脱羧酶
- L-赖氨酸脱羧酶的表达、纯化及其酶学性质研究
11]。赖氨酸脱羧酶是一种折叠型I型5′-磷酸吡哆醛依赖酶[12],催化L-赖氨酸生产戊二胺,存在于植物[13]、动物[14]和各种微生物中[15-19]。2011年,KANJEE等[20-21]发现pH值为5.5时,大肠杆菌CadA具有高催化活性,但在碱性条件下,CadA的催化活性和稳定性显著降低,不利于戊二胺(强碱)的生产。2016年,李乃强等[22]对产酸克雷伯氏菌的赖氨酸脱羧酶进行异源表达并研究其酶学性质,结果表明,粗酶最适pH为5.5,随着pH增
食品与发酵工业 2023年21期2023-11-26
- 酱油发酵过程中生物胺生成影响因素及其调控研究进展
时代谢出氨基酸脱羧酶氨，使氨基酸发生脱羧反应，导致BAs的产生。因此，在BAs形成过程中，以下因素发挥作用：微生物——分泌促使氨基酸脱羧的酶；前体物质——原料中蛋白质被分解后的游离氨基酸；环境需求——满足微生物生长、脱羧酶活性以及脱羧反应的条件。生物胺的合成有两种途径：一是氨基酸的脱羧作用，包括丙酮酰基团脱羧机制和磷酸吡哆醛脱羧机制；二是酮和醛的转氨和胺化作用。1.1 酱油中BAs种类各种发酵酱油中BAs的类型和含量并不一致，其中酪胺是酱油中含量最丰富的B
中国调味品 2022年12期2022-12-05
- L-天冬氨酸-α-脱羧酶的重组表达、定点突变及高通量检测方法的建立
天冬氨酸-α-脱羧酶（L-aspartate-α-decarboxylase，EC 4.1.1.11，panD）属于氨基酸脱羧酶的一种，能够催化L-天冬氨酸脱去α位的羧基生成β-丙氨酸。该酶最早是由Williamson等［1］从大肠杆菌（Escherichia coli）中分离得到，验证了大肠杆菌中L-天冬氨酸到β-丙氨酸的代谢途径。目前已有多种不同来源的panD的研究报道，主要集中在大肠杆菌［2］、谷氨酸棒状杆菌［3］（Corynebacterium g
生物技术通报 2022年5期2022-06-10
- 多巴脱羧酶对异色瓢虫生殖力的调控机制
关键酶——多巴脱羧酶(DOPA decarboxylase, DDC, EC 4.1.1.28)的基因表达后，异色瓢虫雌虫的生殖力明显下降。但目前，多巴脱羧酶对于异色瓢虫生殖的具体调控机制还未见报道。多巴脱羧酶(DDC)是黑色素合成过程中关键转化酶(Hiruma and Riddiford, 2009)，除了参与昆虫表皮的黑色素合成过程，还与昆虫胚胎发育、幼虫蜕皮、表皮骨化等有关(Arakaneetal., 2009; Wang Setal., 2013;
昆虫学报 2022年1期2022-02-15
- 赖氨酸脱羧酶分子改造及其催化合成戊二胺
-7]。氨基酸脱羧酶广泛应用于各种生物胺的合成,氨基酸脱羧酶主要分为2大类：磷酸吡哆醛(pyridoxal phosphate,PLP)依赖型和丙酮酸依赖型。PLP依赖型酶通常催化多种反应,其活性位点内的赖氨酸残基高度保守,从而促进其与辅因子PLP结合[8]。赖氨酸脱羧酶是催化L-赖氨酸脱羧生成戊二胺关键酶,其需要PLP作为辅因子。大肠杆菌赖氨酸脱羧酶ldcC通过破坏lysE并通过强合成启动子H30调节其表达,通过整合在谷氨酸棒杆菌PKC染色体上,从而稳定
食品与发酵工业 2022年1期2022-01-24
- 丁三醇合成关键酶的筛选、酶学性质及体外催化
菌的苯甲酰甲酸脱羧酶MDLC。本研究利用分子模拟技术，从京都基因与基因组百科全书数据库(KEGG)、酶数据库BRENDA等数据库中筛选可能催化3-脱氧-D-甘油-戊酮糖酸脱羧形成3,4-二羟基丁醛的酮酸脱羧酶，将其克隆至pEGX-6p-1后于E.coliDH5α中表达，比较目标酶的酶活力大小，对酶活力最高的脱羧酶进行纯化，并对其酶学性质进行分析及体外催化研究，为提高BT生物合成效率提供优异的新酶源。1 材料与方法1.1 材料菌株E.coliBL21、E.c
生物加工过程 2021年6期2022-01-10
- 重组大肠杆菌的酚酸脱羧酶克隆表达及固定化研究
0050)酚酸脱羧酶(phenolic acid decarboxylase，PAD)是一种能够催化酚酸类物质发生非氧化脱羧反应(nonoxidative decarboxylation)的蛋白酶，可以催化分解酚酸类物质产生4-乙烯基衍生物[1]。酚酸类物质的4-乙烯基衍生物中的4-乙烯基苯酚有药物和辛香风味，可用于食品添加剂及香精香料行业[2-4]，对葡萄酒和其他发酵食品和饮料的香气形成具有重大贡献[5]。酶在温和的反应条件下（低温和低压下，pH值介于5
酿酒科技 2021年11期2021-11-24
- 埃及伊蚊来源半胱亚磺酸脱羧酶的性质解析
2)半胱亚磺酸脱羧酶(cysteine sulfinate decarboxylase，EC 4.1.1.36 6.3.2.5 AeCSAD)作为脱羧酶类中的一种，与谷氨酸脱羧酶、真核来源天冬氨酸脱羧酶同为磷酸吡哆醛(pyridoxal 5-phosphatemonohydrate，PLP)依赖型的蛋白酶。最早从动物肝脏中分离得到，具有催化半胱亚磺酸生成牛磺酸的生物活性[1]，对于哺乳动物早期性器官发育[2]和生命活动的正常进行具有重要作用。半胱亚磺酸脱羧
食品与发酵工业 2021年18期2021-10-09
- 血清谷氨酸脱羧酶抗体与胰岛素自身抗体检测对成人隐匿性自身免疫糖尿病诊断的影响
探析血清谷氨酸脱羧酶抗体与胰岛素自身抗体检测的诊断价值，为临床提供参考，具体内容如下。1 资料与方法1.1 一般资料本研究开展时间为2020年03月至2021年06月，研究中研究组实验对象为LADA患者（n=40），男性占比65.00%（26/40）、女性占比 35.00%（14/40）；年龄范围在19-82岁之间，平均（54.86±2.37）岁。同时选择同期在我院诊治的2型糖尿病患者为研究对照组（n=40），男性占比60.00%（24/40）、女性占比
世界最新医学信息文摘 2021年62期2021-09-15
- 大肠杆菌谷氨酸脱羧酶A的基因克隆与表达及其酶学性质
丁酸可由谷氨酸脱羧酶（GAD）催化谷氨酸脱羧制备（图1）[1，21]，因此研制高校廉价的谷氨酸脱羧酶是生物法制备γ-氨基丁酸的关键。图1 L-谷氨酸脱羧制备γ-氨基丁酸Fig.1 Preparation of γ-aminobutyric acid by L-glutamate decarboxylation谷氨酸脱羧酶能催化谷氨酸和谷氨酸盐的α-脱羧反应合成γ-氨基丁酸[1]。它是一种磷酸吡哆醛依赖型酶，包括谷氨酸脱羧酶A（GadA）和B（GadB）2
中国食品学报 2021年8期2021-09-09
- 产4-乙烯基愈创木酚细菌的筛选及酚酸脱羧酶基因的克隆与表达
为底物，经酚酸脱羧酶将阿魏酸脱羧形成4-VG[12]。酚酸脱羧酶是细菌中产4-VG的关键酶，由于4-VG在工业中巨大的潜在商业价值，酚酸脱羧酶被广泛关注，寻找适用于工业生产的酶资源已成为必然需求[13-14]。但是，由于酶易失活、酶活力受环境变化影响较大，寻找一种酶活较高的酚酸脱羧酶解决4-VG产率低的问题急需解决。本研究采用传统筛选方法对酒醅中产4-VG细菌筛选，利用形态学和分子生物学进行菌种鉴定，对产4-VG相关的酚酸脱羧酶基因进行克隆与表达，探究酚酸
中国酿造 2021年7期2021-08-05
- 猪肠道微生物对饲料源氨基酸消失率的影响
1.4 氨基酸脱羧酶与转氨酶的测定 色氨酸脱羧酶、赖氨酸脱羧酶、精氨酸脱羧酶、组氨酸脱羧酶、甘氨酸脱羧酶、酪氨酸脱羧酶的活性测定参照唐志如等[11]和赖星等[12]报道的方法进行。根据南京建成生物工程研究所的试剂盒说明，采用比色法结合紫外分光光度计，测定GOT（谷草转氨酶）、GPT（谷丙转氨酶）、ADA（腺苷脱氨酶）酶活力。1.5 统计分析 采用SAS 9.0 统计软件对测量数据进行单因素方差分析和显著性检验，Microsoft Excel 2010进行数
中国畜牧杂志 2021年6期2021-06-19
- 马鲛鱼中精氨酸脱羧酶的基因克隆及生物信息学分析
，大多可由具有脱羧酶活性的微生物将氨基酸分解生成[4]。生物胺根据结构可划分为芳香族胺、脂肪族胺和杂环族胺；根据组成可分为单胺和多胺。生物胺产生主要有两种方式，一种是游离的氨基酸经微生物的脱羧作用，另一种则通过氨基酸脱羧酶脱羧作用[5]。水产品在运输和贮藏的过程中十分容易受到微生物的污染而产生大量的生物胺，由于其含有大量的氨基酸和蛋白质。一部分微生物可以通过控制氨基酸脱羧酶，产生相应的代谢物质来促进生物胺的产生，从而导致水产品的腐败变质，在水产品中分离得到
现代食品科技 2021年3期2021-03-27
- 谷氨酸脱羧酶抗体和血尿C 肽在儿童糖尿病诊断中的临床意义
018）谷氨酸脱羧酶抗体是近年来新发现的一种糖尿病患者胰岛B 细胞自身抗体， 该抗体与胰岛B 细胞功能、 糖尿病进程密切相关， 可将其作为检测糖尿病有效指标之一［1］。 血C 肽及尿C肽是判断糖尿病患者胰岛B 细胞功能的重要指标。 测定糖尿病患儿的谷氨酸脱羧酶抗体与血C 肽、 尿C 肽， 可有效评估糖尿病进程及胰岛B 细胞功能［2］。 本研究探讨谷氨酸脱羧酶抗体和血尿C 肽在儿童糖尿病诊断中的临床意义， 现报道如下。1 资料与方法1.1 一般资料选择我院2
临床医学工程 2021年1期2021-03-07
- 糖尿病自身免疫抗体联合检测在糖尿病分型中的应用效果
对患者的谷氨酸脱羧酶抗体、胰岛素自身抗体、抗胰岛素细胞抗体进行单项及联合检测，按照试剂盒检测要求进行临床的检测[7]。1.3 观察指标 将对患者的谷氨酸脱羧酶抗体、胰岛素自身抗体、抗胰岛素细胞抗体、三项联合检测的阳性率作为观察指标，并分析这些指标对不同分型糖尿病的阳性比例[8]。1.4 统计学处理 SPSS22.0软件对本研究所有数据进行统计处理，两组阳性率的检测及观察组不同糖尿病分型阳性率的检测等计数资料用[n（%）]表示，组间比较行χ2检验，P＜0.0
中国医药指南 2021年2期2021-02-28
- 定点突变解析短乳杆菌酪氨酸脱羧酶的关键催化位点
物，通过酪氨酸脱羧酶直接生成产物酪胺，具有绿色和高效率的优点，开发应用前景广阔。酪氨酸脱羧酶(TDC，EC 4.1.1.25)是一种磷酸吡哆醛(PLP)依赖型氨基酸脱羧酶，负责合成生物胺和多胺化合物。Sandmeier等[11]通过序列同源性和保守结构域的进化分析，将氨基酸脱羧酶分为4个亚组，其中酪氨酸脱羧酶与3,4-二羟基-L-苯丙氨酸(多巴)脱羧酶、谷氨酸脱羧酶、组氨酸脱羧酶和半胱磺酸脱羧酶属于Group Ⅱ脱羧酶。TDC可以催化L-酪氨酸和L-多巴脱
生物加工过程 2021年1期2021-02-27
- Effects of denosumab treatment in chronic liver disease patients with osteoporosis
水解酶、精氨酸脱羧酶、H2S产生、水杨素、吲哚、溶血和脲酶测定为阴性。MATERIALS AND METHODSStudy design and patientsThis was a retrospective study of denosumab treatment for osteoporosis, which was conducted at the Jikei University School of Medicine (Tokyo, Japan)
- 甘氨酸脱羧酶基因增强子区(-4.2～-2.2 kb)基因图谱绘制及其活性检测
004)甘氨酸脱羧酶(GDC，P-protein)构成甘氨酸裂解系统，该系统还包含H蛋白，T蛋白和L-蛋白，上述蛋白的构成比例为2P:27H:9T:1L[1-2]。该系统催化脊椎动物体内甘氨酸裂解的初始阶段，产生CO2，NH3,N5,N10-亚甲基和NADH+H+，是甘氨酸代谢的主要途径；在植物研究中发现，叶线粒体含有大量的GDC蛋白，主要参与植物光合作用[2-3]593-597。GDC基因突变可导致人类血清甘氨酸累积，最终引起神经系统疾病发生，如非酮症性
锦州医科大学学报 2020年2期2020-06-03
- 发酵肉制品中细菌群落结构及其表皮葡萄球菌生物胺相关基因分析
）具有高氨基酸脱羧酶活性，能够产生尸胺、2-苯乙胺、腐胺和组胺[5-7]。MARTUSCELLI M等[6]从香肠中分离得到51株木糖葡萄球菌（Staphylococcus xylosus），发现其中的21株有体外氨基酸脱羧酶活性，只有7株菌株的酪胺、亚精胺和精胺产量＞10 mg/kg，未检测到组胺的产生[6]。目前，发酵食品中生物胺含量主要通过高效液相色谱（highperformanceliquidchromatography，HPLC）法进行检测，检测
中国酿造 2020年1期2020-03-28
- 袁曙光研究团队揭示赛普霉素脱羧酶 CypD 的底物结合钳运动模式
2929(霉素脱羧酶 CypD 的底物结合钳的运动)”。亲环蛋白 CypD 具有氨基脯氨酸顺反异构酶活性，能催化 Xaa-Pro 之间肽键的顺反异构反应(Xaa 表示任一氨基酸)。当与天然配体 CSA 结合时，CypD 的顺反异构酶活性将被抑制，且与ANT 的结合也会受阻，这影响 MPTP 的开放。以 CypD 为药物靶标设计筛选出的 CypD 抑制剂可用于受损时细胞凋亡及坏死的抑制、外周器官缺血/再灌注损伤的抑制等。由于 CypD 的活性口袋宽敞扁平，即
集成技术 2020年1期2020-02-10
- 基于传统分离培养和高通量测序分析市售咸鳓鱼中微生物多样性
3.2 氨基酸脱羧酶基因扩增以分离菌株基因组DNA 为模板，对组氨酸脱羧酶（hdc）基因、鸟氨酸脱羧酶（odc）基因及赖氨酸脱羧酶基因（ldc）进行扩增，引物序列如表1 所示。扩增体系及条件参考Jaw[14]、De[15]。1%琼脂糖凝胶凝胶电泳检测PCR扩增产物。表1 氨基酸脱羧酶基因扩增引物Table 1 Primers of amino acid decarboxylase gene1.3.3 耐药基因扩增以分离菌株基因组DNA 为模板，对耐药基因s
食品研究与开发 2019年21期2019-11-14
- 四川泡菜产生物胺细菌的筛选及产胺能力验证
1.5 氨基酸脱羧酶基因测定组氨酸脱羧酶hdc基因的引物及扩增程序参考孟甜等的方法进行[9]，酪氨酸脱羧酶tdca基因的引物及扩增程序参考Fernández等的方法进行[10]，鸟氨酸脱羧酶odc基因的引物及扩增程序参考Coton等的方法进行[11]，赖氨酸脱羧酶cacd基因的引物及扩增程序参考De Filippis等[12]的方法进行。1.6 筛选菌产胺能力的验证参考马秀玲等[13]的方法构建OD值对应菌落数的标准曲线。将筛选菌保持整个体系105CFU/
中国调味品 2019年7期2019-07-20
- 霉菌纯种制曲豆豉在传统后发酵中的成分变化及其与生物胺相关性的研究
主要由氨基酸经脱羧酶催化脱羧反应产生。发酵豆豉满足BA产生的3个条件：存在分泌氨基酸脱羧酶的微生物；存在对应氨基酸；存在有利于微生物生长且有助于分泌氨基酸脱羧酶的环境条件[4-7]。目前大多数企业仍然是利用多年形成优势菌群的曲房，采用自然接种方式制曲，微生物区系较复杂，造成产品中生物胺的含量较高且不稳定，不同企业和同一企业不同批次产品中BA的含量也有较大的差异。研究发现，不同的制曲方式和发酵形式会影响豆豉中BA的类型和含量[8-9]。游离氨基酸大量存在于豆
食品与发酵工业 2019年5期2019-03-28
- 饲粮添加β-葡聚糖对断奶仔猪生长性能和肠道微生物区系的影响
物区系和氨基酸脱羧酶活力的影响，为β-葡聚糖在断奶仔猪上的应用提供参考依据。1 材料与方法1.1 试验材料和试验设计试验选用30头28日龄断奶健康的(大约克×荣昌)×长白内三元杂交阉公仔猪，采取单因素完全随机分组试验设计，分3个组：对照组(基础饲粮)、杆菌肽锌组(在基础饲粮中添加100 mg/kg杆菌肽锌，杆菌肽锌购自大东方动物药业有限公司)、β-葡聚糖组(在基础饲粮中添加400 mg/kg β-葡聚糖，β-葡聚糖购自安徽中南科技生物有限公司，纯度99%)
动物营养学报 2018年11期2018-11-16
- 可同时进行两种厌氧呼吸的细胞
丙酮酸在丙酮酸脱羧酶和乙醇脱氢酶的作用下，形成乙醇和CO2；或丙酮酸经乳酸脱氢酶的催化形成乳酸。因此，丙酮酸脱羧酶、乙醇脱氢酶和乳酸脱氢酶可认为是厌氧呼吸途径中的关键酶。在动物体内不存在丙酮酸脱羧酶[1]，因此动物细胞厌氧呼吸的产物只能是乳酸。2 一些植物细胞可兼具两种厌氧呼吸方式通常认为，玉米胚、马铃薯块茎等植物细胞进行厌氧呼吸时产生乳酸，而其根部细胞厌氧呼吸时产生乙醇。由于同种植物，其细胞内的遗传物质是相同的，所以玉米、马铃薯、甜菜等植物细胞中可同时存
生物学教学 2018年6期2018-08-08
- 甜瓜S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶基因的克隆及白粉病诱导表达分析
S-腺苷蛋氨酸脱羧酶基因Sc-SAMDC的克隆和表达分析. 中国农业科学, 2010, 43(7): 1448-1457.[14]Wang XL, Liu XX, Wang SY, et al. Cloning and differential expression analysis ofS-adenosylmethionine decarboxylase geneFaSAMDCin tall fescue. Acta Pratacult Sin, 201
生物工程学报 2018年6期2018-06-26
- 华中农大揭示了马铃薯抗寒的分子机制
代谢途径精氨酸脱羧酶基因ADC1对马铃薯驯化耐寒的重要作用”的研究论文，进一步揭示了马铃薯抗寒的分子机制。马铃薯是世界第四大粮食作物，由于可供利用的抗寒资源缺乏，抗寒机理不明，致使马铃薯抗寒育种长期止步不前。该研究经过近十年的努力，通过筛选抗寒野生种，利用转录组和代谢组结合的策略，发现多胺代谢途径中与腐胺合成相关的基因在低温条件下特异上调表达，且腐胺受冷诱导特异累积。进一步比较马铃薯对低温敏感程度不同的基因型，明确了精氨酸脱羧酶所调控的腐胺合成是响应低温的
蔬菜 2018年11期2018-01-16
- 研究发现植物草酸代谢途径关键酶影响玉米营养品质
——草酰辅酶A脱羧酶，揭示了草酸代谢参与籽粒储藏物质积累和营养品质形成的分子机理。草酸是最简单的二元酸，在植物体内的含量非常高。草酸在调控金属胁迫、离子平衡和昆虫防御等方面起积极作用。然而，过量草酸不仅会影响植物自身发育，也会影响包括钙元素在内的多种矿物金属矿物元素的利用；人体从食物中摄入草酸过多会和钙形成草酸钙，诱发形成肾结石。有报道显示，植物体内存在草酸合成和降解途径，其中一条降解途径由4种酶共同作用，分别为草酰辅酶A合成酶、草酰辅酶A脱羧酶、甲酰辅酶
蔬菜 2018年10期2018-01-16
- 烟草精氨酸脱羧酶的蛋白质特性分析
0）烟草精氨酸脱羧酶的蛋白质特性分析李雁斌1，靳双珍1，杨玉坤2，王德勋1，户艳霞1，范志勇1，苏家恩1（1.云南省烟草公司大理州公司，云南 大理 671000；2.云南省烟草公司大理州公司剑川县分公司，云南 大理 671300）为了研究参与烟草多胺合成的精氨酸脱羧酶的蛋白特性，运用生物信息学的方法分析了烟草精氨酸脱羧酶的理化特性、系统进化、氨基酸序列、保守区域和二级结构。结果表明：烟草精氨酸脱羧酶的等电点为4.99～6.78，氨基酸数为558～733，疏
湖南农业科学 2017年10期2017-11-17
- 多重PCR法同时检测黄酒酒曲中多种生物胺产生菌
阴性菌的组氨酸脱羧酶基因的引物特异性差，重新设计了该引物，在此基础上，建立了可同时检测酪胺、腐胺和组胺产生菌的多重PCR方法，并优化了多重PCR反应条件为退火温度50℃，Mg2+浓度1.0 mmol/L，引物浓度配比为Tdc-F/R 0.2 μmol/L，Hdc1/2 0.4 μmol/L和Odc3/4 0.4 μmol/L。该方法特异性强，对酪胺、腐胺和组胺产生菌的灵敏度分别为1.2 ng/μL、1.5 ng/μL和1.5 ng/μL，可用于黄酒酒曲中生
中国酿造 2017年10期2017-11-17
- 豆豉发酵常用毛霉和米曲霉菌株产生物胺能力的评价
毛霉具有组氨酸脱羧酶活性。霉菌代谢产生生物胺及产生生物胺的种类和含量无种属特异性，但有菌株个体特异性。豆豉；生物胺；毛霉；米曲霉；氨基酸脱羧酶生物胺是一类含氮低分子量有机化合物[1]，广泛存在于多类食品中，对人体细胞发挥正常生理功能起着重要作用，但摄入的浓度过高会对人体产生毒害作用，造成人体心血管和神经系统的损伤[2]。其中，组胺毒性最大，酪胺次之[3]。腐胺和尸胺虽然本身的毒性很低，但是它们的存在会使组胺和酪胺的毒性增强[4]。豆豉是以黄豆或大豆为主要原
食品与发酵工业 2017年9期2017-11-03
- 服左旋多巴，宜低蛋白饮食
黏膜含有多巴胺脱羧酶，将左旋多巴转化为多巴胺，而多巴胺是不能进入大脑。苄丝肼则可以抑制多巴胺脱羧酶的作用，保证左旋多巴不被分解。另外，高蛋白质膳食摄入会产生多量的中性氨基酸，减少左旋多巴的吸收。所以口服美多芭的患者，应该采取低蛋白饮食，限制肉类、乳制品和蛋类，可以食用汤、水果、蔬菜、甜食、非奶类饮料，服药时间安排在饭前半小时以上。由于患者晚上睡眠后症状减轻，而且晚上活动量减少，所以晚餐可以不必限制蛋白的摄入。維生素B6是多巴胺脱羧酶的辅酶，可以促进脑外多巴
家庭医药 2017年5期2017-05-18
- 草酸脱羧酶的修饰及其对草酸钙的吸附研究
0006)草酸脱羧酶的修饰及其对草酸钙的吸附研究蔡杏华1,巫 佳1,林日辉2,3，*,贺俊斌1,武怡辰2,王心雨2(1.广西民族大学海洋与生物技术学院,广西高校微生物与植物资源利用重点实验室,广西南宁 530006;2.广西民族大学化学化工学院,广西高校化学与生物转化过程新技术重点实验室,广西南宁 530006；3.广西多糖材料与改性重点实验室培育基地，广西南宁 530006)为了提高草酸脱羧酶(OXDC)的适用性及其对草酸钙的吸附性能,本实验采用乙二胺四
食品工业科技 2017年7期2017-04-13
- 枯草芽孢杆菌精氨酸脱羧酶基因speA的表达与蛋白纯化
芽孢杆菌精氨酸脱羧酶基因speA的表达与蛋白纯化曹宁，王亚娟，钟杰，佟硕秋，吴拥军*（贵州大学生命科学学院，贵州贵阳550025）根据枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）BJ3-2的精氨酸脱羧酶（ADC）的编码基因speA序列设计特异性酶切引物，克隆基因speA序列。测序结果显示，基因speA全长为1 473 bp，编码490个氨基酸，分子质量为58 ku。基因speA克隆至原核表达载体，获得重组菌pET28a-speA/BL21，十二烷基硫
中国酿造 2017年3期2017-04-07
- 谷氨酸脱羧酶基因工程改造研究进展
500)谷氨酸脱羧酶基因工程改造研究进展靳春鹏1，杨套伟2,3，徐美娟2，张显2，饶志明2,3*1(国家知识产权局专利局专利审查协作北京中心, 北京, 100081) 2(江南大学 生物工程学院，工业生物技术教育部重点实验室，江苏 无锡，214122) 3(江南大学(如皋)食品生物技术研究所，江苏 如皋，226500)γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)是一种具有重要生理功能的天然氨基酸，广泛应用在医药、食品、化工等行业。利用谷
食品与发酵工业 2016年12期2017-01-09
- 大肠杆菌合成1,2,4-丁三醇的途径优化
的新的2-酮酸脱羧酶——KivD，并构建了表达该酶的重组菌株BW-025。在此基础上，通过初步条件优化，将BT产量提高至2.38 g/L；进一步调节途径中各个酶的表达量，探究了它们对BW-025合成BT的影响，最终获得了BT产量较BW-025提高了48.62%的重组菌株BW-074。关键词:D-木糖，1,2,4-丁三醇，大肠杆菌，2-酮酸脱羧酶，途径优化Received: March 25, 2015; Accepted: May 4, 2015Suppo
生物工程学报 2016年1期2016-07-04
- EMA批准抗帕金森病药物 Opicapone上市
旋多巴 /多巴脱羧酶抑制药用于对上述药物合用疾病控制不稳定的帕金森病和剂末运动波动成年患者。本药为对儿茶酚氧位甲基转移酶（COMT）具高亲和性的外周选择性及可逆性抑制药，在体内可转变为缓慢复杂的解离速率常数且作用时间长（＞24小时）。在多巴脱羧酶抑制药（DDCI）中，COMT为左旋多巴的主要代谢酶，催化大脑及周围DDCI转换为三氧化甲基多巴。接受左旋多巴及外周DDCI（如卡比多巴或苄丝肼）患者，本药可增加左旋多巴血药浓度，提高对左旋多巴的临床应答。本药的安
中国合理用药探索 2016年9期2016-01-25
- 通过DNA改组技术定向进化赖氨酸脱羧酶基因cadA和ldc
定向进化赖氨酸脱羧酶基因cadA和ldc张 凯，蔡 恒，汪 晨（南京工业大学 生物与制药工程学院，江苏 南京 211800）利用DNA改组技术对赖氨酸脱羧酶野生型基因ldc进行随机突变，在大肠杆菌Escherichia coli JM109中构建赖氨酸脱羧酶突变体库。从E.coli JM109和蜂房哈夫尼菌Hafnia alvei AS1.1009中分别克隆出赖氨酸脱羧酶基因cadA和ldc。查询NCBI数据库得知，二者的同源性为75%。分别构建重组质粒p
生物加工过程 2015年5期2015-11-11
- 探讨谷氨酸脱羧酶抗体及C肽、胰岛素水平在儿童1型糖尿病的临床价值
GAD(谷氨酸脱羧酶抗体)是诊断中较为常用的自身抗体。在儿童1型糖尿病的诊断中,由于患儿通常合并酮症酸中毒,此类患儿的谷氨酸脱羧酶抗体的反映情况更加明显。该次研究对1型糖尿病患儿进行谷氨酸脱羧酶抗体及C肽、胰岛素水平的监测,获得较好的诊断效果,具体报告如下。1 资料与方法1.1 一般资料选取从2012年10月—2014年10月在该院就诊的30例儿童1型糖尿病患者,将其作为观察组,再选取30例健康儿童作为对照组。其中观察组有男性患儿18例,女性患儿12例,年
糖尿病新世界 2015年9期2015-09-04
- 枯草芽孢杆菌BJ3-2 S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶基因speD的克隆与序列分析
-腺苷甲硫氨酸脱羧酶（S-adenosylmethionine decarboxylase，SAMDC 或AdoMet-DC）是多胺合成代谢中的3个关键酶之一[4-5]。其存在于细菌、真菌、古生菌和植物体内，在多胺生物合成过程中起着重要的作用，它以S-腺苷甲硫氨酸（S-adenosylmethionine，SAM）为底物催化形成脱羧S-腺苷甲硫氨酸，为精胺和亚精胺的合成提供氨丙基，是精胺和亚精胺合成的限速酶[6-7]。近年已有人类及多种植物的SAMDC 基
中国酿造 2015年1期2015-04-23
- 血清谷氨酸脱羧酶抗体与慢性乙型肝炎的相关性探究
［1］。谷氨酸脱羧酶抗体存在于人体内，今年有相关研究发现，它的阳性几率可以作为评价慢性乙肝炎的临床指标［2］。本文选取我院2010年2月－2012年2月收治的118 名慢性乙型肝炎患者，男性62 名，女性56 名作为实验组，此外选取30 名同一时间段的健康者作为对比组。检测他们体内的谷氨酸脱羧酶抗体阳性的几率，并且结合实验组以及对照组患者慢性肝炎严重程度来衡量谷氨酸脱羧酶抗体阳性率与肝炎严重程度是否有关系，考察此置是否能作为评判慢性肝炎的检测的临床判断指标
大家健康(学术版) 2015年5期2015-04-12
- 发酵香肠中产生物胺的微生物及其检测方法研究
响，具有氨基酸脱羧酶活性的微生物会导致生物胺的大量积累，准确全面地检测产生物胺的微生物对保障香肠的安全具有重要意义。本文综述了发酵香肠中生物胺的形成途径并重点介绍了产生物胺的微生物及其检测方法，以期为研发安全的发酵剂和保障发酵香肠的品质提供参考。发酵香肠，生物胺，微生物，检测方法发酵香肠是指将绞碎的肉和动物脂肪同盐、糖、发酵剂和香辛料等混合后灌进肠衣，经过微生物发酵制成的具有典型发酵风味特性的肉制品。生物胺是由氨基酸脱羧或醛和酮氨基化形成的小分子量含氮化合
食品工业科技 2015年12期2015-04-01
- 谷氨酸脱羧酶抗体检测在儿童糖尿病中的应用
0000谷氨酸脱羧酶抗体检测在儿童糖尿病中的应用贺岩长春市儿童医院科研室，吉林 长春 130000目的 探讨谷氨酸脱羧酶抗体检测在儿童糖尿病中的应用价值。方法选取2013年1月—2015年1月在医院进行谷氨酸脱羧酶抗体检测的97例糖尿病患儿作为观察组，并选取97例正常儿童作为对照组，对两组谷氨酸脱羧酶抗体阳性率做比较。结果经过检测后，观察组谷氨酸脱羧酶抗体阳性率为97.9%，对照组谷氨酸脱羧酶抗体阳性率为0，两组比较差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论
糖尿病新世界 2015年17期2015-02-11
- 糖尿病检测谷氨酸脱羧酶抗体、胰岛细胞抗体和胰岛素自身抗体的临床意义
尿病检测谷氨酸脱羧酶抗体、胰岛细胞抗体和胰岛素自身抗体的临床意义展秀君佳木斯中医院,黑龙江佳木斯 154002目的探讨分析尿病检测谷氨酸脱羧酶抗体、胰岛细胞抗体和胰岛素自身抗体的临床意义。方法选取该院门诊2014年1月～12月间接诊的30例Ⅰ型糖尿病患者（A组）和30例Ⅱ型糖尿病患者（B组）及30例健康体检者（C组），以CLIA法、RIA法测定、比较3组血清内谷氨酸脱羧酶抗体、胰岛细胞抗体和胰岛素自身抗体的存在情况。结果3组血清内谷氨酸脱羧酶抗体、胰岛细胞
糖尿病新世界 2015年7期2015-02-11
- 没食子酸脱羧酶及酶法制备焦性没食子酸研究进展
91）没食子酸脱羧酶及酶法制备焦性没食子酸研究进展张亮亮1，2，汪咏梅1，2*，徐曼1，陈笳鸿1（1.中国林业科学研究院林产化学工业研究所；生物质化学利用国家工程实验室；国家林业局林产化学工程重点开放性实验室；江苏省生物质能源与材料重点实验室，江苏南京 210042；2.中国林业科学研究院林业新技术研究所，北京 100091）对没食子酸脱羧酶及酶法制备焦性没食子酸研究进展进行了介绍和综述，重点介绍了产没食子酸脱羧酶的微生物种类、发酵时间、底物浓度、pH值、
生物质化学工程 2014年4期2014-07-05
- 枯草芽孢杆菌BJ3-2精氨酸脱羧酶基因speA的克隆与序列分析
025）精氨酸脱羧酶（arginine decarboxylase，ADC）广泛分布于细菌、真菌、古生菌和植物体内，在多胺生物合成过程中扮演重要的角色[1]，是多胺合成途径中关键酶[2-3]。在枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）中多胺生物合成只有一条途径：始于精氨酸（arginine）[4]，由精氨酸脱羧酶作用脱羧生成的胍基丁胺（agmatine），经过胍基丁胺酶（agmatinase）水解生成腐胺（putrescine，Put）和尿素（u
中国酿造 2014年5期2014-04-24
- 枯草芽孢杆菌BJ3-2赖氨酸脱羧酶基因yaaO的克隆与序列分析
）假定的赖氨酸脱羧酶（lysine decarboxylase，LDC，EC 4.1.1.18）存在于大多数微生物中，如大肠杆菌（Escherichia coli）、蜂房哈夫尼菌（Hafnia alvei）、尸杆菌（Bacterium cadaveris）、枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）等。在微生物的合成途径中，LDC可逆的将赖氨酸（lysine）通过脱羧反应生成尸胺[1-2]。该酶是诱导性胞内酶，需要磷酸吡哆醛（pyridoxal 5
中国酿造 2014年12期2014-04-12
- α-乙酰乳酸脱羧酶克隆表达方法
）α-乙酰乳酸脱羧酶克隆表达方法贺艳1，张裕君1，赵天来1，赵卫东1，郑文杰1，史光华2，赵璟源1，刘跃庭1，刘伟1，张霞1（1.天津出入境检验检疫局，天津300461；2.中国合格评定国家认可中心，北京100062）双乙酰是啤酒生产工艺中重要的风味物质，为控制啤酒生产中双乙酰的含量，缩短啤酒熟化时间，基因工程技术改造啤酒酵母已应用得非常广泛。综述国内外基因工程技术克隆表达方法，介绍检测策略。α-乙酰乳酸脱羧酶；克隆；检测双乙酰是啤酒生产工艺中重要的风味物
食品研究与开发 2014年3期2014-04-07
- 人源多巴脱羧酶的表达、纯化以及高通量抑制剂筛选模型的建立
周组织中被多巴脱羧酶(DDC)大量地降解，只有约口服用药量1%的左旋多巴能够到达脑内并被多巴胺神经元摄取后转而变为多巴胺发挥替代治疗作用[6]。因此，临床上抑制外周多巴脱羧酶的活性是十分必要的，左旋多巴和多巴脱羧酶抑制剂的联合用药是治疗的常用方法[7-8]。多巴脱羧酶是一种维生素B6依赖酶。不仅可以催化多巴产生多巴胺，色氨酸产生色胺，也能催化5-羟基色氨酸产生5-羟基色氨。目前研究还发现多巴脱羧酶和高血压、抑郁、失眠、厌食等疾病相关。多巴脱羧酶已知的抑制剂
生物学杂志 2014年6期2014-03-25
- 冷却猪肉中特定腐败菌的靶向筛选
败菌；用氨基酸脱羧酶检测管从双层结晶紫中性红胆盐葡萄糖琼脂（VRBDA）平板上分离的66 株菌中筛选到21株产氨基酸脱羧酶腐败菌。采用根癌农杆菌（Agrobacterium tumefaciens）为报告菌再从上述腐败菌中筛选出产N-酰基高丝氨酸内酯（N-acyl homoserine lactones，N-AHLs）的菌株（产嗜铁素的51 株，产氨基酸脱羧酶的19 株）。根据实验需要，选取其中部分菌株进行16S rDNA鉴定，最后得到产嗜铁素和AHLs的
食品科学 2014年9期2014-01-20
- 慢性心衰大鼠下丘脑室旁核谷氨酸脱羧酶对交感神经活动的影响
kDa的谷氨酸脱羧酶（GAD67）和分子量为65kDa的谷氨酸脱羧酶（GAD65）两种亚型存在[6-7]，其中GAD67在GABA合成中发挥主要作用[8]。另有研究报道显示心衰状态下下丘脑室旁核GABA合成量明显下降[9-10]，研究结果提示心衰状态下下丘脑室旁核谷氨酸脱羧酶表达量发生改变。这种下丘脑室旁核合成γ-氨基丁酸限速酶表达的失衡及其功能的衰减与心衰状态下交感神经兴奋亢进密切相关，而慢性心衰大鼠PVN由谷氨酸脱羧酶参与的交感神经抑制作用是否发生改变
长春师范大学学报 2013年6期2013-12-29
- 磁性壳聚糖微球固定化米糠内源酶的研究
122）谷氨酸脱羧酶（GAD）作为米糠内源酶，可以专一的催化谷氨酸或其钠盐脱羧转化为γ－氨基丁酸（GABA）。而γ－氨基丁酸作为一种重要的中枢神经系统抑制剂，具有多种重要的生理功能［1］，如降血压、治癫痫、抗衰老、调节激素等。鉴于游离酶不便于重复利用，而与游离酶相比，固定化酶便于回收以重复利用，且相对容易分离，故越来越多的研究转向固定化酶。如今，固定化酶的技术迅速发展，在多个领域都得到了较为广泛的应用，如食品、医药、化工等［2，3］。磁性壳聚糖微球作为固定
食品与机械 2013年3期2013-09-07
- 偶联钠离子转运草酰乙酸脱羧酶研究进展
偶联钠离子转运脱羧酶作为一个酶家族，在细菌质膜上催化脱羧反应进行能量转化同时，偶联钠离子、质子跨膜运输，属于初级钠离子泵。该酶家族主要包括：草酰乙酸脱羧酶（Oxaloacetate decarboxylase）[5-6]、甲基丙二酰辅酶A脱羧酶（Methylmalonyl-CoA decar⁃boxylase）[7]、戊烯二酰辅酶A脱羧酶（Glutaconyl-CoA decarboxylase）[8]、丙二酸盐脱羧酶（Malonate decarboxy
东北农业大学学报 2013年3期2013-08-08
- 交联草酸脱羧酶聚集体的制备及其性质
19)交联草酸脱羧酶聚集体的制备及其性质梁 跃1，林日辉1,*，黄文勤2，秦 梦1，李香香1，何美卿1，郑元博3(1.广西民族大学化学化工学院，化学与生物转化过程新技术广西高校重点实验室，广西 南宁 530006；2.南宁奕德环境科技有限公司，广西 南宁 530003；3.东北大学理学院，辽宁 沈阳 110819)为了获得缓解泌尿系统草酸盐结石病症的酶制剂，用无载体固定化方法üü交联酶聚集体(CLEAs)制备交联草酸脱羧酶聚集体。使用基因工程菌E.coli
食品科学 2013年1期2013-03-07
- 重组草酸脱羧酶的表达及酶学性质研究*
06)重组草酸脱羧酶的表达及酶学性质研究*林日辉，许丽莉，农勉，张陆成(广西民族大学化学与生态工程学院，化学与生物转化过程新技术广西高校重点实验室，广西南宁，530006)研 究了重组草酸脱羧酶的表达及其酶学性质。经IPTG诱导，每克湿重菌体收获草酸脱羧酶活力820 U，经Ni－NTA亲和层析酶液纯化2.07倍，酶活力回收60.38%。酶促反应的最适温度为50～55℃，最适pH值为3.5，添加EDTA及Fe2+对酶活力有促进作用，Mn2+抑制酶活。在pH4
食品与发酵工业 2011年2期2011-12-18
- 嗜热链球菌谷氨酸脱羧酶基因及其侧翼区序列分析
热链球菌谷氨酸脱羧酶基因及其侧翼区序列分析林 谦1，杨胜远2，陆兆新3,*，吕凤霞3，别小妹3，邹晓葵3(1.玉林师范学院化学生物系，广西 玉林 537000； 2.韩山师范学院生物系，广东 潮州 521041；3.南京农业大学食品科技学院，江苏 南京 210095)从嗜热链球菌Streptococcus thermophilus Y-2的谷氨酸脱羧酶基因(gadB)及其两侧旁邻序列出发，在GenBank中分别用Blastn、Blastx搜索同源序列。ga
食品科学 2011年3期2011-03-30
- 痰塔特姆菌致新生儿脑膜炎1例
-），苯丙氨酸脱羧酶（+），赖氨酸脱羧酶（-），鸟氨酸脱羧酶（-），精氨酸脱羧酶（-）精氨酸双水解酶（-）明胶酶（-）ONPG（-），葡萄糖酸盐（-），丙二酸盐（-），醋酸盐（-），10U青霉素敏感。用For—复星2000细菌鉴定仪进行鉴定，生物编码符合痰塔特姆菌，鉴定符合率99.99%。药敏试验（K-B法）：青霉素、氨苄青霉素、氨苄西林/舒巴坦、头孢唑林、头孢噻嗚、卡那霉素、苯唑青霉素、氟哌酸、环丙沙星敏感，庆大霉素、红霉素、林可霉素、复方新诺明、新生霉
菏泽医学专科学校学报 2010年4期2010-08-15
- 蔬菜发酵剂乳酸菌产生物胺的检测与评价
和评价。氨基酸脱羧酶基因的PCR检测结果表明，受检菌株中有3株组氨酸脱羧酶阳性菌和22株酪氨酸脱羧酶阳性菌；同时，利用HPLC法对受检乳酸菌在MRS培养基体系和模式蔬菜发酵体系中发酵形成生物胺的水平进行分析。受试乳酸菌在MRS培养基中组胺产生量在4.32～32.15mg/L之间，酪胺产生量在9.22～114.02mg/L之间。在发酵蔬菜体系中，组胺和酪胺的产生量均小于40mg/L。PCR检测结果与HPLC分析结果具有较好的一致性。乳酸菌；发酵蔬菜；生物胺；
食品科学 2010年24期2010-03-24