DOG1在 72例胃肠道间质瘤中的表达及临床意义

彭晓峰,余志金,杨清绪,许岸高

广东惠州市中心人民医院 1.病理科;2.消化内科,广东惠州 516001;3.惠州市医学研究所

胃肠道间质瘤(gastrointestinal stromal tumors, GIST)是最常见的胃肠道间叶源性肿瘤[1]。DOG1是新发现的GIST诊断标志之一,是由人类11q13上的CCND1-EMS1基因座所编码的8次穿膜蛋白[2]。本研究收集我院72例GIST,探讨DOG1在GIST中的表达,评价其在GIST诊断中的价值。

1 材料与方法

1.1 材料 共 72例胃肠道间质瘤,20例平滑肌肿瘤, 34例神经鞘瘤及28例孤立性纤维性肿瘤。石蜡组织块均来自广东省惠州市中心人民医院 2002年 ～2009年病理科存档蜡块。所有GIST病例均经规范化诊断。

1.2 试剂 一抗为DOG1、CD117、CD34、SMA、S-100。 DOG1为兔抗人单克隆抗体,为即用型。二抗为生物素化兔抗鼠。三抗为抗生物素的辣根过氧化物酶标记的抗体。均购自福建迈新公司。抗原修复液为枸橼酸钠抗原修复液(pH 6.0);显色剂为DAB;以PBS为缓冲液。

1.3 免疫组化 采用免疫组化S-P法。4μm厚切片常规脱蜡至水,置0.01 mol/L枸橼酸钠抗原修复液(pH 6.0)中高温修复抗原15min,保温10m in,自然冷却至室温。PBS洗3次×5 min。滴加一抗,置4℃冰箱过夜,PBS洗3次×5min。滴加生物素标记二抗(1∶200),37℃孵育30min,PBS洗3次×5min。过氧化物酶标链酶素一亲和素复合物(1∶200),37℃孵育30 min,PBS洗3次×5m in。新鲜配制DAB显色,苏木素复染胞核,透明并固封。采用福建迈新公司提供的阳性对照片;以PBS液代替一抗作空白对照。结果判定:每张切片由2位观察者双盲交换判断,DOG1的阳性部位在胞膜或胞浆,阳性信号为棕黄色、棕褐色,每例切片至少随机选择 10个 HPF,取平均值,每例切片阳性细胞数平均≥10%为阳性,否则为阴性。

1.4 统计学处理 SPSS 13.0统计软件分析,组间比较用卡方检验,P＜0.05为差异有统计学意义。……