巢氏PCR判定西藏疟疾流行区传疟媒介*

武 松,黄 芳,张国庆,潘嘉云,王学忠,卓玛央金,胡永红,汤林华

2.中国疾病控制中心寄生虫病预防控制所,世界卫生组织疟疾、血吸虫病和丝虫病合作中心,上海 200025;

3.云南省寄生虫病研究所,普洱 665000;

4.西藏自治区林芝地区疾病预防控制中心,林芝860100

巢氏PCR判定西藏疟疾流行区传疟媒介*

武 松1,黄 芳2,张国庆2,潘嘉云2,王学忠3,卓玛央金4,胡永红4,汤林华2

目的确定西藏墨脱县疟疾流行区的疟疾传播媒介。方法根据2005、2006和2007年疟疾发病情况,在墨脱县选择了3个疟疾发病较高的自然村,采用人诱、牛诱、灯诱及清晨人房全捕等方法捕获成蚊,经形态学鉴定后麻醉处死,密封干燥,带回实验室-20℃冻存备用,采用混合样本法随机抽取10只多斑按蚊复合体为一份混合标本,提取蚊虫DNA。根据文献采用巢氏PCR扩增疟原虫小亚单位核糖体脱氧核糖核酸(SSU rDNA),并对阳性结果克隆测序,比对证实。结果共捕获按蚊5 345只,其中多斑按蚊复合体5 190只,带足按蚊155只,提取的360份多斑按蚊复合体混合样本DNA中发现子孢子阳性扩增样品2份,种型鉴定2份阳性混合样本均为伪威氏按蚊,PCR产物经克隆测序,NCBI BLAST同源性比对证实为疟原虫SSu rDNA基因片段。结论多斑按蚊复合体中的伪威氏按蚊为西藏林芝疟疾流行区的传疟媒介。

多斑按蚊复合体;子孢子;传疟媒介;西藏;巢氏聚合酶链反应

2.中国疾病控制中心寄生虫病预防控制所,世界卫生组织疟疾、血吸虫病和丝虫病合作中心,上海 200025;

3.云南省寄生虫病研究所,普洱 665000;

4.西藏自治区林芝地区疾病预防控制中心,林芝860100