黄玉兰,岳才军,张福振
(黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院,大庆163319)
木瓜别名皱皮木瓜、宣木瓜,为我国特有的野生果木之一。木瓜为蔷薇科木瓜属植物,用途广泛,集观赏、食用、药用于一体[1]。传统中医认为木瓜有舒筋活络、健脾开胃、舒肝止痛的功效[2,3]。现代研究表明,木瓜富含多种氨基酸及营养元素,并含有齐墩果酸、黄酮、SOD等活性物质,其中齐墩果酸(Oleanolic acid,简称OA)为木瓜的主要药效成分,具有消炎抑菌、降低转氨酶,促进肝细胞再生、防止肝硬化、降血脂、降血糖、提高机体免疫功能等作用,是当前治疗肝炎的有效药物之一[4]。
木瓜中齐墩果酸可由种子或果实中提取,多采用有机酸、醇、碱等方法,但存在提取率低、资源浪费、污染严重的弊端。研究表明,在培养的植物细胞、组织中,大部分次生代谢产物的含量超过了野生植物的含量,这也是植物细胞工程在中药现代化过程中具有巨大发展前景的重要原因之一[5]。本试验从木瓜芽孢中诱导出木瓜愈伤组织,并确立了愈伤组织中齐墩果酸的比色测定方法,为木瓜细胞的悬浮培养及齐墩果酸的工业化生产奠定基础。
实验材料为超市购买的木瓜,木瓜籽先用自来水、再用蒸馏水冲洗干净后待用;齐墩果酸标准品,批号为110709-200304,中国药品生物制品检定所;香草醛、高氯酸、冰醋酸、蔗糖等,均为分析纯;NAA(萘乙酸),2,4-D(2,4-二氯苯氧乙酸),6-BA(6-苄氨基嘌呤)为常规生化试剂。
用40mg·L-1的赤霉素处理24 h,再用质量……