酱香型白酒除杂后长期大剂量饮用对小鼠生长的影响研究

杜 莎，邓文飞，赵玉珍，杨荣增，孙晓东

（力天酒业研究院（西安）有限公司，陕西西安 710014）

白酒作为我国传统的酒精饮料而广受关注，近年来随着“健康中国”战略的实施，白酒健康也成了人们关注的重点[1]。活性炭是一种疏水吸附剂，常被用于去除白酒中的有害物质和异杂味[2]，传统的活性炭有着较大缺陷，在吸附酒中有害物质成分的同时也会吸附相当量的有益呈香呈味物质成分，导致酒水口味变得寡淡[3-4]。为了保证酒水除杂效果明显的同时克服传统活性炭除杂的缺陷，近年来行业内研制了新型炭制吸附剂。炭分子筛是通过对传统活性炭进行破碎、多级清洗、毡制成型、干燥、碳化活化，脱除传统活性炭自身的灰分、杂质、杂味，重组其孔隙，堵塞其吸附白酒有益物质的孔径，使其成为专用于吸附白酒中甲醇、甲醛、正丙醇、各种醛类物质、塑化剂、氰化物、重金属等有害物质的新型材料[5]。Q/SLT0001S—2022 与GΒ 29215—2012 相比各项关键指标均优于GΒ 29215—2012，见表1[6]。本试验通过研究经酒用炭分子筛处理前后的53%vol 酱香酒对小白鼠生长的影响，对比白酒的除杂处理对小鼠毒性的影响，为白酒的健康化发展和酒民的饮酒健康提供理论依据。

表1 两标准理化指标差异

1 材料与方法

1.1 材料、试剂及仪器

1.1.1 动物

清洁级KM 小白鼠60 只，雌雄各半，体质量(20±2) g，购自西安交通大学医学院SPF 实验动物中心，动物合格证号：SCXK(陕)2018-001，饲养温度21～26 ℃，湿度45 %～55 %，光暗交替12 h，可自由饮水摄食。

1.1.2 样品

酒样：53%vol 酱香酒，市场随机购买的某知名品牌酱香酒；除杂处理后53%vol酱香酒，由力天酒业研究院（西安）有限公司除杂技术处理。纯净水。

1.1.3 仪器设备

电子秤、分析天平、灌胃针管、解剖器具。

1.2 实验方法

1.2.1 实验分组

将60 只小白鼠随机分为3 组，每组各20 只（雌雄各半），分别为Ⅰ组（53%vol 酱香酒）、Ⅱ组（除杂后53 %vol 酱香酒）和对照组（纯净水），试验时长60 d，试验期间雌雄分开饲养一周然后混合饲养一周，如此往复直至实验结束。

1.2.2 小白鼠标记

使用染色标记法对小白鼠进行标记，用0.5 %的甲紫溶液标记雄鼠，用3%苦味酸乙醇溶液标记雌鼠，分别标记1—10号。

1.2.3 给样形式

使用普通灌胃针管进行灌胃给样，剂量各组均为20 mL/kg·d，连续灌胃5 d，然后休息2 d，如此反复直至试验结束。试验期间食、水均正常饮用。

1.2.4 生育鼠处理

通过观察各组中雌鼠阴道口有无白色阴道栓、体重是否骤增作为雌鼠受孕依据，将明显受孕的雌鼠单独饲养，给样正常，安装夜间记录仪，观察并记录雌鼠生崽个数。雌鼠生崽后继续放回原组，正常实验。

1.2.5 小白鼠死亡与处死

对实验过程中死亡的小白鼠进行及时解剖，实验结束时对所有小白鼠采用颈椎脱臼法处死并解剖，解剖的脏器存放于防腐剂中。

1.3 数据记录分析

记录：每日饲养房温湿度；每只小白鼠给样日的给样前体重；各组死亡鼠的死亡体重及解剖脏体（心脏、脾脏、肝脏、肺脏、肾脏、胸腺）重量并计算脏器系数；各组生育鼠的崽鼠数目。

数据分析：数据处理及描述统计分析采用Excel 2016 完成，t 检验、相关性分析等采用SPSS 23.0完成。

2 结果与分析

2.1 小白鼠的体重特征

为研究试验过程中小白鼠的体重变化特征，计算各组每隔5 天小白鼠体重的平均值，变化特征见图1。三组小白鼠体重在实验过程中整体增长，Ⅰ组和Ⅱ组给样第1 天体重明显下降，随后逐渐上升，Ⅱ组的整体体重水平明显优于Ⅰ组。对照组在第36 天和实验组在第41 天以后的体重明显浮动是怀孕雌鼠与生育影响。由表2 配对样本t 检验可知，随着实验进行，Ⅰ组、Ⅱ组与对照组比较体重增长显著降低(t＜0，P＜0.01)，差异具有统计学意义；Ⅱ组体重增长显著高于Ⅰ组(t＜0，P＜0.01)，差异具有统计学意义，结果表明除杂后减弱了饮用普通53%vol酱香酒对小白鼠体重的影响。

图1 小鼠体重变化结果

表2 小鼠体重变化对比

2.2 试验鼠生育百分率

表3 结果表明，Ⅰ组共有3 只雌鼠生育，生育崽鼠总数为37 只，生育率为64.9 %；Ⅱ组共有4 只雌鼠生育，生育崽鼠总数为48 只，生育率为70.6 %；对照组有9 只雌鼠生育，生育崽鼠总数为87 只，生育率为81.3 %。结果表明，除杂处理减弱了普通53%vol酱香酒对小白鼠生育率的影响。

表3 小鼠生育状况表 （只）

2.3 试验鼠脏器脏体比特征

表4 结果表明，Ⅰ组的心脏体比显著高于Ⅲ组(t＞0，P＜0.01)，差异具有统计学意义，脾脏系数显著低于Ⅲ组(t＜0，P＜0.05)，差异具有统计学意义，其余脏器系数与Ⅲ组无显著差异性(P＞0.05)。由表5 可知，Ⅱ组的各脏器系数与Ⅲ组相比无显著差异性(P＞0.05)。结果表明，普通53 %vol 酱香酒对小白鼠心脏与脾脏造成一定影响，除杂后的53%vol酱香酒与对照组没有显著性差异。

表4 Ⅰ组与对照组脏体比比较

表5 Ⅱ组与对照组脏体比比较

为进一步研究两实验组脏器系数与对照组的差异性，以对照组各脏器系数的均值为检验值，对两实验组进行单样本t 检验（表6）可知，Ⅰ组心脏系数显著高于对照组平均水平(t＞0，P＜0.01)，差异具有统计学意义，脾脏系数、胸腺系数显著低于对照组平均水平(t＜0，P＜0.01)，差异具有统计学意义，肾脏系数显著高于对照组(t＞0，P＜0.05)，差异具有统计学意义；Ⅱ组各脏器系数相比于对照组平均水平无显著差异(P＞0.05)。结果表明，普通53 %vol 酱香酒对实验鼠的脏器影响较大，除杂后的53%vol酱香酒降低了对实验鼠脏器的影响。

表6 Ⅰ组、Ⅱ组与对照组脏器系数均值的比较

2.4 试验小白鼠死亡率

表7 结果表明，截至实验结束，Ⅰ组小鼠共计死亡14 只，其中雌雄各占7 只，总体死亡率为70%；Ⅱ组小鼠共计死亡11只，其中雄鼠死亡5只，雌鼠死亡6 只，总体死亡率为55 %；对照组死亡0只。以上数据看出53%vol酱香酒组的死亡率要高于给样除杂后53%vol酱香酒组的死亡率。

表7 小鼠死亡状况表 (只)

3 讨论

白酒中可能会带有甲醇、甲醛、正丙醇、各种醛类物质、塑化剂、氰化物、重金属等有害物质，以上物质可能是从原料中带入，生产过程中产生及受生产设备的影响进入酒中[7-8]，通过特有的除杂工艺可以有效去除白酒中的一些有害物质。本试验利用日龄5 周的18～22 g 小白鼠研究经酒用除杂炭分子筛除杂后的53%vol酱香酒在饮用60 d过程中与未除杂的53 %vol 酱香酒比较对小鼠生长影响的特点。

体重变化是衡量动物是否正常生长发育的重要指标[9]，本研究过程中Ⅰ组和Ⅱ组体重显著低于对照组，表明大量饮酒抑制了小白鼠的生长发育，Ⅱ组的体重增长显著高于Ⅰ组，说明除杂处理后的53%vol 酱香酒降低了对小白鼠生长发育的抑制作用。在灌胃给酒第21 天后两实验组体重正常增长，表明机体对白酒产生了一定的耐受性，第41 天以后体重增减幅度大是由于各组均有雌鼠怀孕，从而影响各组体重变化。

长期大量饮酒会推迟雌鼠的阴道开张日龄，抑制雌鼠子宫发育与卵巢功能[10-11]，长期大量的饮酒也会导致雄鼠精子密度降低，增加雄鼠的精子畸形率，抑制雄鼠睾丸的生长发育[12-13]，造成睾丸病变，从而导致睾丸生成精子、合成并分泌雄性激素的能力受到抑制[14-15]，进而影响小白鼠正常的生殖机能，本研究中Ⅱ组的生育率大于Ⅰ组，表明除杂后的53%vol酱香酒降低了对小白鼠的生殖毒性。

心脏作为人体的重要器官，心脏健康一直是人们关注的热点之一，长期大量饮酒会导致人体心腔扩大、心肌增厚，从而导致心脏质量增加[16-18]，张丽等[19]通过长期大量给大鼠饮酒研究得到大剂量饮酒5 个月后心脏主要表现为离心性肥大。脾脏和胸腺作为重要的免疫器官，直接决定机体全身的免疫水平，免疫器官重量的降低是免疫抑制所导致，反之则表示免疫增强，生长发育较快[20]，研究表明，长期大量饮酒会抑制脾脏和胸腺的生长发育[12]。肾脏是仅次于肝脏的酒精代谢和排泄器官[21]，临床研究表明长期饮酒会导致肾质量和肾脏指数升高，肾小球系膜细胞增生，肾小管上皮细胞肿胀，间质内小血管增生、扩张、水肿[22-24]。本研究通过统计学分析各脏器系数可知，Ⅰ组小白鼠心脏系数和肾脏系数显著高于对照组，脾脏系数和胸腺系数显著低于对照组，Ⅱ组的小鼠各脏器系数均与对照组无显著差异。

死亡率可以直观比较两实验组的毒性强弱，由于大剂量连续灌胃，足够引起小白鼠急性、慢性酒精性中毒[25-26]，急性酒精中毒是在一次饮用过量酒精后中枢神经系统处于先兴奋后抑制状态，严重会导致呼吸、心跳受到抑制而死亡[27]。慢性酒精中毒是指长期大量饮用酒精造成的精神、神经系统和多器官的损害[28]，随着饮酒时间增长导致死亡，此外就是酒中其他有害物质对机体的影响[29]。本研究Ⅰ组的死亡率为70%，Ⅱ组的死亡率为55%，表明除杂处理降低了53%vol酱香酒对小白鼠的毒性。

综上所述，经酒用除杂炭分子筛除杂后的53 %vol 酱香酒相比于普通53 %vol 酱香酒增进了小白鼠的生长发育能力，增进了小白鼠的生育能力，降低了长期大量饮酒对小白鼠心脏、脾脏、肾脏、胸腺等脏器的毒性，降低了小白鼠的死亡率。本研究验证了酒用除杂炭分子筛除杂后的53%vol酱香酒降低了对小白鼠的生长毒性，然而与对照组相比，长期大量饮酒对机体的危害仍然不可忽视。目前在白酒生产过程中，国内白酒行业关注重点多在白酒生产工艺，对白酒后处理技术研究不多，未来加大对于白酒后处理技术的研究及科学合理的宣传饮酒知识，控制合理的饮用量及饮用频次对于白酒行业长期健康发展有不可估量的作用。