三种交叉配血实验方法应用效果评价

张国平

三种交叉配血实验方法应用效果评价

张国平

目的对盐水法、抗人球蛋白法及凝聚胺法交叉配血试验进行比较,评价三种交叉配血试验方法的应用效果。方法输血送检血液标本 1253例,同时选用盐水法、抗人球蛋白法及凝聚胺法进行交叉配血试验。结果盐水法发现 1例阳性结果,凝聚胺法发现 3例阳性结果,且与抗人球蛋白法结果吻合。结论凝聚胺交叉配血试验是安全有效、简便快速、切实可行的交叉配血方法,值得推广应用。

盐水法;抗人球蛋白法;凝聚胺法;交叉配血试验

交叉配血试验是输血前一项重要的常规工作,其目的是检测受血者与供血者抗原抗体是否相容,防止输血反应发生,确保临床输血安全。由于盐水法具有简便快速的特点,在交叉配血工作中得到广泛应用。但是盐水法交叉配血试验只能检出不相配合的完全抗体(天然抗体IgM),而不能检出不完全抗体(免疫性抗体IgG)[1],使其安全性受到了极大限制。为此,我们选用低离子凝聚胺(polybrene)法进行交叉配血试验,并和盐水法、抗人球蛋白法进行了比较,取得了满意效果。

1 资料与方法

1.1 一般资料 输血送检血液标本 1253例。

1.2 试剂 抗 A、抗 B标准血清由长春博德生物技术有限责任公司提供;A型、B型试剂红细胞由上海血液生物医药有限责任公司提供;盐水抗 D血清由英国劳博公司生产提供;广谱抗球蛋白试剂由上海血液生物医药有限责任公司提供。polybrene试剂由台湾东耀企业有限公司提供。

1.3 主要仪器 KA-2200细胞洗涤离心机(日本 KUBOTA),微量移液器。

1.4 血型鉴定 按照有关规范要求,对受血者及献血者血液标本进行 ABO血型及 Rh血型鉴定[2]。选用与受血者ABO血型及Rh血型同型的献血者血液进行交叉配血实验。

1.5 交叉配血方法

1.5.1 凝聚胺配血法交叉配血试验,严格遵守试剂说明书。注意必须在显微镜下观察结果,以避免弱凝集现象的漏检。

1.5.2 盐水法交叉配血试验及抗人球蛋白法(Coombs)交叉配血试验按有关文献要求进行操作[3]。

1.6 统计学处理 数据用百分率进行统计处理。

2 结果

1253例凝聚胺法与传统的交叉配血法结果见表1。

表11253 例凝聚胺交叉配血法和传统配血法结果比较(例,%)

1253例交叉配血试验中,盐水法出现凝集阳性结果 1例,凝聚胺法、抗人球蛋白法均为 3例。其中 1例患者盐水法、凝聚胺法、抗人球蛋白法均为阳性结果,临床诊断及实验室检测证实为自身免疫性溶血性贫血患者。抗人球蛋白法出现凝集阳性结果的另外2例,凝聚胺法也为阳性结果,2例患者均为多次输血的血液病患者。

3 讨论

传统的交叉配血有盐水法、木瓜酶法、抗人球蛋白试验等方法。盐水配血法虽然简便快速,但不能检出免疫性抗体,单用盐水法配血存在一定的危险性,需增加木瓜酶法或抗人球蛋白法,检出免疫性抗体引起的配血不合,以进一步减少输血安全隐患。但木瓜酶法、抗人球蛋白法存在操作步骤繁琐、反应时间长、试剂效期短等缺点,其应用受到一定限制。

凝聚胺法是一种简便、快速、可靠的交叉配血方法,其基本原理是:凝聚胺是多价阳离子聚合物,能中和红细胞表面的负电荷,降低 Zeta电位,引起红细胞非特异性凝聚,凝聚现象是可逆的。当红细胞与血清在低离子介质中孵育,IgG抗体与红细胞表面上的相应抗原结合后在凝聚胺的作用下发生特异性凝集,凝集是不可逆的。当加入枸橼酸钠重悬液后,枸橼酸根的负电荷中和凝聚胺上的正电荷,非特异性的凝聚现象消失,而真正的特异性凝集不消失。

由表1可见,盐水法只发现了 1例阳性凝集现象,而凝聚胺法发现了 3例阳性凝集现象,与抗人球蛋白法结果完全吻合。聚凝胺法可以检出 IgM与IgG两种性质的抗体,可发现能引起溶血性输血反应的绝大多数抗体,故本法已逐渐推广使用。但有文献报道,聚凝胺法对Kell血型系统的部分抗体如抗 K、抗 Kpa、抗 Kpb不理想,而我国人群的 K基因频率几乎为 0,kk型几乎为 100%,至今未发现 Kell血型系统的抗体。

综上所述,凝聚胺法交叉配血试验能检出大多数不规则抗体,是安全有效、简便快速的交叉配血方法,值得推广应用。

[1] 王培华.输血技术学.第 2版.北京:人民卫生出版社,2002:126-131.

[2] 中华人民共和国卫生部.临床输血技术规范.卫医发[2000]184号.

[3] 中华人民共和国卫生部医政司.全国临床检验操作规程,第 3版.南京:东南大学出版社,2006:262-264.

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