广西某种鸡场不同品系鸡禽白血病p27抗原检测结果分析

粟艳琼,胡 杰,黄 超,杨 蓉,温丽霞,沈前程,粟永春通信作者

1.广西壮族自治区动物疫病预防控制中心,广西 南宁 530001 2.广西金陵农牧集团有限公司,广西 南宁 530001

0 引言

禽白血病(avian leukosis,AL)是由禽白血病病毒(avian leukosis virus,ALV)引起的禽类多种肿瘤性疾病统称。ALV属于反录病毒科禽C型反录病毒群单股RNA病毒。病毒的内部直径为35～45 nm的电子密度大的核心,外部为中层膜、外层膜,直径为80～120 nm,平均直径为90 nm。目前已有报道的为A～J共10个亚型,其中J亚群白血病病毒(ALV-J)诱发的鸡群的白血病危害最大,给我国的养鸡行业带来了巨大的损失[1-2]。感染ALV的鸡群,可引起发病鸡严重的生长发育不良、受精率和孵化率等生产性能明显下降;也可以不表现出明显的临床症状,而造成机体免疫器官功能退化,引起其他疾病的发生;同时,与其他病原混合感染,临床发现的病鸡血管瘤、骨髓瘤样病变、腺胃炎等都与禽白血病病毒的感染有关。

近年来,国内一些原种鸡场也开展了一系列ALV的净化工作,并取得了一定的进展。2012年,国务院发布《国家中长期动物疫病防治规划(2012—2020年)》将禽白血病作为优先防控的动物疫病,《全国肉鸡遗传育种改良计划(2014—2025)》将禽白血病列为重点监测和净化疾病。这些措施均促进了全国开展ALV净化的积极性[3]。

p27是ALV病毒群的主要gs抗原[4]。ALV-p27抗原检出率与种鸡群的发病状况及其子代鸡群的发病状况密切相关,因此ALV-p27抗原阳性率可作为开展ALV的流行病学调查和感染风险评估的重要指标[5]。本研究通过监测不同日龄鸡的鸡白血病病毒p27(ALV-p27)抗原,观察不同品系鸡的排毒规律,为优化ALV的控制和净化方案奠定基础。

1 材料与方法

1.1 样本来源

本研究采集了2020年1月—2023年6月广西壮族自治区某种鸡场的花鸡、麻鸡、乌鸡3个品系的雏鸡胎粪及不同周龄鸡的血浆样本合计160 396份。其中,2020年合计采集样本19 816份,2021年合计采集样本67 918份,2022年合计采集样本42 347份,2023上半年合计采集样本30 315份。

1.2 主要试剂

禽白血病病毒p27抗原试剂盒购自美国IDEXX公司。

1.3 检测方法

核心群雏鸡全部进行胎粪ALV-p27抗原检测:对雏鸡进行翻肛性别鉴别,并采集雏鸡胎粪放入有0.5 mL稀释液的离心管中,静置、冻融后进行ALV-p27抗原检测。育成及开产期分别在不同周龄进行抽检:无菌采集抗凝血分离血浆,接种DF-1细胞培养9 d,取上清进行ALV-p27抗原检测。

2 结果分析

2.1 3个品系鸡ALV-p27抗原检测结果

根据2020年1月—2023年6月,3个不同品系鸡抽检的总阳性率可知,ALV感染在广西鸡群中普遍存在(见表1)。其中,花鸡ALV-p27抗原总阳性率为1.20%(632/52 845),在3个品系中总阳性率最低。2020年、2021年、2022年、2023上半年,ALV-p27阳性率分别为:1.86%(171/9 183)、1.33%(431/32 510)、0.27%(28/10 526)、0.32%(2/626)。麻鸡ALV-p27抗原总阳性率为2.23%(1 211/54 195),在3个品系中阳性率最高。2020年、2021年、2022年、2023上半年ALV-p27阳性率分别为:2.31%(29/1 256)、2.76%(727/2 673)、1.82%(429/23 555)、0.86%(26/3 011)。乌鸡ALV-p27抗原总阳性率为1.27%(680/5 356),2020年、2021年、2022年、2023上半年ALV-p27阳性率分别为:2.68%(251/9 377)、1.27%(340/26 678)、0.77%(64/8 266)、0.28%(25/9 035)。3个品系的鸡均保持低水平阳性率,且阳性率呈逐年下降趋势。

表1 2020年1月—2023年6月3个不同品系鸡ALV检测阳性率

比较3个品系鸡的ALV-p27抗原总阳性率可知,该种鸡场阳性率总体呈下降趋势:2020年2.28%(451/19 816)、2021年1.75%(1498/85 561)、2022年1.23%(521/42 347)、2023上半年0.42%(53/12 672)。结果表明,该种鸡场禽白血病控制和净化工作取得了一定效果。

2.2 3个品系鸡雏鸡胎粪、公鸡全血及母鸡全血p27抗原检测结果

2020年1月—2023年6月,花鸡共检测雏鸡胎粪5 309份,阳性率0.62%(33/5 309);公鸡全血1 159份,阳性率1.21%(14/1159);母鸡全血4 637份,阳性率1.26%(585/46 377),如表2所示。麻鸡共检测雏鸡胎粪7 626份,阳性率3.15%(240/7 626);公鸡全血1 136份,阳性率2.11%(241 136);母鸡全血45 433份,阳性率2.03%(922/45 433),如表3所示。乌鸡共检测雏鸡胎粪8 116份,阳性率0.32%(26/8 116);公鸡全血1 103份,阳性率1.45%(16/1 103);母鸡全血44 137份,阳性率1.45%(639/44 137),如表4所示。

表2 2020年1月—2023年6月花鸡雏鸡胎粪、公鸡全血、母鸡全血p27抗原检测结果

表3 2020年1月—2023年6月麻鸡雏鸡胎粪、公鸡全血、母鸡全血p27抗原检测结果

表4 2020年1月—2023年6月乌鸡雏鸡胎粪、公鸡全血、母鸡全血p27抗原检测结果

由表2～4可知,2020年1月—2023年6月,花鸡雏鸡胎粪阳性率从2.48%(14/564)下降至0.00%(0/62)。公鸡全血阳性率从1.90%(4/210)下降至0.00%(0/14)。母鸡全血阳性率从1.82%(153/8 409)下降至0.36%(2/550)。麻鸡雏鸡胎粪阳性率较其他2种品系鸡高,且有回弹现象,2020年阳性率2.37%(8/338)、2021年阳性率3.18%(157/4 935)、2022年阳性率4.52%(75/1 661)、2023年阳性率3.61%(25/692)。公鸡全血阳性率从4.55%(1/22)下降至0.00%(0/57)。母鸡全血阳性率从2.23%(20/896)下降至0.04%(1/2 262)。乌鸡雏鸡胎粪阳性率下降趋势不明显,2020年阳性率0.30%(3/995),2021年阳性率0.49%(10/2 041),2022年阳性率0.00%(0/1 022),2023年阳性率0.32%(13/4 058)。公鸡全血阳性率从2.94%(6/204)下降至0.00%(0/121),母鸡全血阳性率从2.96%(242/8 178)下降至0.27%(13/4 856)。

2.3 鸡群不同生长周期排毒情况

3个不同品系的鸡在不同生长周期检测过程中呈现出不规律的排毒期。花鸡排毒高峰在1日龄、育成阶段(第8周)、开产期(22～26周)。麻鸡排毒高峰在1日龄、育成阶段(第10周)、开产期(23～29周)及继代前(第42周)。乌鸡排毒高峰在1日龄、育成阶段(第11周)、开产期(18～27周)。可根据感染规律对不同品系的鸡选择最佳ALV净化时间,从而提升净化效率,降低净化成本。

由图1～3可知,花鸡与乌鸡不同周龄的ALV-p27抗原阳性率较低,而麻鸡不同周龄的ALV-p27抗原阳性率较高。1日龄时,花鸡与乌鸡阳性率分别为0.62%和0.32%,麻鸡的感染率为3.47%。花鸡与乌鸡最高峰的阳性率分别为3.0%和3.96%,麻鸡最高峰时的阳性率为9.96%。

图1 花鸡不同生长周期p27抗原阳性率

由图1可知,花鸡1日龄时阳性率为0.62%,第8周来到第1个峰值3.03%,第22、26周阳性率峰值为2.1%和2.3%。之后的阳性率逐步回落,保持较低阳性率。因此,可选择在1日龄、育成阶段(第8周)、开产期(22～26周)进行ALV净化。

由图2可知,麻鸡1日龄时阳性率为3.47%,第10周到达第1个峰值6.35%,接下来阳性率有所回落,第23、29周时阳性率达到5.09%和9.79%,在第42周再次达到高峰值3.48%,之后阳性率逐步回落至较低水平。因此,应分别在1日龄、育成阶段(第10周)、开产期(23～29周)及继代前(第42周)进行ALV净化。

图2 麻鸡不同生长周期p27抗原阳性率

由图3可知,乌鸡在不同生长周期感染规律与花鸡相似。1日龄时阳性率为0.32%,第11周阳性率达到第1个高峰2.40%,之后有所回落,第18、27周分别再次到达峰值3.96%和2.08%,之后回归较低感染水平。因此,可分别在1日龄、育成阶段(第11周)、开产期(18～27周)进行ALV净化。

图3 乌鸡不同生长周期p27抗原阳性率

3 讨论

ALV主要为垂直传播,对疫苗不产生免疫应答,目前尚无切实可行的控制方法。因此,种鸡场疫病净化是控制病毒传播的有效方法[6]。通过展开对种鸡ALV的检测,不断淘汰阳性鸡,最终达到净化的目的。广西壮族自治区具有丰富的家禽养殖资源,花鸡、麻鸡、乌鸡为广西地方优良鸡品系。做好3个品系鸡的ALV控制和净化工作对发展广西养鸡业有着重要意义。

本研究抽检结果表明,ALV在鸡群中存在一定范围的感染。花鸡、麻鸡、乌鸡3个品系鸡中,麻鸡的ALV-p27抗原阳性率总体较其他2个品系鸡的阳性率高。这提示了该种鸡场麻鸡的感染ALV风险较高,在开展净化工作的过程中应加大对麻鸡的抽检数量,增加抽检次数,及时淘汰阳性鸡。同时也需要控制ALV水平传播因素,如:鸡场卫生消毒、种蛋及种蛋库的消毒、孵化室及孵化器的消毒、活疫苗外源病毒监测等,及时采取具体措施,做好ALV控制和净化工作。

3个品系鸡在不同年间的ALV-p27抗原阳性率偶有回弹,花鸡在2022年ALV-p27抗原阳性率为0.27%(28/10 526),而在2023上半年ALV-p27抗原阳性率却为0.32%(2/626)。麻鸡在2020年ALV-p27抗原总阳性率为2.31%(29/1 256),而在2021年ALV-p27抗原总阳性率却为2.76%(727/2 673)。这些年间的ALV-p27抗原总阳性率均较上一年的阳性率有所提升。因此在抽检过程中,需要考虑到采集样本的分布均匀性,避免因样本采集分布不均匀而导致的阳性率升高。2020年1月—2023年6月,ALV-p27抗原总体阳性率呈下降趋势,这表明该种鸡场开展的ALV控制和净化工作是积极有效的。

从对3个品系鸡不同样本的p27抗原阳性率看,3个品系鸡的公鸡全血及母鸡全血p27抗原阳性率总体呈逐年下降趋势,而麻鸡及乌鸡的雏鸡胎粪p27阳性率出现回弹现象。这表明即便已分别在1日龄、育成阶段、开产期及继代前进行ALV净化的阴性鸡群,仍然可能存在低水平感染的阳性雏鸡。因此,需要经过多次重复的抽查,淘汰阳性鸡,有效控制ALV的垂直传播,从而达到ALV净化目的。

不同品种或品系的鸡对病毒的抵抗力差异很大。因此,通过监测各品系鸡不同生长周期的ALV-p27抗原阳性率,可为优化该品系鸡的ALV控制和净化方案提供重要的数据支撑。通过本研究结果发现,花鸡、麻鸡、乌鸡3品系的鸡中,在1日龄核心群全部进行胎粪检测,以家系淘汰阳性雏鸡和母本,育成阶段的净化工作应分别在第8周、第10周和第11周之前,开产期的净化工作分别在第22周、第23周和第18周前。3个品系鸡在育成阶段均出现2次高峰,因此应在此期间开展2次检测,以达到更理想的净化效果。花鸡和乌鸡在经过育成阶段净化后,阳性率回落,保持低感染率,这表明对这2种品系鸡的ALV净化措施是符合其生长排毒规律的。而麻鸡,在开产期第42周再次出现感染高峰值3.48%,在调整净化方案,加大公鸡的检测量后,阳性率回落至1%以下。由此可见对于不同原种鸡核心群的ALV净化来说,并没有一个完全相同的标准方案[7]。应根据实际检测情况,及时调整净化方案。

4 结束语

ALV控制和净化是一个长期的过程,净化人员需要在这个过程中根据实际情况不断调整净化方案,以达到有效的净化目的。该种鸡场通过2020年1月—2023年6月的ALV净化工作,有效降低了ALV的阳性率,为AL控制和净化工作提供了有效的经验。