毒1 ～2 次，合理选择消毒药物，轮换使用过氧乙酸、甲醛等环境消毒药物，以达到理想的养殖场所环境消毒效果。此外，发现患病牛或阳性牛后，应及时处置，严格防止疫情的场内传播与外泄。在严格执行防疫制度的同时，要在社会上宣传动物疫病防控工作，促使全员支持和配合疫病防控工作的开展，为兽医防疫制度的规范落实提供良好的氛围保障[4]。

5.4 疫情报告

任何单位和个人发现疑似患病牛，应及时向当地动物防疫机构报告，动物防疫机构接到疫情报告并确认后，按《动物疫情报告管理办法》等有关规定及时上报。

5.5 生物安全培训

首先，养殖场要定期组织养殖人员接受系统性的生物安全培训，丰富培训内容与方式，通过聘请专家介入指导、开设讲座、线上学习等形式，使养殖人员接受继续教育培训。其次，防疫主管部门开设线上信息交流平台，定期推动国家现行的养殖和疫病防控政策宣传，帮助养殖人员解读和深入理解政策规定，加强对牛结核病防控的重视，促使养殖行为更加规范。养殖户可通过线上咨询专业养殖和疫病防控等方面的问题，接受系统性的培训，确保养殖场的卫生环境达标，及时规避潜在的风险因素，防止喂养不良等环节引起的牛患病问题，在提高养殖效益的同时，确保公共卫生安全[5]。

6 结论

牛结核病的防控工作是一项系统工程，需要全社会的共同关注和参与。为推进养殖业的发展壮大，需不断创新牛结核病的诊断技术和防控技术，提高养殖管理水平，规范落实对养殖户的培训学习，实现牛结核病的无死角防控。