薄层色谱法测定复方水杨酸乙二醇贴片的有关物质

李 珂，淳于兴华，宋亚波

（扶桑帝药〈青岛〉有限公司，山东 青岛 266101）

复方水杨酸乙二醇贴片为非甾体抗炎镇痛药[1]，适用于跌打损伤、骨折痛、肩周炎、腰背肌肉痛、冻疮以及各种关节炎引起的痛症。水杨酸乙二醇是处方中的主要有效成分之一，在制剂中的含量变化较大，是处方中最不稳定的组分。在水杨酸乙二醇原料药的质量标准[2]中，有关物质采用薄层色谱法控制。为防止长期贮存可能产生分解产物，患者参照文献[2]方法，采用自身对照法，建立了复方水杨酸乙二醇贴片有关物质的检测方法。

1 仪器与试药

硅胶G薄层板（青岛胜海精细硅胶化工有限公司）。水杨酸乙二醇（API公司，批号GH01）；复方水杨酸乙二醇贴片（帝国制药株式会社，批号为 7404，7405，7406）。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

展开剂：三氯甲烷 -醋酸乙酯 -冰醋酸（100∶100∶1）；显色剂：碘蒸气。

2.2 测定方法

溶液制备：取面积为8 cm×10 cm（约含水杨酸乙二醇0.1 g）的复方水杨酸乙二醇贴片，除去盖衬，精密称定，剪为4块，置烧瓶中，加甲醇50 mL，置75℃水浴中回流提取1 h，取下，密塞，立即置冷水浴中冷却，提取液转移至200 mL容量瓶中，残留物加甲醇50 mL，置75℃水浴中继续回流提取两次，每次30 min，合并提取液与上述甲醇提取液，并加甲醇至刻度，摇匀，静置，取上层清液作为供试品溶液。取供试品溶液1 mL，置50 mL量瓶中，用甲醇稀释并定容到刻度，作为对照溶液。

测定法：照薄层色谱法[2005年版《中国药典（二部）》附录ⅤB]试验，分别精密吸取上述溶液各20 μL点于同一硅胶G层板上，以三氯甲烷-醋酸乙酯-冰醋酸（100∶100∶1）为展开剂，展开约10 cm，将薄层板风干，在碘蒸气槽中放置2 h使显色。供试品溶液色谱中主斑点以外斑点，不得比对照品溶液色谱的斑点更深（2.0%）。

2.3 破坏性试验

取水杨酸乙二醇约0.8 g，精密称定，用甲醇溶解并稀释至200 mL，得水杨酸乙二醇原液。量取水杨酸乙二醇原液25 mL，置 250 mL量瓶中，加 0.2 mol/L盐酸液25 mL，室温放置6 h，加碱中和至中性，用甲醇稀释并定容到200 mL，得酸破坏溶液B。量取水杨酸乙二醇原液25 mL，置250 mL量瓶中，加0.2 mol/L氢氧化钠液25 mL，室温放置6 h，加酸中和至中性，用甲醇稀释并定容到200 mL，得碱破坏溶液C。量取水杨酸乙二醇原液25 mL，置250 mL量瓶中，加0.2 mol/L氯化钠溶液75 mL，100℃水浴回流加热6 h，冷却后用甲醇稀释并定容到200 mL，得高温破坏溶液D。取2.2项下对照溶液，作为对照溶液E。取2.2项下供试品溶液作为供试品溶液F。取不含主成分的空白制剂，按供试品溶液制备方法制备空白溶液O。精密量取 O，F，B，C，D，E溶液各 20 μL，点于同一硅胶板上，展开约10 cm后，取出，晾干，显色。薄层色谱见图1。可见，水杨酸乙二醇斑点清楚，与其他斑点分离完全，辅料对有关物质测定无干扰。

图1 破坏试验薄层色谱图

图2 样品薄层色谱图

2.4 检测限试验

量取水杨酸乙二醇原液，用甲醇逐级稀释，分别成浓度为10.00，5.00，2.50，1.25 μg/mL 的溶液，依法进行试验。结果质量浓度为 10.00，5.00，2.50 μg/mL 的溶液斑点清楚，1.25 μg/mL的溶液斑点几乎不可见。因此，水杨酸乙二醇的最低检测限定为0.05 μg。

2.5 样品检查

取3批样品依法测定，薄层色谱见图2。供试品溶液色谱中，除主斑点外无其他斑点，3批复方水杨酸乙二醇贴片的有关物质均小于2.0%。

3 结论

检查复方水杨酸乙二醇贴片有关物质时，以三氯甲烷-醋酸乙酯-冰醋酸（100∶100∶1）为展开剂、碘蒸气为显色剂分离度好、灵敏度高。可见，文中方法准确、灵敏、简便。

[1]李振宇，肖建德，罗新乐，等.复方水杨酸乙二醇透皮吸收贴剂治疗腰腿痛的临床观察[J]. 新医学，2004，35（9）：557-558.

[2]JX20060172，水杨酸乙二醇质量标准[S].