金标法筛查ＨＢｓＡｇ漏检标本实验室检测结果分析

谭有为　贾夫峰

[摘要] 目的 探讨无偿献血者标本金标法筛查HBsAg的漏检原因及对策。方法 金标法初筛合格后,经ELISA法检测结果呈阳性的标本,再用与初筛同批号金标试纸条重新检测,对漏检原因进行分析。结果 11265份初筛合格标本共检出阳性32份,漏检率0.28%,32份漏检标本用金标法重新检测,阳性16份,弱阳性5份,阴性11份。结论 加强操作人员业务培训和责任心教育,准确掌握反应条件,特别是反应时间,可以进一步降低初筛标本阳性漏检率。

[关键词]金标法; HBsAg; 漏检; 实验室检测

[中图分类号] R512.62;R446 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701(2009)23-115-02

金标法检测HBsAg具有简便、快速、无需特殊仪器设备、可单份操作等优点,是血站系统对无偿献血者献血前HBsAg筛查的主要方法[1]。但在利用金标法初筛HBsAg的过程中,常会出现HBsAg漏检。为了降低漏检率,笔者对金标法初筛合格的血液,经ELISA法检测后发现的阳性标本,再用与初筛相同批号金标试纸条重新检测作对比试验,分析漏检原因,探讨解决办法,现报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 对象 经金标法初筛HBsAg合格后的无偿献血者标本11265份。

1.1.2 试剂 HBsAg金标法试纸条(厦门新创公司提供),ELISA HBsAg试剂盒(由厦门新创公司和北京高达公司提供),所有试剂均为市售合格试剂盒,在有效期内使用。

1.1.3 仪器 TECAN Freedom Evolyzer(瑞士)。

1.2 方法

初筛合格的无偿献血者血液标本,按《献血者健康检查要求》(GB18467-2001),使用两个不同厂家ELISA法试剂进行复检,复检结果一阴一阳者再进行双孔复试,一种试剂阳性即定为阳性。阳性标本,用与初筛同批号金标试纸条重新检测。所有操作均严格遵守操作规程,并按试剂使用说明书判断结果。

2 结果

2008年1～8月金标法初筛合格的11265份无偿献血者标本,在实验室分别采用厦门新创和北京高达ELISA法HBsAg试剂盒进行检测,共检出阳性32份,漏检率0.28%(32/11265)。ELISA法S/CO≥1的32份标本用与初筛相同批号金标法试纸重新检测,30min内观察,结果见表1。

32份漏检标本金标法重新检测阳性与反应时间的对应关系见表2。

3 讨论

11265份金标法HBsAg初筛合格标本在实验室用ELISA法试剂检测,共检出32例阳性,这32份阳性标本再用与初筛相同批号金标试纸条重新检测,21份呈阳性反应。从表1可以看出,20份S/CO>10标本,金标法重新检测19例为阳性,1例为阴性;12份S/CO<10标本,金标法重新检测2例为阳性,10例为阴性。说明低值漏检主要是金标法灵敏度低所致。2例S/CO>20,金标法重新检测呈弱阳性反应,这与ELISA法判断结果虽然一致,但显色线的强弱与S/CO值关系不一致。表2显示10min内只有16例阳性,4例11～20min内呈阳性反应,1例20～30min呈阳性反应。

HBsAg金标法初筛漏检原因主要是:(1)金标试剂本身的局限性。金标法试剂的灵敏度不及ELISA法,会造成部分弱阳性标本的漏检[2];(2)加样量不规范。试剂说明书规定加样量为60μL,如果血量过少,会造成HBsAg浓度比实际浓度降低,引起漏检;如果血量过多特别是再混有红细胞,会造成血液外溢,且滤膜无法有效阻挡红细胞,使红细胞和血清一起向检测线移动,造成检测背景呈红色,影响弱阳性结果判断;(3)温度、湿度等环境因素过高或过低,都会影响抗原抗体反应,也可影响血清在滤膜上的层析速度,进而影响试验结果[3];(4)实验人员操作不规范,经验不足或操作失误等;(5)高值漏检可能与“带现象”或HBsAg变异型、亚型或试纸条自身原因有关;(6)反应时间不足是重要原因。

根据金标法检测HBsAg的特点,建立切实有效的预防措施,以减少漏检,节约宝贵血液资源。 ①建立标准操作规程并严格遵守,加强操作人员业务培训和责任心教育。②耐心做好献血者的解释工作,保证反应时间不低于10min,争取做到20min。③尽量保持适宜的环境温度、湿度。④未用完的试纸条,要密封保存,防止受潮。⑤选购灵敏度高、特异性好、加样量少、反应速度快的优质试纸。最好用ELISA法先筛选。发现试纸性能不稳定立即更换。

[参考文献]

[1]王凯. HBsAg金标快速检测在街头献血中的必要性[J]. 中国误诊学杂志,2003,3(6):905.

[2]赵晓华,李锦,李军,等. 5个厂家HBsAg金标诊断试剂的比较[J]. 中国输血杂志,2002,15(4):272-273.

[3]钱立琼,谭全旭,王鹏. 一种用于快速金标法检测HBsAg的加温箱[J]. 中国输血杂志,2004,17(5):380.

(收稿日期:2009-06-19)