耿彦生,张 硕,赵晨燕,汪葆玥,田克恭,王佑春
戊型肝炎是由戊型肝炎病毒(Hepatitis E Virus,HEV)引起的急性病毒性肝炎,主要经肠道传播,既可散发也可暴发流行,我国是戊型肝炎的流行区。目前研究认为戊型肝炎为人畜共患疾病,猪是HEV的重要储存宿主和传染源〔1〕。除了猪之外,其他许多动物体内也检测到了HEV抗体,表明这些动物也存在HEV的感染〔2〕。最近美国学者从患肝脾肿大的鸡体内分离到一种新病毒,命名为禽戊型肝炎病毒(禽HEV),随后的研究发现健康鸡的体内也存在禽HEV感染〔3〕。为了解我国家禽戊型肝炎病毒的感染情况,我们分别在我国南方和北方15省、市(或自治区)采集了鸡和鸭的血清,进行了HEV抗原、抗体以及HEV RNA的检测,现报告如下。
1.1 血清样本鸡、鸭血清样本由中国动物疫病预防控制中心于2008年10-11月份采集于我国的15个省、市、自治区,每个省份选取1-2个养殖场。血清采集后低温保存和运输,到实验室后-20℃冻存。
1.2 血清HEV抗体和抗原的检测 应用北京万泰药业股份有限公司生产的戊型肝炎病毒抗原诊断试剂盒和戊型肝炎病毒总抗体(HEV-Ab)诊断试剂盒进行HEV抗原、抗体的检测。实验操作和结果判断按照试剂盒说明书进行。
1.3 HEV RNA的检测 根据血清学检测结果,对抗体阳性率较高的陕西、西藏和海南3个省份的所有血清样本以及其它HEV抗原阳性样本进行HEV核酸检测。应用北京金豪制药股份有限公司生产的戊型肝炎病毒 RNA检测试剂盒,对血清样本进行RNA提取。应用能够扩增HEV 1-4型的ORF2区域引物〔4〕和能够扩增ORF1解旋酶区域的保守的通用禽 HEV引物〔3〕,通过套式RT-PCR进行HEV RNA和禽HEV RNA检测。……