何首乌饮对衰老大鼠学习记忆及下丘脑GnRH SPβ-EP含量的影响*

韩广明, 高晓兰, 牛嗣云, 高福禄

(1.承德医学院第二临床学院, 河北 承 德 067000 2.河北大学基础医学部, 河北 保 定 071000 3.河北师范大学生命科学学院, 河北 石家庄 050016)

本研究建立 D-半乳糖所致亚急性衰老大鼠模型,通过 Morris水迷宫行为测试;放射免疫法测定下丘脑 GnRH、P物质、β-内啡肽的含量,探讨何首乌饮抗脑衰老的机理。

1 材料和方法

1.1 实验动物的选择及分组：选用清洁级 8周龄 SD大鼠 80只,雌雄各半,体重 180-220g(由河北医科大学实验动物中心提供)。用生理盐水将 D-半乳糖配成 6%的溶液,按 300mg/kg.d给药,除正常组(N)10只外,其余大鼠连续腹腔注射 60 d,每天一次,建立衰老动物模型。然后进行 Morris水迷宫行为测试。潜伏期成绩与正常组比较明显延长,表明模型建立成功。然后将衰老大鼠随机分为模型组(M)10只、何首乌饮延缓衰老高剂量(Tg)、中剂量(Tz)、低剂量(Td)各 10只、自然恢复组(S-R)10只。何首乌饮组空腹灌胃何首乌饮,按体重每 100g给 0.4mL计算灌药量,自然恢复组每天灌胃等量的生理盐水,连续 60 d,每天一次。然后何首乌饮延缓衰老组(高、中、低)剂量组、自然恢复组进行 Morris水迷宫行为测试。

1.2 药物溶液的制备：何首乌饮方剂组成：何首乌(炙)、肉苁蓉 、怀牛膝、淫羊霍 、丹参 、茯苓等按重量比3：2：3：2：5：3比例混合,剪碎,水浸泡 1 h,然后水煎 2次,每次 30m in,过滤后浓缩至含生药分别为 2.4、4.8、9.6 g/m L(分别作为低、中、高剂量药液)。4℃保存,给药前复温至 25-30℃。

1.3 Morris水迷宫行为测试：各组大鼠做 Morris水迷宫测试,定位航行试验用于测试大鼠空间学习和记忆能力。在连续训练 5 d,每天训练 4次,每次随机选择一个象限作为入水点,观察并记录大鼠爬上平台的轨迹图、游泳速度及所需时间(潜伏期)。……